甲殻類のCHH族ペプチドをプローブとした昆虫前胸腺抑制ホルモンの検索

以甲壳动物CHH组肽为探针寻找昆虫前胸激素

基本信息

批准号：
08276204
负责人：
渡邉俊樹
金额：
$ 0.83万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08276204/
关键词：
昆虫甲殻類カイコ変態エクジソン前胸腺 CHH族ペプチド脱皮

项目摘要

甲殻類の眼柄中のX器官-サイナス腺系からは、血糖上昇、Y器官からのエクジソン放出の抑制、卵黄形成抑制等の活性を持つ構造的に類似した一群の神経ペプチド(CHH族ペプチド)が分泌される。CHH族ペプチドはクモ、バッタでも近年見つかっており、節足動物一般に広く存在すると予想されている。本研究は、完全変態を行う昆虫(ここではカイコ)においてCHH族ペプチドを分子生物学的手法を用いて検索し、その作用とりわけ前胸腺からのエクジソン放出の抑制活性の有無を調べることを目的としている。既知のCHH族ペプチドにおいて比較的良く保存された2つの領域のペプチド配列をもとに2つの縮重オリゴヌクレオチドプライマーを作成し、カイコのゲノムDNAをテンプレートとしたPCRを行い、CHH族ペプチドをコードする遺伝子配列の一部と思われる配列を得た。その配列の一部を用いて、5齢幼虫の中枢神経系およびそれに付随した内分泌器官より調製したcDNAをテンプレートとして5'RACE法を行い、5'側の配列を含むcDNA断片を得た。この断片(281ヌクレオチド)中には既知のCHH族ペプチドに類似した翻訳アミノ酸配列が含まれていることから、カイコのCHH族ペプチド前駆体をコードするmRNAの一部であると考えられた。今後はこのcDNAおよびそれがコードするペプチドの全構造の解析を行い、さらに産生細胞の同定およびペプチドの機能の解析を行う予定である。

甲壳类动物中的Xinus腺系统与结构相似的神经肽（CHH组肽）分泌，其活性（例如增加的血糖，抑制Y Y器官中的Ecdysone释放），并抑制蛋黄的形成。近年来，在蜘蛛和蚱hoppers中发现了CHH肽，预计将在节肢动物中广泛存在。这项研究旨在寻找使用分子生物学技术发生完全变态（这里的蚕）的昆虫中的CHH组肽，并确定它们的作用是否特别有效地抑制从胸骨中释放的埃dy虫。基于两个区域的肽序列制备了两个简并寡核苷酸引物，这些区域在已知的CHH组肽中相对保守，并使用蚕穴基因组DNA作为模板进行PCR，以获得似乎是编码CHH组肽的基因序列的一部分。使用序列的一部分，用第五龄幼虫的中枢神经系统制备的cDNA和相关的内分泌器官被用作模板，以获得含有5'面序列的cDNA片段。该片段（281个核苷酸）包含类似于已知CHH组肽的翻译氨基酸序列，被认为是编码蚕chh组肽前体的mRNA的一部分。将来，我们将分析该cDNA的整个结构及其所编码的肽，并进一步识别产生的细胞并分析肽的功能。