GATA転写因子と造血細胞の増殖、分化および造血器腫瘍の成因に関する研究

GATA转录因子、造血细胞增殖分化及造血肿瘤发病机制研究

• 批准号: 08261207
• 负责人: 斎藤 英彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08261207/
• 关键词: GATA-2; GATA転写因子; リン酸化; MAPキナーゼ

1.GATA転写因子のリン酸化部位の同定GATA-1のSer26とSer178がMAPキナーゼのリン酸化部位であることを合成ペプチドを用いたin vitro kination assayにて確認した。2.GATA転写因子のリン酸化の機能GATA-1の変異体とMAPキナーゼ・キナーゼ変異体のそれぞれの発現ベクターをCOS細胞の中に供発現させMAPキナーゼによるリン酸化によってはDNA結合能およびレポーター遺伝子を用いた転写活性能には有意差を認めなかった。GATA-2に関しては、今までそのnatural targetがErythropoietin Promoterを除いてはほとんど解明されていなかったが、我々はHIVのlong terminal repeat(LTR)の中にGATAsiteが存在し実際に造血前駆細胞のなかでGATA-2が結合し転写活性を誘導することを見い出した。このnatural targetを用いてGATA-2とMAPキナーゼ・キナーゼ変異体の発現ベクターをCOS細胞の中に供発現させMAPキナーゼによるリン酸化によってGATA-2による転写活性能がdownregulateされることを見い出した。(第一回造血幹細胞シンポジウム 1996東京、にて発表)一方、最近我々はTwo hybrid SystemによりGATA-2と結合する未知の蛋白を同定した(未発表)。将来的にはこの蛋白と結合能にリン酸化がどのように関与しているかについても検討する予定である。3.サイトカイン刺激によるGATA転写因子のリン酸化の意義サイトカイン依存性の白血病細胞株BAF3細胞とmurine Epo receptorを導入した細胞を樹立して種々のサイトカイン刺激試験を施行した。その結果、IL-3,Steel Factor,Epo刺激によりMAPキナーゼ経路が活性化された際にGATA-2のリン酸化が認められ、増殖刺激におけるシグナル反応におけるGATA-2の役割の重要性が確認された。

1. The identification of GATA-1 Ser26 and Ser178 and MAP-1 Ser26 and Ser 178 in vitro activation assay 2. GATA-1 gene expression and its function of DNA acidification in COS cells. GATA-1 gene expression and its function of DNA binding and its function in COS cells. GATA-2 is a natural target for Erythropoietin Promoter, but it is not clear that GATA-2 binding activity is induced in long terminal repeat(LTR) of HIV. This natural target is used in the development of GATA-2 and MAP in COS cells. MAP in COS cells is used in the development of GATA-2 and MAP in COS cells. (The first hematopoietic stem cell System was developed in Tokyo in 1996.) Recently, Two hybrid systems were developed to identify unknown proteins that bind to GATA-2. In the future, the protein binding energy will be determined. 3. The significance of GATA gene expression in BAF3 cells and murine-epo receptor expression in BAF3 cells The results showed that IL-3,Steel Factor,Epo stimulation, MAP and GATA-2 activation were important for GATA-2 activation.

项目成果

Anthony M.Ford: "Regulation of the myelo peroxidase enhancer binding protein S PVI,C-EBP_2-β,and -δ" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 93. 10838-10843 (1996)

Anthony M.Ford：“骨髓过氧化物酶增强剂结合蛋白 S PVI、C-EBP_2-β 和 -δ 的调节”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93. 10838-10843 (1996)。

Masayuki Towatari: "Constitutive activation of mitogen-activated protein Kinase pathway in acute leukemia cells" Leukemia. (in press). (1997)

Masayuki Towatari：“急性白血病细胞中丝裂原激活蛋白激酶途径的组成性激活”白血病。