HTLV-1 TaxによるゲノムDNAメチル化制御異常の誘導機構
HTLV-1 Tax诱导异常基因组DNA甲基化调控的机制
基本信息
- 批准号:11877038
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:1999
- 资助国家:日本
- 起止时间:1999 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
癌細胞でDNAメチル化異常が認められることは周知であるが、その誘導に関わる分子機構は不明である。細胞分裂=DNA複製後のゲノムのメチル化パターンの継承は"maintenance methylase=Dnmt1"に依存する。Dnmt1はDNA-Dnmt1-PCNA複合体形成を介して機能するが、本研究では、ヒト白血病ウイルスHTLV-1のoncoproteinであるTaxがp21WAF1の発現誘導を介してこのDNA-Dnmt1-PCNA複合体形成を競合的に阻害し、DNAメチル化パターンの継承を撹乱し、ゲノムのhypomethylation化を促進すると言う仮説に基づき、Taxがメチル化されたプロモーターを脱メチル化する事を解析する系の確立を目指した。HTLV-1感染T細胞株の解析では、ウイルス遺伝子を発現しTaxの存在する細胞ではIFN-γ等のサイトカイン遺伝子のプロモーター領域のCpGが脱メチル化しているのに対し、MT-1等のウイルス遺伝子の発現していない細胞株やJurkatではメチル化レベルが低下している事が明らかになった。さらにCdで誘導可能なTaxをもつJurkat細胞JPX9を用いて、Taxの発現とメチル化の相関の解析を試みた。しかし、JPX9はTaxの発現に伴いp21WAF1の発現が誘導されるが、2日目以降著明なアポトーシスを示す事から、DNA複製サイクルを経た後のCpGメチル化解析には適さないことが明らかになった。そこで、Taxによるアポトーシス誘導に対して体制を示すJPX9細胞の作製を試みる事にし、レトロウイルスベクターを用いてアポトーシス抑制因子であるCrmAを導入したJPX9-Crmを作製し解析を進めている。
Cancer cells で DNA メ チ ル mineralization anomaly が recognize め ら れ る こ と は known で あ る が, そ の induced に masato わ る molecular institutions は unknown で あ る. Cell division = after DNA replication の ゲ ノ ム の メ チ ル change パ タ ー ン の 継 bearing は "maintenance methylase = Dnmt1" に dependent す る. Dnmt1 は DNA - Dnmt1 - PCNA complex formation を interface し て function す る が, this study で は, ヒ ト leukemia ウ イ ル ス HTLV - 1 の oncoprotein で あ る Tax が p21WAF1 の 発 now induced を interface し て こ の DNA - Dnmt1 - PCNA complex formation に resistance against し を competition , DNA メ チ ル change パ タ ー ン の 継 bearing を 撹 し disorderly, ゲ ノ ム の hypomethylation を promoting す る と said う 仮 said に づ き, Tax が メ チ ル change さ れ た プ ロ モ ー タ ー を メ off チ ル change す る matter を parsing す る を refers is の established し た. HTLV infection - 1 T cell lines の parsing で は, ウ イ ル ス posthumous son 伝 を 発 now し Tax の is す る cells で は IFN - gamma の サ イ ト カ イ ン posthumous son 伝 の プ ロ モ ー タ ー field の CpG が メ off チ ル change し て い る の に し seaborne, MT - 1 の ウ イ ル ス heritage 伝 son の 発 now し て い な い cell lines や Jurkat で は メ チ Youdaoplaceholder2 to レベ が to が to lower <s:1> て る to る to が to make clear ら ら になった になった. さ ら に Cd induced may な で Tax を も つ Jurkat cells JPX9 を with い て, Tax の 発 now と メ チ ル change の phase masato の parsing を try み た. し か し, JPX9 は Tax の 発 に now with い p21WAF1 の 発 now が induced さ れ る が, 2 orders to drop the Ming な ア ポ ト ー シ ス を す matter in か ら, DNA replication サ イ ク ル を 経 た after の CpG メ チ ル resolve analysis に は optimum さ な い こ と が Ming ら か に な っ た. そ こ で, Tax に よ る ア ポ ト ー シ ス induced に し seaborne を て system shown す JPX9 を try the cell の cropping み る matter に し, レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い て ア ポ ト ー シ ス inhibitory factor で あ る CrmA を import し た JPX9 - analytical を し into the Crm を cropping め て い る.
项目成果
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