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シナプス形成とその発達における神経分化因子の機能と役割

神经分化因子在突触发生及其发展中的功能和作用

基本信息

批准号：
08271213
负责人：
那波宏之
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08271213/
关键词：
シナプス形態スパイン海馬神経発達細胞培養

项目摘要

これまでよく使われていたG.Bankerらの低密度分散カルチャー法を改良させたグリア/ニューロン2層培養法を用いてラット胎児より海馬神経細胞を調整し、脳のシナプス後部の分化・発達・成熟過程を調べた。後シナプス部ドレブリンに対する抗体で培養した海馬神経細胞を染色すると、培養初期はほとんど全ての成長円錐が染まってくるが、7日目をこえると軸索はほとんど染まらず、デンドライトが浮き上がって見える。この時期に前シナプス部マーカー、シナプトタグミン抗体による二重染色を行うと、シナプトタグミンで染色されていないスパイン様構造を有する神経細胞が発見される。この細胞は、ほとんど2極性のもので、介在神経と推察される。この前シナプス部を持たないスパイン、いわゆるフリースパインは、後シナプス分子とされるNMDA受容体抗体でも染色され、培養の日数が増すにつれて、減少してゆく。しかし、テトロドトキシンやNMDA受容体の阻害剤を培養液に添加すると増加し、2倍近い長さにまで伸長した。これまでの小脳発達ミュータントマウスの解析によると、プルキンエ細胞上のスパインは、顆粒細胞が変性脱落して前シナプスが存在しなくても発達し、そこにはPSDとよばれる後シナプス構造も出来上がることが報告されていた。スパインに特異的なアクチン系等の細胞骨格タンパク、ドレブリン染色の今回の結果は、我々が昨年度報告していたデンドライトに付随するフィロポヂアが、前シナプス部を持たないフリースパインであることを立証した。このことは、一部の中枢シナプスは、筋・運動神経接合部シナプスの発達とは、異なり、前シナプス部の情報に依存しないで成長することを示唆している。このフリースパインは主にGABAを含む介在神経細胞に観察され、錐体神経細胞上には、ほとんど観察されない。報告のあるプルキンエ細胞もGABA含有性であることを考えあわせると、抑制性神経細胞と興奮性神経細胞では、異なった後シナプス発達のメカニズムが存在するのかもしれない。

This method was improved by G.Banker's low-density dispersion culture method, which was used to regulate the differentiation, development and maturation of hippocampal neurons. After the first part of the culture, the hippocampus cells were stained with antibodies. At the beginning of the culture, the growth cones were stained with antibodies. On the 7th day, the axons were stained with antibodies. This period of time before the start of the first part of the study, the first part of the study, the second part of the study, the third part of the study, the fourth part of the study, the fifth part of the study, the fourth part of the study, the fifth part of the study, the fifth part of the study, the fourth part of the study, the study, the fourth part of the study, the fifth part of the study, the study, the fourth part of the study, the study, the fourth part of the study, the study The cell is in the middle of the nervous system. The number of days of incubation for NMDA receptor antibodies increased and decreased. When Tedrokeshine and NMDA receptor inhibitors were added to the culture medium, the growth was increased, and the length was nearly doubled. This is the first time that a cell has been identified and analyzed. The first time that a cell has been identified and analyzed, the second time that a cell has been identified and analyzed, the third time that a cell has been identified and analyzed. The results of this study are based on our annual report on cell culture and cell culture. The central part of the brain is connected to the muscle and the brain. The central part of the brain is connected to the brain. The central part of the brain is This is the first time that GABA has been detected in neurons. Report on the existence of GABA in inhibitory neurons and excitatory neurons