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血清中DNAのマイクロサテライトを解析するがんの早期診断法の確立

血清DNA微卫星分析建立癌症早期诊断方法

基本信息

批准号：
09255234
负责人：
松尾雅文
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09255234/
关键词：
マイクロサテライトがん PCR 不安定性

项目摘要

DNAのミスマッチ修復酵素に異常を有するがん組織では、マイクロサテライトの不安定性があることが明らかにされている。がんの進展にともないこうしたマイクロサテライト不安定性を有したDNAが血中に出現することが十分に予測されるが、これを効果的にとらえた報告は少ない。研究者らはヒトの最大の遺伝子であるジストロフィン遺伝子の解析に長く従事して、白血球中の超微量のジストロフィンmRNAを有効に抽出する方法を確立するとともに、PCRに重複PCRを応用することなどにより飛躍的に解析能力を向上させ、ジストロフィン遺伝子異常に関する世界的業績を次々挙げてきた。本研究では、こうした超微量mRNA解析技術を集積させ、血清中の微量のDNAを試料としたマイクロサテライトの解析法の確立をはかった。血清中のDNAの抽出には、採血した血液から細胞成分を十分に分離しその上清画分の血清を用いた。そして、特異性を挙げるとともにDNAの増幅効率をも増やすため、セミ重複PCRを応用することにより、血清中のDNAを増幅することに成功した。さらに、蛍光ラベルしたプライマーをPCR時に用いることにより蛍光でラベルされた増幅産物を得、この蛍光ラベル増幅DNAを自動DNAシークエンサーにて分析した。そして、増幅産物のマイクロサテライトについて解析したところ解析に十分に耐えうる増幅産物であることが判明した。現在、研究者らが発見したすでにがん組織においてマイクロサテライトの不安定性が明らかとなった患者で、患者の組織におけるマイクロサテライトの不安定性と血清中DNAの不安定性とが一致するか否かを検討している。本研究の成果は、血清を用いた画期的ながんの早期診断法の確立を大きく促進するものである。

The DNA repair enzyme is abnormal and the tissue is damaged.イクロサテライトの无码があることが明らかにされている.がんの Progress にともないこうしたマイクロサテライトUncertainty を有したDNAがblood In the middle of the report, there is a very good prediction of the effect of the することがにされるが and the これを. The report of the は小ない. Researcher らはヒトの大の缝子であるジストロフィン缝子のanalyticsに长く従事A method for effectively extracting ultra-trace amounts of mRNA from white blood cells has been established.するとともに, PCR に Repeat PCR を応することなどによりにanalytical capabilities have leapt The performance of を上させ、ジストロフィン弝子 abnormal に关する世を时々げてきた. In this study, the ultra-trace amount of mRNA analysis technology was accumulated, and the analysis method of trace amounts of DNA in serum was established. The DNA in the serum is extracted, the blood is collected, the cell components are separated, and the supernatant is drawn to separate the serum.そして、Specificity を挙げるとともにDNA amplification efficiency をも嗗やすため、セミ重The multiplex PCR was successfully used and the DNA in the serum was amplified successfully. It is used when PCR The amplification product is obtained and the automatic DNA amplification product is analyzed.そして、Amplified product のマイクロサテライトについてanalytics したところANALYSISにVERY にresistantえうるAMPLIFIED PRODUCT であることが clarificationした. Now, the researcher, らが発见したすでにがんorganizing the においてマイクロサテライトの unstable が明らかとなったpatient, is The instability of the tissue and the instability of the DNA in the serum are consistent and consistent. As a result of this study, the early diagnosis method of serum was established and the early diagnosis method was established and promoted.