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精子における嗅覚受容体様タンパク質の内在性リガンドの探索

寻找精子中嗅觉受体样蛋白的内源配体

基本信息

批准号：
13024221
负责人：
東原和成
金额：
$ 2.37万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13024221/
关键词：
嗅覚受容体精子カルシウムリガンド

项目摘要

本研究では、精子に発現している嗅覚受容体様タンパク質のリガンドを同定することにより、精子におけるその機能および役割を解明することを目的とする。今回新たに得られた進展として、今まで困難であるとされていた精巣における嗅覚受容体遺伝子のin situ hybridizaitonを世界で初めて成功した。その結果、精祖細胞及び精母細胞では発現は見られず、精子細胞でのみmRNAの存在が確認された。さらに、嗅覚受容体によって精子細胞の前期に発現するものと後期に発現するものとがあり、精子形成サイクルにおいてステージ特異的に発現していることが初めて明らかになった。嗅覚受容体の精巣における役割の手がかりが得られたと考えている。ヘテロな発現系における精子嗅覚受容体の機能解析が困難であったことから、受容体機能解析およびリガンド同定をホモロガスな発現系で行うことを考えた。しかし、in situ解析によると精子嗅覚受容体発現レベルは低いため、より多くの受容体発現系の構築がリガンド探索のために必要となる。そこで、今回報告する成果として、分子シャペロンであるカルメジンの転写制御領域下に嗅覚受容体MOR23遺伝子を組み込んだトランスジェニックマウスを作成し、精巣に発現させることに成功した。カルシウムイメージングを用いてリガンド応答アッセイをおこなった結果、MOR23受容体のリガンドであるLyralに応答を示し、精巣で嗅覚受容体そのものが機能しうることをはじめて立証した。今後、受容体タンパク質発現部位を同定し、カルシウムイオン上昇を指標に、Tgマウス由来の精子を用いた内在性のリガンド探索アッセイを行う予定である。

In this study, spermatozoa and spermatozoa were found to be able to understand the purpose of this study. This time, the new baby has made progress, and now it is difficult to learn how to be successful at the beginning of the in situ hybridizaiton world. The results of the results, the sperm progenitor cell and the sperm mother cell showed that there was a positive mRNA in the spermatozoa and sperm cells. In the early stage of the cell cycle, the sperm cell was detected in the early stage, and in the later stage, the spermatogenesis was detected in the early stage and the later stage of the spermatozoa. Smell the receptacle, the essence, the service, the hand, the body, the body. The sperm-sniffing machine is able to analyze the problem, and the capacitor machine is able to analyze the same number of pregnant women as well. In situ analysis showed that the sperm sniffing capacity was low, and the multiple capacitor system was sensitive to the necessary conditions. This report is based on the results of this report. In this report, the results of this report The result of the test, the MOR23 recipient, the Lyral, the receiver, the recipient, the recipient, the From now on, the location of the receptive body is the same as that of the receptive body, the location of the receptive body is the same, the finger is on the surface, and the Tg is the origin of the sperm.