HIV-1Vprと相互作用する細胞内因子を介して制御されるウイルス増殖機構の解明

阐明通过与 HIV-1Vpr 相互作用的细胞内因子调节的病毒增殖机制

基本信息

  • 批准号:
    14021131
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3.84万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

HIV-1のpreintegration complex (PIC)の核移行の阻害技術の開発を最終目標に、HIV-1 Vpr蛋白の核移行機序の全容解明を目指して解析を行った。HIV-1 Vprは2つのα-helixドメインの内、αH2とFGリピートを有するnucleoporinとの相互作用を介して核膜に結合後、αH1の働きにより核内へと移行すること、その際、αH1介したImpαの間接結合、及びFG repeatを有するnucleoporinを介した核膜結合が共に必須であることを明らかにした。このようなVprによる核移行は極めて特徴的であり、HIV-1 PICの核移行をVprを標的にして制御できることを示唆している。複数存在するImp αのisoformの中で、Vprの核移行に必要なものをin vitro nuclear import assayを用いて同定した結果、Rch 1とNPI-1により核移行が促進された。その効果はRch 1の方が強かった。更に、Rch 1が最終分化マクロファージに発現することをmRNAレベルで確認した。以上のことから、Vprの核移行はRch 1により優位に促進される可能性が考えられた。次に、核移行に関与するImp αのドメイン解析を行った。Imp αはN末から順に、Imp β binding (IBB)ドメイン、NLS認識領域であるアルマジロ構造、CAS結合ドメインを有する。IBBドメイン欠失変異体では、Vprとの結合が著しく失われたが、Vprの核移行には影響は認められなかった。一方、CAS結合ドメインを欠失した変異体では、核移行能は消失したが、核移行能は野生型と同程度に見られた。更に、Imp αと結合するVpr側のドメイン解析をVpr発現細胞抽出液を加えたGST pull down assayで解析した。VprのαH2がImp αと間接的な結合を示した。これらの結果から、VprはImportin αのIBBドメインを介して結合するが、核移行にはCAS結合ドメインが必要であり、この過程はVprとImp αとの間接結合を介して行われる可能性が示唆された。
HIV-1 preintegration complex (PIC) Nuclear transfer Prevention Technology starts with the most important target label, HIV-1 Vpr protein nuclear transfer machine sequence, full understanding, target analysis and analysis. It is necessary to analyze the nuclear membrane binding of α-helix, α-H2-FG, α-H2-nucleoporin, α-H1, α-H1, Imp-α, and FG repeat-nucleoporin. The nuclear transfer is very special, and the nuclear transfer of the HIV-1 PIC is very special, and the nuclear transfer of the Vpr is very special, and the nuclear transfer of the HIV-1 PIC is very special, and the nuclear transfer of the HIV-1 PIC is very special. The complex number exists in Imp α isoform, Vpr in vitro nuclear import assay is necessary, in vitro nuclear import assay is the same as the result, and Rch 1 is necessary. If you want to use Rch 1, you will need to pay more attention to it. Change, Rch 1, the most important thing is to make sure that you are aware that you are going to have a problem with mRNA. The above information about the nuclear transfer of Vpr to Rch 1 promotes the possibility of nuclear transfer. Secondary, nuclear migration and Imp α analysis. Imp α, Imp β binding (IBB), NLS, and CAS in the field of knowledge and technology. The combination of IBB, Vpri, and Vpr shows that there is a significant difference between the two groups. On the other hand, the combination of CAS and DNA showed that the body weight, the nuclear migration energy and the wild type energy of nuclear migration were significantly lower than those of the wild type. Change, Imp α combined with Vpr assay assay, Vpr assay cell extract plus GST pull down assay. The combination of Vpr α H2 Imp α bond shows that. The results show that the combination of Vpr Importin α IBB trail, nuclear transfer CAS and Imp α is necessary, and the possibility of Imp α connection is significant.

项目成果

期刊论文数量(10)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Tajima S., et al.: "Latency of viral expression in vivo is not related to CpG methylation in the U3 and part of the R region of the long teminal repeart of bovine leukemia virus"J.Virology. (in press). (2003)
Tajima S.等人:“体内病毒表达的潜伏期与牛白血病病毒长末端重复区的U3和部分R区的CpG甲基化无关”J.Virology。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Tajima S., et al.: "Mutant Tax protein from bovine leukemia virus with ability to activate the expression of c-fos"J.Virology. 76. 2557-2562 (2002)
Tajima S.等人:“来自牛白血病病毒的突变Tax蛋白能够激活c-fos的表达”J.Virology。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Tajima S., et al.: "A mutant form of the Tax ptrotein of bovine leukemia vitus (BLV) with enhanced transactivaton activiy, increases the expression and propagaion of BLV invitro but not in vivo"J.Virology. 77. 1894-1903 (2003)
Tajima S. 等人:“牛白血病病毒 (BLV) 的 Tax 蛋白的突变形式具有增强的反式激活活性,可在体外增加 BLV 的表达和繁殖,但在体内则不然”J.Virology。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Takeshima, S., et al.: "Characterization of DRB3 alleles in the MHC of Japanese Shorthorn cattle by polymerase chain reaction-sequence-based typing"J.Dairy Science. 85. 1630-1632 (2002)
Takeshima, S., et al.:“通过聚合酶链式反应序列分型来表征日本短角牛 MHC 中的 DRB3 等位基因”J.Dairy Science。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 作者:
  • 通讯作者:
Konnai S., et al.: "The influence of ovine MHC class II DRBI alleles immuno response in bovine leukemia virus infection"Microbiol. Immunol. (in press). (2003)
Konnai S. 等人:“牛白血病病毒感染中绵羊 MHC II 类 DRBI 等位基因免疫反应的影响”Microbiol。
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