マスト細胞の分化におけるヒスタミン合成酵素とプロスタノイド受容体の発現調節

肥大细胞分化中组胺合酶和前列腺素受体表达的调节

• 批准号: 12139205
• 负责人: 市川 厚
• 金额: $ 47.87万
• 依托单位: Mukogawa Women's University (2003)Kyoto University (2000-2002)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12139205/
• 关键词: マスト細胞(肥満細胞); イムノグロブリンE; ヒスタミン; ヒスチジン脱炭酸酵素; アレルギー; プロスタグランジン; カルシウム; 接着; 細胞接着; 分化; アナフィラキシー; 骨髄培養; イノムグロブリンE; アナフイラキシー

本研究は炎症、アレルギー等の病態において重要な機能を有するマスト細胞の多様性に焦点をおき、個体レベルにおけるヒスタミンあるいはプロスタグランジン(PG)のはたらきを解明し、もって新規抗アレルギー薬創製に寄与する基礎的知見を得ることを目的としている。本年度の研究実施計画に基づき以下の知見を得た。1.IgE感作によるマスト細胞活性化機構の解明IL-3依存的な骨髄由来培養マスト細胞(BMMC)における単量体IgEによるCa^<2+>流入に関与するチャンネルは、抗原抗体反応の際に関与するものとは異なることを明らかにした。さらにIgEの抗原結合部位近傍の領域がIgE感作によるマスト細胞治性化に関与することを示唆する結果を得た。また、こうした単量体IgEの効果は腹腔マスト細胞では弱く、マスト細胞-線維芽細胞共培養系を用いた検討から細胞の分化に伴い応答性の減弱が起こることを見いだした。2.HDC欠損マウス腹腔マスト細胞における顆粒形成の異常の解明マウス腹腔からマスト細胞を精製し、GeneChip (Affymetrix)によるマイクロアレイ解析を行った。その結果、HDC欠損マウス腹腔マスト細胞における顆粒プロテアーゼ遺伝子群のmRNA発現の顕著な低下を見いだし、タンパク質レベルでもtryptase、carboxypeptidaseA、cathepsinGの発現が低下していることを明らかにした。これらの結果から、慢性アレルギー状態においてIgE濃度が高まる際に、マスト細胞が油性化し、新規合成されるヒスタミンが顆粒酵素の誘導、あるいはマスト細胞の成熟を惹起することをはじめて示唆した。3.PGE_2刺激によるマスト細胞の接着機構の解析マウスマスト細胞株P-815ではPGE_2によるEP3、EP4両受容体を介する相乗的なcAMP産生を介して。フィブロネクチンへの細胞接着が誘導されることを見いだした。また、この作用には持続的なサイトゾルCa^<2+>レベルの亢進が関与しており、さらにカルモジュリン依存性たんばく質キナーゼ阻害剤W7により完全に阻害されることからCa^<2+>-カルモジュリンパスウェイが関与することを明らかにした。

