新しいグルタチオン抱合体およびP糖蛋白型排出ポンプの構造と機能

新型谷胱甘肽缀合物和P-糖蛋白外排泵的结构和功能

• 批准号: 08268239
• 负责人: 和田 守正
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08268239/
• 关键词: チャネル; トランスポーター; ABCファミリー; MDR; MRP; 薬剤耐性; YAC; ディファレンシャル・ディスプレイ

本研究の目的はATP駆動型トランスポータとチャンネルの構造、機能協関を明らかにするために、トランスポータの機能異常及び、突然変異の宝庫である様々な薬剤耐性株から新しいトランスポータ遺伝子を単離し、解析することにある。この目的に沿って今年度は3つのアプローチにより以下の成果をあげた。【1】ATP結合カセットのプライマーを用いたPCRベースのアプローチにより、ヒトcMOAT(canalicular multispecific organic anion transporter)遺伝子を単離した。また、細胞内蓄積の下がったシスプラチン耐性株3株で同遺伝子の発現亢進を認め、ヒトcMOATがグルタチオン抱合体排出ポンプ(GS-Xポンプ)である可能性が示唆された。疎水性解析の結果を、MRP,MDR1とともに図1に示す。【2】Differential display法により、シスプラチン耐性株で発現量が亢進するクローンが8つ単離された。うち2クローンはアクチン結合蛋白質のT-プラスチンと同定され、細胞内蓄積の低下したシスプラチン耐性株3株でいずれも発現亢進が認められ、チャネルとトランスポーターの機能協関におよぼす細胞骨格系の役割という視点から今後進めていきたい。【3】ヒト染色体7q21.1のMDR遺伝子領域から、エキソントラップ法により新しいトランスポーター遺伝子の単離を試みた結果、ソルシンを含む数個のクローンが得られた。ソルシンは最近、リアノジンリセプターを安定化させるという報告があり、トランスポーター関連遺伝子のゲノム上での有機的編成という視点から興味深い。

Purpose this study の は ATP 駆 moving type ト ラ ン ス ポ ー タ と チ ャ ン ネ ル の structure, function of masato を Ming ら か に す る た め に, ト ラ ン ス ポ ー タ の parafunction and び, suddenly - different の treasure で あ る others 々 な 薬 tonic patience strains か ら new し い ト ラ ン ス ポ ー タ heritage 伝 son を 単 from し, parse す る こ と に あ る. The に objective に follows the って results of this year って 3 アプロ アプロ チによ チによ って をあげた をあげた. 【 1 】 combined with ATP カ セ ッ ト の プ ラ イ マ ー を with い た PCR ベ ー ス の ア プ ロ ー チ に よ り, ヒ ト cMOAT (canalicular multispecific organic anion from) heritage 伝 son を 単 from し た. ま た, intracellular accumulation の が っ た シ ス プ ラ チ ン patience seedlings で 3 with heritage 伝 son の 発 hyperthyroidism を now recognize め, ヒ ト cMOAT が グ ル タ チ オ ン hold fit out ポ ン プ (GS - X ポ ン プ) で あ が る possibility in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0 water-based analysis <s:1> results を, MRP,MDR1とと に に figure 1に shows す. [2] Differential display method に よ り, シ ス プ ラ チ ン patience strains で 発 now quantity が hyperthyroidism す る ク ロ ー ン が 8 つ 単 from さ れ た. う ち 2 ク ロ ー ン は ア ク チ ン binding protein の T - プ ラ ス チ ン と with fixed さ れ, intracellular accumulation of low の し た シ ス プ ラ チ ン patience seedlings で 3 い ず れ も 発 hyperthyroidism が now recognize め ら れ, チ ャ ネ ル と ト ラ ン ス ポ ー タ ー の function of masato に お よ ぼ す cells cut bone is の service と い う viewpoints か ら into future め て い き た い. [3] ヒ ト chromosome 7 q21. 1 の MDR heritage 伝 sub-fields か ら, エ キ ソ ン ト ラ ッ プ method に よ り new し い ト ラ ン ス ポ ー タ ー posthumous son 伝 の 単 from を try み た results, ソ ル シ ン を containing む several の ク ロ ー ン が must ら れ た. ソ ル シ ン は recently, リ ア ノ ジ ン リ セ プ タ ー を stabilization さ せ る と い う report が あ り, ト ラ ン ス ポ ー タ ー masato even heritage 伝 son の ゲ ノ ム on で の organic woven と い う viewpoints か ら tumblers deep い.

项目成果

A.Yokomizo: "Mar kedly decreased expression of glutathione S-transferase-p gene in human cancer cell ines resistant to buthioninesulfoximine,an inhibitor of cellular glutathionesynthesis" J.Biol.Chem.270. 19451-19457 (1995)

A. Yokomizo：“对丁硫氨酸亚磺酰亚胺（一种细胞谷胱甘肽合成抑制剂）具有抗性的人癌细胞中谷胱甘肽 S-转移酶-p 基因的表达显着降低”J.Biol.Chem.270。

Taniguchi,K.: "Drug-induced down-regulation of topoisomeraase l in human epidermoid cancer cells resistant tosaintopin and camptothecins" Cancer Research. 56. 2348-2354 (1996)

Taniguchi, K.：“药物诱导的对桑托品和喜树碱耐药的人表皮样癌细胞中拓扑异构酶 l 的下调”癌症研究。

Taniguchi,K.: "A human canalicular multispecific or ganic anion transporter (cMOAT) gene is overexpressed in cisplatin resistant human cancer cell lines with decreased drug accumulation." Cancer Research. 56. 4124-4129 (1996)

Taniguchi,K.：“人小管多特异性或有机阴离子转运蛋白 (cMOAT) 基因在顺铂耐药的人癌细胞系中过度表达，药物蓄积减少。”

"Functional expression of yeast artificial chromosome(YAC)-human multidrug resistance genesin mouse cells" Genome Research. 5. 245-258 (1995)

“酵母人工染色体（YAC）-人类多药耐药基因在小鼠细胞中的功能表达”基因组研究。

Hisano,T.: "Increased Expression of T-Plastin Gene in Cisplatin-Resistant Human Cancer Cells : Identification by mRNA Differential Dysplay." FEBS Letter. 397. 101-107 (1996)

Hisano,T.：“顺铂抗性人类癌细胞中 T-Plastin 基因的表达增加：通过 mRNA 差异性失调进行鉴定”。