权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

糖鎖が構造形成におよぼす要因の解析と膜タンパク質結晶化への応用

影响糖链结构形成的因素分析及其在膜蛋白结晶中的应用

基本信息

批准号：
13033044
负责人：
加藤博章
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto University (2002)The Institute of Physical and Chemical Research (2001)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

1.修飾糖鎖の解析について4ヶ所糖鎖の修飾を受けるリンゴ銀葉病菌由来エンドポリガラクツロナーゼのうち、2ヶ所(Ash92,Asn161)が修飾されているIaとその脱糖鎖型deIaについて超高分解能精密結晶構造解析を行った。また、オリゴガラクツロン酸との複合体を結晶化させることに成功し、サブサイト構造について明らかにすることができた。ついで、分解能を向上させることにより、水素の構造についても明らかにすることに成功した。さらに、中性子線解析によって、水素構造の確認を行うため、中性子線解析に必要となる巨大結晶(数ミリ立方メートル大)の作成を試みた。2.ABCトランスポーターについてガンの多剤耐性の原因となるMDR1と糖尿病薬スルホニルウレア剤のレセプターであるSUR1について、ヒトおよびマウス由来の遺伝子を用いてバキュロウイルスをベクターにした昆虫培養細胞(Sf-9)による発現系を構築し、得られた発現系を用いて活性型のタンパク質を大量生産(3リットルの液体培養)できる培養条件を確立した。また、細胞からミクロソーム画分を調製する方法を改良することにより収量を改良することができた。さらに、結晶化を補助するため、モノクロナール抗体から調製したFabフラグメントとの複合体を調製することを試みた。その結果、特定の界面活性剤を用いたときだけ複合体ができていることが判明した。

1. Analysis of modified sugar locks in 4 groups The origin of silver leaf fungus in 4 groups (Ash92,Asn161) was analyzed by high resolution crystal structure analysis. The crystallization of the acid complex was successful, and the structure of the crystal was improved. In the middle, decomposition energy can be upward, water element structure can be upward, water element can be upward, water element In addition, the determination of the structure of water element is necessary for the analysis of intermediate sublines, and the preparation of large crystals is necessary. 2. The causes of multi-agent tolerance in ABC and diabetes mellitus. MDR1 and diabetes mellitus The development of the enzyme was based on the establishment of culture conditions for mass production (liquid culture) of the active enzyme. The method of cell division modulation is improved. In addition, the crystallization of the antibody from the modulation of the Fab from the modulation of the complex. As a result, specific interfacial active agents are used to identify the complex.

项目成果

期刊论文数量（8）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Tetsuya Shimizu: "Active-Site Architecture of Endopolygalacturonase I from the Pathogenic Fungus, Stereum purpureum, Revealed by Crystal Structures in Native and Ligan-Bound Forms at Atomic Resolution"Biochemistry. 41. 6651-6659 (2002)

Tetsuya Shimizu：“通过原子分辨率下的天然和配体结合形式的晶体结构揭示了致病性真菌 Stereum purpureum 的内多聚半乳糖醛酸酶 I 的活性位点结构”生物化学。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Tetsuya Shimizu: "Crystallization and preliminary X-ray study of endopolygalacturonase from the pathogenic fungus Stereum purpureum"Acta Crystallographica Section D. 57. 1171-1173 (2001)

Tetsuya Shimizu：“来自病原真菌 Stereum purpureum 的内聚半乳糖醛酸酶的结晶和初步 X 射线研究”Acta Crystallographa 第 D. 57. 1171-1173 (2001)

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Emiko Yamauchi: "Crystal structure of MARCKS calmodulin-binding domain peptide complexed with Ca2+ Calmodulin"Nature. Struct. Biol.. 10. 226-231 (2003)

Emiko Yamauchi：“与 Ca2 钙调蛋白复合的 MARCKS 钙调蛋白结合域肽的晶体结构”自然。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

DOI：
{{ item.doi }}
发表时间：
{{ item.publish_year }}
期刊：
{{ item.journal_name }}
影响因子：
{{ item.factor }}
作者：
{{ item.authors }}
通讯作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

加藤博章其他文献

Lafitidine-induced increase in intracellular Ca2+ concentrations in PC12 and endothelial cells.

拉菲替丁诱导 PC12 和内皮细胞细胞内 Ca2+ 浓度增加。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
J.Pharmacol.Sci. 97
影响因子：
0
作者：
Kashiwayama;Y.;Tsugumi Nakanishi;Takao Hibi;Hiroyuki Shibata;Tatsuya Uzumaki;Kentaro Ifuku;Toru Komatsu et al.;Mamoru Matsubara;Tasuku Ueno et al.;加藤博章;Yu Gabe et al.;Kazuki Kiyose et al.;Takuya Terai et al.;Takatoshi Yogo et al.;Mako Kamiya et al.;Kensuke Komatsu et al.;Eita Sasaki et al.;Yasuteru Urano et al.;Eri Kawabata et al.;Shigeki Hattori et al.;Tasuku Ueno et al.;Kenjiro Hanaoka et al.;Daisuke Nagata et al.;Suguru Kenmoku et al.;Yu Gabe et al.;Horie et al.;Kunieda et al.;Minowa et al.;Kunieda et al.
通讯作者：
Kunieda et al.

A General Synthesis of N-Reverse-Prenyl Indoles

N-反异戊二烯吲哚的一般合成

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Synthesis
影响因子：
0
作者：
Kashiwayama;Y.;Tsugumi Nakanishi;Takao Hibi;Hiroyuki Shibata;Tatsuya Uzumaki;Kentaro Ifuku;Toru Komatsu et al.;Mamoru Matsubara;Tasuku Ueno et al.;加藤博章;Yu Gabe et al.;Kazuki Kiyose et al.;Takuya Terai et al.;Takatoshi Yogo et al.;Mako Kamiya et al.;Kensuke Komatsu et al.;Eita Sasaki et al.;Yasuteru Urano et al.;Eri Kawabata et al.;Shigeki Hattori et al.;Tasuku Ueno et al.;Kenjiro Hanaoka et al.;Daisuke Nagata et al.;Suguru Kenmoku et al.;Yu Gabe et al.;Horie et al.;Kunieda et al.;Minowa et al.;Kunieda et al.;Minowa et al.;K.Yoshizawa;K.Yoshizawa;K.Yoshizawa;W.I.Li;Kubota et al.;T.Shioiri;F.Yokokawa
通讯作者：
F.Yokokawa