抗トリパノソーマ薬開発の標的としてのGPIトランスアミダーゼの分子組成の解明

阐明 GPI 转酰胺酶的分子组成作为抗锥虫药物开发的靶标

• 批准号: 14021065
• 负责人: 永宗 喜三郎
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021065/
• 关键词: トリパノソーマ; GPIアンカー; GPIトランスアミダーゼ

申請者らはGPIをタンパク質に結合させる酵素であるGPIトランスアミダーゼのコンポーネントの一つであるGPI8のトリパノソーマオルソログ、TbGPI8と免疫沈降により共沈してくるタンパク質として、P70,P40,P35の3種のタンパク質を同定した。このうちP70はヒトや酵母でGPIトランスアミダーゼのコンポーネントであることが知られている、PIG-Tのオルソログであった。P40とP35については、プロサイクリック型トリパノソーマにおいてノックアウトを行った結果、これらのタンパク質はGPIトランスアミダーゼのコンポーネントであることが証明できた。また、TbGPI8との共沈実験では同定できなかったが、ヒトや酵母でGPIトランスアミダーゼのコンポーネントとして知られているGAA1のトリパノソーマにおけるホモログをゲノムデータベースより見出した。この遺伝子(TbGAA1)もプロサイクリック型トリパノソーマにおいてノックアウトすることで実際にGPIトランスアミデーション反応に関与していることを明らかにし、更にTbGAA1とTbGPI8とが複合体を作っている、即ち、TbGAA1もトランスアミダーゼのコンポーネントであることを証明した。本研究において同定したタンパク質のうちP40及びP35は、哺乳動物や酵母のトランスアミダーゼの既知のコンポーネントと相同性が認められず、またデータベース上にも、トリパノソーマ科の生物にオルソログが見いだせた以外にホモログや有意にホモロジーを有するタンパク質が認められないことから、これらのタンパク質はトリパノソーマ科の生物のトランスアミダーゼに特異的なタンパク質であると考えられた。従って、トリパノソーマのGPIトランスアミダーゼは哺乳動物や酵母のそれと全く異なっている可能性が示唆され、この酵素は抗トリパノソーマ薬開発の非常に有効な標的になると考えられた。

The applicant uses the same method to determine the same amount of food in the same way as that of the three kinds of drugs, namely, GPI, TbGPI8, GPI8, TbGPI8, P70, P40, P35, and so on. P70 yeast, GPI yeast, yeast P40

项目成果

K.Ohishi, K.Nagamune, Y.Maeda, T.Kinoshita: "Two subunits of GPI transamidase GPI8 and PIG-T form a functionally important intermolecular disulfide bridge"J. Biol. Chem.. (in press).

K.Ohishi、K.Nagamune、Y.Maeda、T.Kinoshita：“GPI 转酰胺酶 GPI8 和 PIG-T 的两个亚基形成功能重要的分子间二硫桥”J.