ジストロフィン遺伝子からの新規転写産物のクローニング

抗肌营养不良蛋白基因新转录本的克隆

• 批准号: 10877124
• 负责人: 松尾 雅文
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877124/
• 关键词: ジストロフィン; アイソフォーム; クローニング

ジストロフィン遺伝子はヒト最大の遺伝子で、3000kbにもおよび、その全遺伝子構造は未だ解明されていない。現在までに多くの研究がなされ、ジストロフィン遺伝子に8種類のプロモーター領域が存在し、各々のプロモーターからジストロフィンのアイソフォームが産生されることが明らかにされている。私たちは、ジストロフィン遺伝子に関する研究を精力的に行ってき、ジストロフィンの新しいアイソフォームが発現していることを示唆する結果を得た。本研究は、この新しいジストロフィンのアイソフォームをクローニングし、その機能を明らかにするものである。ここでは、私たちが既に明らかにしたこのアイソフォームの1部の塩基配列を基点として、cDNAの5′あるいは3′方向へと順次その配列を明らかにするものである。これには、5′RACEあるいは3′RACEを用い、既知配列にデザインしたプライマーを用いてPCR増幅し、増幅断片を得た。そして、この増幅断片の塩基配列を自動塩基配列決定装置を用いて解析した。さらに、ここで明らかにした配列にプライマーをデザインし、同じ操作を繰り返した。その結果、現在までに、ほぼ3′端の塩基配列を明らかにすることに成功した。現在、5′端領域の全塩基配列を明らかにしつつある。今後この研究を推進し、この新しいアイソフォームの塩基配列を明らかにするものである。そして、明らかにした塩基配列の1部の塩基配列からプローブを合成し、これを用いてノーザンプロットを行い、この新しいアイソフォームの組織分布を解析する予定である。

ジ ス ト ロ フ ィ ン posthumous son 伝 は ヒ ト の biggest legacy 伝 で, 3000 KB に も お よ び, そ の は not totally survived 伝 structure だ interpret さ れ て い な い. Now ま で に more く の research が な さ れ, ジ ス ト ロ フ ィ ン posthumous son 伝 に 8 kinds の プ ロ モ ー タ が exist し ー field, various 々 の プ ロ モ ー タ ー か ら ジ ス ト ロ フ ィ ン の ア イ ソ フ ォ ー ム が produce さ れ る こ と が Ming ら か に さ れ て い る. Private た ち は, ジ ス ト ロ フ ィ ン posthumous son 伝 に masato す る research を に line energy っ て き, ジ ス ト ロ フ ィ ン の new し い ア イ ソ フ ォ ー ム が 発 now し て い る こ と を in stopping す た を る results. This study は, こ の new し い ジ ス ト ロ フ ィ ン の ア イ ソ フ ォ ー ム を ク ロ ー ニ ン グ し, そ の function を Ming ら か に す る も の で あ る. こ こ で は, private た ち が both に Ming ら か に し た こ の ア イ ソ フ ォ ー ム の one の salt base with column を bp と し て, cDNA の 5 'あ る い は 3' direction へ と progressive そ の match column を Ming ら か に す る も の で あ る. こ れ に は, 5 'RACE あ る い は 3' RACE を い, already know with column に デ ザ イ ン し た プ ラ イ マ ー を with い て PCR portrait rights し, raised fragment を た. Youdaoplaceholder0 て て, <s:1> <s:1> amplite-increasing fragment <s:1> base arrangement を, automatic base arrangement determination device を use そ て to analyze <s:1> た. さ ら に, こ こ で Ming ら か に し た match column に プ ラ イ マ ー を デ ザ イ ン し, with じ operation を Qiao り return し た. Youdaoplaceholder0 そ result, now までに, ほぼ3 '-end <s:1> base configuration を, ら にする にする とに successfully た. Now, in the 5 '-end domain, the <s:1> all-base configuration is を in ら に に <s:1> ある ある ある. In the future, research on <s:1> <s:1> will be を advanced, and new research will be carried out. <s:1> ア ソフォ ソフォ ム ム will be listed in を, ら ら にする, <s:1> である である である. そ し て, Ming ら か に し た salt base with one column の の salt base with column か ら プ ロ ー ブ を synthetic し, こ れ を with い て ノ ー ザ ン プ ロ ッ ト を い, こ の new し い ア イ ソ フ ォ ー ム の を distribution analytic す る designated で あ る.