血清中DNAのマイクロサテライトを解析するがんの早期診断法の確立

血清DNA微卫星分析建立癌症早期诊断方法

• 批准号: 09255234
• 负责人: 松尾 雅文
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09255234/
• 关键词: マイクロサテライト; がん; PCR; 不安定性

DNAのミスマッチ修復酵素に異常を有するがん組織では、マイクロサテライトの不安定性があることが明らかにされている。がんの進展にともないこうしたマイクロサテライト不安定性を有したDNAが血中に出現することが十分に予測されるが、これを効果的にとらえた報告は少ない。研究者らはヒトの最大の遺伝子であるジストロフィン遺伝子の解析に長く従事して、白血球中の超微量のジストロフィンmRNAを有効に抽出する方法を確立するとともに、PCRに重複PCRを応用することなどにより飛躍的に解析能力を向上させ、ジストロフィン遺伝子異常に関する世界的業績を次々挙げてきた。本研究では、こうした超微量mRNA解析技術を集積させ、血清中の微量のDNAを試料としたマイクロサテライトの解析法の確立をはかった。血清中のDNAの抽出には、採血した血液から細胞成分を十分に分離しその上清画分の血清を用いた。そして、特異性を挙げるとともにDNAの増幅効率をも増やすため、セミ重複PCRを応用することにより、血清中のDNAを増幅することに成功した。さらに、蛍光ラベルしたプライマーをPCR時に用いることにより蛍光でラベルされた増幅産物を得、この蛍光ラベル増幅DNAを自動DNAシークエンサーにて分析した。そして、増幅産物のマイクロサテライトについて解析したところ解析に十分に耐えうる増幅産物であることが判明した。現在、研究者らが発見したすでにがん組織においてマイクロサテライトの不安定性が明らかとなった患者で、患者の組織におけるマイクロサテライトの不安定性と血清中DNAの不安定性とが一致するか否かを検討している。本研究の成果は、血清を用いた画期的ながんの早期診断法の確立を大きく促進するものである。

There are many factors affecting the activity of enzyme in DNA system, such as tissue, enzyme, enzyme. In the final analysis of the situation, there are signs of anxiety in the blood of DNA patients, which show that there is a significant increase in the number of patients who are suffering from severe illness. The researchers told the researchers that there was no significant difference between the two groups in the analysis of long-term symptoms, ultra-trace levels in white blood cells, mRNA in white blood cells, methods to make sure that there was an increase in the analytical ability of the patients, and that the analytical ability of the PCR was significantly higher than that of the control group. I don't know what to do. I don't know what's going on in the world. In this study, the ultra-trace mRNA analysis technique was used to determine the concentration of trace DNA in serum. The serum was extracted from DNA, blood, blood, cellular composition, separation, supernatant, serum and blood. The frequency of DNA was significantly higher than that of the control, the frequency of PCR was higher than that of the control, and the amplitude of DNA in the serum was significantly higher than that of the control. In order to analyze the PCR, you can use the light source to analyze the image of the object, and the DNA to automatically analyze the data. There is a lot of tolerance in the analysis of the object, the At present, the researchers have seen that the tissue tissue test shows that there is no significant difference between the two groups. Now, the researchers can see that there is no significant difference between the two groups. Now, the researchers have seen that there is no sign of anxiety in the tissue of patients and patients. Now, the researchers have seen that the tissue samples of the patients and the patients have been detected in the serum of the patients and the patients. The results showed that the serum DNA levels were consistent. In this study, the results and serum samples were used in the early stage of the study to ensure the establishment of a large scale to promote the development of the disease.

项目成果

Shiga,N., Y.Takeshima,H. Sakamoto,K.et al.: "Disruption of the splicing enhancer sequence within exon 27 of the dystrophin gene by a nonsense mutation induces partial skipping of the exon and is resposible for Becker muscular dystrophy." J.Clin.Invest.100

滋贺县，N.，Y.竹岛，H.

Sakakibara,T. Nakamura,T. Yamamoto,M.et al.: "Microsatellite instability in Japanese hereditary nonpolyposis colorectal cancer does not induce mutation of a simple repeat sequence of the bax gene." Cancer Lett.(in press).

榊原，T.