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遺伝的ブロック単位の探索と、その重合化によるタンパク質立体構造再構築の試み

寻找遗传块单元并尝试通过聚合重建蛋白质三维结构

基本信息

批准号：
09261242
负责人：
芝清隆
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09261242/
关键词：
試験管内進化構築原理タンパク質遺伝子の誕生繰り返し

项目摘要

タンパク質の構築原理の問題に迫るアプローチの1つとして、試験管内タンパク質創成系実験を用いた構成的な研究アプローチが考えられる。前述したように、現存するタンパク質・遺伝子の観察からは、「繰り返し」が重要な意味を持つらしいことが示唆される。では、単一の遺伝的ブロック単位を単純に「繰り返す」ことから、タンパク質・遺伝子らしきものが試験管の中で発生するのであろうか?マイクロ遺伝子重合法を用いた方法からこの問題にアプローチした。これは、DNAポリメラーゼがもつDNA連結反応を利用したもので、1対のオリゴヌクレオチドとDNAポリメラーゼを用いたサイクル反応からなる簡単な反応系である。1対のオリゴヌクレオチドは、それらのプライマーダイマーがマイクロ遺伝子配列を再構成するように、互いの3′領域で相補塩基対を形成するようにデザインしておく。オリゴヌクレオチドの3′末端にミスマッチ塩基を付加しておくことが、効率よくMPRを進行させるポイントとなる。サイクル反応の後、マイクロ遺伝子の重合した巨大DNAが得られるが、マイクロ遺伝子の連結部には、ランダムに塩基の欠失・挿入がおこるため、得られたDNAは分子多様性集団としての性質をもつ。すなわち、このようなマイクロ遺伝子重合体から翻訳されるタンパク質は、マイクロ遺伝子のもつ複数の読み枠のコンビナトリアルな重合体産物となる。種々の長さ、組成をもつマイクロ遺伝子を出発材料とし、これらを重合して得られたNDAライブラリー大腸菌の中で産出するタンパク質をいくつか調べた。その中の1つ、クローン320は、CD測定から、2次構造を形成していることが示唆された。「繰り返し」を制約文法にすることによって、自然のタンパク質に似た人工タンパク質が意外と簡単に試験管の中で創発するのかもしれない。

The problem of quality construction principle is urgent, and the problem of quality construction system in tube is studied. The above mentioned words, the existing words, the quality of the text, the inspection of the text, the important meaning of the words, the meaning of the words, the meaning of the words. A simple, simple The method of re-establishing the identity of the child is to re-establish the identity of the child. This is the first time that a DNA link has been used. 1. To reconstitute the sub-arrangement of a pair of complementary elements in the 3′ domain. The 3′-terminal end of the MPR is divided into two parts: one is the base of the MPR, the other is the base of the MPR. The DNA sequence of the DNA sequence is very complex. The DNA sequence is very complex. The product of the recombinant is a mixture of two or more proteins. The length and composition of the species are different from those of the control group, and the quality of the species is different from that of the control group. The first, third, fourth and fourth order structures were formed. The term "natural" is used to restrict grammar, quality, artificial quality, accident, simplicity, and innovation.