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アセチルコリン受容体とNa^+,K^+-ATPaseの細胞膜上での局在化の制御機構…ナノメートル計測-ピコニュートン操作法による1分子レベルでの解析による研究

细胞膜上乙酰胆碱受体和Na^+,K^+-ATP酶定位的控制机制...利用皮克顿操作方法进行单分子水平纳米测量和分析的研究

基本信息

批准号：
08268215
负责人：
楠見明弘
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は金コロイドをNa^+,K^+-ATPaseに結合させて、細胞の自由表面上のそれらの運動を一分子レベルで観察した。光ピンセットによる牽引に対する応答を調べた結果、約20%が細胞骨格結合型であること、約80%の分子は、細胞骨格非結合型で、膜骨格フェンスで仕切られたコンパートメント間をホップしていく様な拡散運動をしていることが示された。自由表面での運動を調べているのは、これらのタンパク質の局在化の機構を調べたいからである。これらの運動の大部分がホップ拡散であることがわかってきたので、1分子レベルでのホップ拡散を記述するための数学的な枠組みを整備することにした。まず、1次元空間に一定の間隔で不完全反射壁をおき、この空間での粒子の拡散運動を記述する簡易式を導いた。完全な解も得られるが、複雑すぎて、コンピュータ上での計算時間を考えると、実際の実験データの解析には不向きである。さらに、単純拡散運動や、一箇所に閉じ込められた運動と区別するための統計的手法を確立した。これらを用いて、やはりホップ拡散をおこなっている粒子が全体の80%であること、微視的拡散係数は1.7x10^<-9>cm^2/s、コンパートメントの面積は平均0.25μm^2、1つのコンパートメント内の滞在時間は平均5秒であることなどが示された。

This year's Na^+, K^+-ATPase binding is done, and the movement of a molecule on the free surface of the cell is observed. The results of the light ピンセットによるtraction に対する応answer をadjusted べた, about 20% of the cytoskeletal bone combined type であること, about 80% of the molecular は, the cytoskeletal structure Non-bonding type, membrane bone grid フェンスでShiqi られたコンパートメントMATTER The movement of the free surface is the movement of the movement, and the movement of the surface is the movement of the structure.これらの动のmostがホップ拡sanであることがわかってきたので、1moleculeレベルでのホップ拡sanを Description of するためのMATHEMATICS な枠组みを Prepared することにした.まず, the 1-dimensional space has a certain interval and the incomplete reflection wall をおき, and the このspace has a particle scattering motion を description する a simple formula を guide いた. Complete solution calculation Time を考えると、実记の実験データのanalytics には不向きである.さらに, simple 拡san movement や, 一箇sho close じ込められたmotion と difference するためのstatistical technique をestablished した.これらを用いて、やはりホップ拡SanをおこなっているParticlesが全の80% であること, microscopic scattering coefficient は1.7x10^<-9>cm^ 2/s, コンパートメントのarea average 0.25μm^2, 1つのコThe average dwell time of ンパートメントは is 5 seconds on average.