HTLV-1によるTリンパ球腫瘍化機構としてのRNA品質管理機構NMDの撹乱

HTLV-1对RNA质量控制机制NMD的干扰作为T淋巴细胞肿瘤发生的机制

基本信息

批准号：
19659241
负责人：
渡邉俊樹
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659241/
关键词：
HTLV-1 NMD Rex Tax RNA管理レトロウィルス Upf1

项目摘要

成人T細胞白血病(ALT)はHTLV-1感染細胞の腫瘍化によって発症する。ウイルス遺伝子産物にいよる腫瘍化機構の一つとして、宿主細胞のRNA品質管理機構であるNMDをウイルス遺伝子産物が脱制御する可能性を検討した。その結果、ウイルスのがん蛋白質とされるTAXとNMDのコア蛋白質であるUPF1のin vivoとin vitroの実験系で相互作用が確認された。次に、NMD活性をモニターするLuciferaseを用いた人工的なレポーター系を構築し、それを利用してHTLV-1関連細胞株においてNMDが阻害されている傾向にあることを確認した。続いて、供培養感染実験によって、HTLV-1の感染によって、宿主細胞においてNMDが阻害されるということを初めて証明した。さらに、このレポーター系を用いて各HTLV-1ウイルス蛋白質の一過性過剰発現系を用いた解析を行い、HTLV-1感染による宿主細胞NMDの阻害が、Tax蛋白質ではなくRex蛋白質によるということを示唆するデータを得た。引き続き、Rex蛋白質による宿主細胞NMDの阻害機構の解析を開始している。これには、NMD機能複合体の中心的な蛋白質であるUPF1に着目して、RexとUPF1の相互作用はあるのか、UPF1のリン酸化状態に及ぼす影響等を解析していく予定である。また、NMDの阻害によって生ずる異常mRNAおよびそれにコードされる蛋白質が宿主細胞のに及ぼす影響を、腫瘍化の観点から検討中である。一方、HTLV-1のRNAゲノムはNMDあるいはSMDの基質となりうる構造を持つ事から、Rex蛋白質によるNMD阻害がウイルスのライフサイクルに取ってどのような意義を持つかに関しての解析を進めている。

成人T细胞白血病（ALT）通过HTLV-1感染细胞的肿瘤发生发展。作为病毒基因产物肿瘤性转化的机制之一，我们研究了病毒基因产物过失调节NMD的可能性，NMD是宿主细胞的RNA质量控制机制。结果，在体内和体外实验中证实了税收，NMD和UPF1的核心蛋白质之间的相互作用。接下来，使用荧光素酶构建人工记者系统，该系统可以监视NMD活性，并用它来确认NMD倾向于在HTLV-1相关的细胞系中抑制NMD。接下来，培养感染实验首次证明了用HTLV-1感染抑制宿主细胞中NMD的感染。此外，该报告基因系统用于分析每种HTLV-1病毒蛋白瞬时过表达的系统，并获得了数据，该数据表明，由于REX蛋白而不是税收蛋白，这表明HTLV-1感染引起的宿主细胞NMD抑制是造成的。我们继续开始分析REX蛋白抑制宿主细胞NMD的机制。这将集中于NMD功能复合物中的中心蛋白UPF1，并分析REX和UPF1之间是否存在相互作用及其对UPF1磷酸化态的影响。此外，从肿瘤发生的角度研究了NMD抑制对宿主细胞所编码的异常mRNA和蛋白质的作用。另一方面，由于HTLV-1的RNA基因组具有可以作为NMD或SMD的底物的结构，因此我们目前正在分析REX蛋白在病毒生命周期中rex蛋白抑制NMD的重要性。