は inflammation, this study ア レ ル ギ ー etc. の pathological に お い て important function of な を have す る マ ス ト cell の others more に focus を お き, individual レ ベ ル に お け る ヒ ス タ ミ ン あ る い は プ ロ ス タ グ ラ ン ジ ン (PG) の は た ら き を interpret し, も っ て new rules anti ア レ ル ギ ー 薬 created に send す る foundation of knowledge を る こ と を purpose と し Youdaoplaceholder0 て る. This year 's <s:1> research implementation plan に is based on づ を the following <s:1> insights を た. 1. IgE feeling as に よ る マ ス ト cell activation agency の interpret IL - 3 dependent な bone marrow origin training マ ス ト cells (BMMC) に お け る 単 quantity body IgE に よ る Ca ^ 2 + < > inflows に masato and す る チ ャ ン ネ ル は, antigen antibody against 応 の interstate に masato and す る も の と は different な る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に IgE の antigen binding site near alongside が IgE feeling の field に よ る マ ス ト cell for the に masato and す る こ と を in stopping す た を る results. ま た, こ う し た 単 quantity body IgE の unseen fruit は abdominal マ ス ト cells で は weak く マ ス line d bud cells - ト co-culture system を with い た 検 please か ら cells の に with い 応 a weakened sexual の が up こ る こ と を see い だ し た. 2. HDC owe loss マ ウ ス abdominal マ ス ト cells に お け る particles forming abnormal の の interpret マ ウ ス abdominal か ら マ ス ト cells を refined し, GeneChip (Affymetrix) に よ る マ イ ク ロ ア レ イ parsing line を っ た. そ の results, HDC owe damage マ ウ ス abdominal マ ス ト cells に お け る particles プ ロ テ ア ー ゼ heritage 伝 subgroup の mRNA 発 is の 顕 see the low な を い だ し, タ ン パ ク qualitative レ ベ ル で も tryptase, carboxypeptidaseA, cathepsinG の 発 now low が し て い る こ と を Ming ら か に し Youdaoplaceholder0. こ れ ら の results か ら, chronic ア レ ル ギ ー state に お い て IgE concentration high が ま る interstate に, マ ス ト cells が oily し, new rules on synthetic さ れ る ヒ ス タ ミ ン が の particles enzyme induction, あ る い は マ ス ト cells の mature を provoked す る こ と を は じ め て in stopping し た. 3. PGE_2 stimulus に よ る マ ス の ト cells then agency の parsing マ ウ ス マ ス ト cell line P - 815 で は PGE_2 に よ る EP3 and EP4 struck by the capacity of body を dielectric す る phase 乗 な cAMP produce を interface し て. Youdaoplaceholder0 が チ へ へ へ the <s:1> cells then が induce される とを とを as seen in the だ だ た た た. ま た, こ の role に は hold 続 な サ イ ト ゾ ル Ca ^ 2 + < > レ ベ ル の hyperthyroidism が masato and し て お り, さ ら に カ ル モ ジ ュ リ ン dependency た ん ば く qualitative キ ナ ー ゼ resistance against tonic W7 に よ り completely に resistance against さ れ る こ と か ら Ca ^ 2 + > < - カ ル モ ジ ュ リ ン パ ス ウ ェ イ が masato and す る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

Ohtsu, H., Tanaka, S., Terui, T., Hori, Y., Makabe-Kobayashi, Y., Pejler, G., Tchougounova, E., Hellman, L., Gertsenoswin, M., Hirasawa, N., Sakurai, E., Buzas, E., Kovacs, P., Csal, G., Kittel, A., Okada, M., Hara, M., Mur, L., Numayama-Tsuruta, K., Ishi

Ohtsu, H.、Tanaka, S.、Terui, T.、Hori, Y.、Makabe-Kobayashi, Y.、Pejler, G.、Tchougounova, E.、Hellman, L.、Gertsenoswin, M.、Hirasawa, N

Tsuboi,K., et al.: "Uterine expression of prostaglandin H_2 synthase in late pregnancy and during parturition in prostaglandin F receptor-deficient mice"Endocrinology. 141. 315-324 (2000)

Tsuboi,K., et al.：“前列腺素 F 受体缺陷小鼠妊娠晚期和分娩过程中前列腺素 H_2 合酶的子宫表达”内分泌学。

Hatae, N., Kita, A., Tanaka, S., Sugimoto, Y., Ichikawa, A.: "Induction of adherent activity in Mastocytoma P-815 cells by the Cooperation of Two PGE_2 receptor subtypes, EP3 and EP4"J.Biol.Chem.. (in press).

Hatae, N.、Kita, A.、Tanaka, S.、Sugimoto, Y.、Ichikawa, A.：“通过两种 PGE_2 受体亚型 EP3 和 EP4 的合作诱导肥大细胞瘤 P-815 细胞中的粘附活性”J

Yoshida, K., et al.: "Stimulation of bone formation and prevention of bone loss by prostaglandin E EP4 receptor activation"Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 99. 4580-4585 (2002)

Yoshida, K. 等：“通过前列腺素 E EP4 受体激活刺激骨形成并预防骨丢失”Proc.Natl.Acad.Sci。

Hatae, N., Kita, A., Sugimoto, Y., Ichikawa, A.: "Induction of adherent activity in mastocytoma P-815 cells by the cooperation of two PGE_2 receptor subtypes, EP_3 and EP_4."J.Biol.Chem.. 278. 17977-179981 (2003)

Hatae, N.、Kita, A.、Sugimoto, Y.、Ichikawa, A.：“通过两种 PGE_2 受体亚型 EP_3 和 EP_4 的合作诱导肥大细胞瘤 P-815 细胞的粘附活性。”J.Biol.Chem