マスト細胞の分化におけるヒスタミン合成酵素とプロスタノイド受容体の発現調節

肥大细胞分化中组胺合酶和前列腺素受体表达的调节

基本信息

批准号：
12139205
负责人：
市川厚
金额：
$ 47.87万
依托单位：
Mukogawa Women's University (2003)Kyoto University (2000-2002)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は炎症、アレルギー等の病態において重要な機能を有するマスト細胞の多様性に焦点をおき、個体レベルにおけるヒスタミンあるいはプロスタグランジン(PG)のはたらきを解明し、もって新規抗アレルギー薬創製に寄与する基礎的知見を得ることを目的としている。本年度の研究実施計画に基づき以下の知見を得た。1.IgE感作によるマスト細胞活性化機構の解明IL-3依存的な骨髄由来培養マスト細胞(BMMC)における単量体IgEによるCa^<2+>流入に関与するチャンネルは、抗原抗体反応の際に関与するものとは異なることを明らかにした。さらにIgEの抗原結合部位近傍の領域がIgE感作によるマスト細胞治性化に関与することを示唆する結果を得た。また、こうした単量体IgEの効果は腹腔マスト細胞では弱く、マスト細胞-線維芽細胞共培養系を用いた検討から細胞の分化に伴い応答性の減弱が起こることを見いだした。2.HDC欠損マウス腹腔マスト細胞における顆粒形成の異常の解明マウス腹腔からマスト細胞を精製し、GeneChip (Affymetrix)によるマイクロアレイ解析を行った。その結果、HDC欠損マウス腹腔マスト細胞における顆粒プロテアーゼ遺伝子群のmRNA発現の顕著な低下を見いだし、タンパク質レベルでもtryptase、carboxypeptidaseA、cathepsinGの発現が低下していることを明らかにした。これらの結果から、慢性アレルギー状態においてIgE濃度が高まる際に、マスト細胞が油性化し、新規合成されるヒスタミンが顆粒酵素の誘導、あるいはマスト細胞の成熟を惹起することをはじめて示唆した。3.PGE_2刺激によるマスト細胞の接着機構の解析マウスマスト細胞株P-815ではPGE_2によるEP3、EP4両受容体を介する相乗的なcAMP産生を介して。フィブロネクチンへの細胞接着が誘導されることを見いだした。また、この作用には持続的なサイトゾルCa^<2+>レベルの亢進が関与しており、さらにカルモジュリン依存性たんばく質キナーゼ阻害剤W7により完全に阻害されることからCa^<2+>-カルモジュリンパスウェイが関与することを明らかにした。

这项研究的重点是在炎症和过敏等病理状况中具有重要功能的肥大细胞的多样性，并旨在阐明组胺或前列腺素（PGS）在个体水平上的功能，并获得碱性知识，从而有助于创造新的抗过敏药。根据今年的研究实施计划，获得了以下发现。 1。通过IgE敏化来阐明肥大细胞激活的机制，我们揭示了依赖于IL-3的骨髓衍生培养的肥大细胞（BMMC）在骨髓衍生的培养的肥大细胞（BMMC）中涉及的CA^<2+>涌入的通道与参与抗原抗体反应的人不同。此外，结果表明，IgE的抗原结合位点附近的区域通过IgE敏化参与肥大细胞的治疗。此外，腹膜肥大细胞中单体IgE的作用较弱，我们发现通过检查肥大细胞成亲细胞共培养系统而发生反应性的衰减随细胞分化而发生。 2。在缺乏HDC缺陷型小鼠肥大细胞中，从小鼠的腹膜腔中纯化缺乏HDC的小鼠肥大细胞的小鼠腹膜肥大细胞的异常颗粒形成，并使用Genechip（Affymetrix）进行了微阵列分析。结果，我们发现HDC缺陷小鼠腹膜肥大细胞中颗粒状蛋白酶基因组中mRNA表达显着降低，并揭示了在蛋白质水平下胰蛋白酶，羧肽和加压酯的表达也降低了。这些结果表明，当IgE浓度在慢性过敏疾病中增加时，肥大细胞首次变得油性，而新合成的组胺诱导颗粒酶诱导或成熟肥大细胞。 3。通过PGE_2在小鼠肥大细胞系P-815中对肥大细胞的粘附机理进行分析，通过PGE_2通过PGE_2进行协同cAMP生产。发现诱导细胞粘附于纤连蛋白。此外，这种作用涉及胞质Ca^<2+>水平的持续增强，此外，依赖钙调蛋白依赖性的促血栓形激酶抑制剂W7完全抑制了ca^<2+> - 钙调蛋白途径。