Perl形質導入動物を疾患モデルとした概日リズム光同調能失調の分子機構の解析

以 Perl 转导动物为疾病模型分析昼夜节律光诱导障碍的分子机制

• 批准号: 14017018
• 负责人: 程 肇
• 金额: $ 3.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14017018/
• 关键词: 時計遺伝子; Period 1; 視交叉上核

生物には概日リズムとよばれる、行動や生化学的活動を支配する24時間に近い周期を持つ活動リズムが見い出される。哺乳類の場合、概日時計中枢は脳視床下部の視交叉上核(SCN)に存在し、SCNの日周性を伴った神経活動出力、或いは、液性因子の分泌により末梢組織を支配して概日リズムを形成している。リズム障害の発症機構の詳細な解明と治療法や治療薬の開発には、(1)概日時計中枢と末梢組織の計時情報の細胞レベルでの簡便な計測系、及び、(2)ヒトの概日リズム障害の有用な疾患モデルの利用が必須であると考えられる。哺乳類の時計遺伝子period1(Per1)の転写翻訳産物量は、マウスSCNで明暗及び恒暗条件下、明期で高く暗期に低い自律的な日周変動を示した。そこでPer1の発現をin vivoでモニターするためにPer1::1uc融合遺伝子のトランスジェニックマウスとラットを作製した。得られたper1::1uc動物のSCNスライス培養系では、luciferase活性が約2ヶ月間約24時間の周期で発現振動した。最近、マウス及びラットの繊維芽細胞にこの融合遺伝子を形質転換し、luciferase発現日周リズムを誘導する培養方法及び条件を決定した。そして、luciferase活性日周振動(周期長、振動周期数、相対的位相等)に影響を与える分子の検索を行った次に、Per1を強力なプロモータにより強制発現させたトランスジェニック動物を作製した。Per1形質導入体の行動及び体温リズム周期は、長周期型または無周期型になり、さらに光同調性を失っていた。現在、Per1::1uc ; NSE::Per1変異体SCN及び各種末梢組織のluciferase活性日周振動(周期長、振動周期数、相対的位相等)に影響を与える分子の検索並びに、変異体における生理学的症状の解析を進めている。

Biology and biochemistry activities, biochemistry activities, domination, time, period, and activities. In the case of mammals, the existence of the suprachiasmatic nucleus (SCN) at the lower part of the optic bed in the timekeeping center, and the daily and weekly companion of the SCN The output of the activities of the gods, or the secretion of liquid factors, the control of the peripheral tissues, and the formation of the secretion of the liquid factors. Detailed explanation and treatment method of the disease mechanism of the disease, (1) Timekeeping information cells of the clock center and peripheral tissuesレベルでの SIMPLE な measurement system, and び, (2) ヒトの义日リズム hinder の Useful な Disease モデルのutilization であるとtest えられる. The mammal timepiece period1 (Per1) is a self-regulated diurnal and weekly oscillation of the product quantity and the MASK SCN under light and dark and constant-dark conditions, high and low in the light and dark periods.そこでPer1の発成をin vivoでモニターするためにPer1::1uc fusion 缝子のトランスジェニックマウスとラットをproducedした. The animal's SCN culture system was obtained using per1::1uc, and the luciferase activity was about 2 months and the cycle was about 24 hours, and the vibration was present. Recently, the fusion of maize and sterilized cells has been carried out, and the morphology and quality of luciferase have been changed, and the culture method and conditions have been determined based on the induction of luciferase. The diurnal vibration of そして and luciferase activity (period length, number of vibration cycles, relative phases, etc.) affects を and える molecules検SO を行った时に、Per1をStrong なプロモータによりforced 発appear させたトランスジェニックAnimal を Production した. The actions of the Per1 form import body and the body temperature リズムcyclic は, the long period type または aperiodic type になり, and the さらにphotosynchronicity をloss っていた. Now, Per1::1uc; NSE::Per1 allogeneic SCN and the luciferase activity of various peripheral tissues vibrate daily (long period, vibration cycle The number of phases and the phase of each pair are equal) does not affect the analysis of the symptoms of the physiological symptoms of the molecule and the molecule.

项目成果

Kojima, S., Hirose, M., Tokunaga, K., Sakaki, Y., Tei, H.: "Structural and functional analysis of 3'-untranslated region of mouse Period1 mRNA"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 301. 1-7 (2003)

Kojima, S.、Hirose, M.、Tokunaga, K.、Sakaki, Y.、Tei, H.：“小鼠Period1 mRNA 3-非翻译区的结构和功能分析”Biochem.Biophys.Res.Commun..

Abe M, Herzog ED, Yamazaki S, Straume M, Tei H. Sakaki Y, Menaker M, Block GD: "Circadian rhythms in isolated brain region"J. Neuroscience. 22. 350-356 (2002)

Abe M、Herzog ED、Yamazaki S、Straume M、Tei H. Sakaki Y、Menaker M、Block GD：“孤立大脑区域的昼夜节律”J。

Yamazaki S, Straume M, Tei H, Sakaki Y, Menaker M, Block GD: "Effects of aging on the circadian rhythms of central and peripheral mammalian clocks"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99. 10801-10806 (2002)

Yamazaki S、Straume M、Tei H、Sakaki Y、Menaker M、Block GD：“衰老对哺乳动物中枢和外周生物钟昼夜节律的影响”Proc。

Constance CM, Green CB, Tei H, Block GD: "Bulla gouldiana period exhibits unique regulation at the mRNA and protein levels"J. Biol. Rhythms. 17. 413-427 (2002)

Constance CM、Green CB、Tei H、Block GD：“Bulla gouldiana 时期在 mRNA 和蛋白质水平上表现出独特的调节”J.