HIV-1Vpr蛋白と相互作用する細胞内因子の同定

与 HIV-1Vpr 蛋白相互作用的细胞内因子的鉴定

• 批准号: 13015226
• 负责人: 間 陽子
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13015226/
• 关键词: ヒト免疫不全ウイルス1型(HIV-1); Vpr; アクセサリー遺伝子; 核局在化シグナル(NLS); 核移行; Importin(Imp)α; nucloporin; HIV-1preintegration complex (PIC)

HIV-1vpr遺伝子産物の核移行能はmacrophage等の非分裂細胞へのHIV-1の感染に重要である。本研究では、HIV-1preintegration complex (PIC)の核移行の阻害技術の開発を最終目標に、Vpr蛋白と相互作用する核膜孔蛋白を同定し、それらとVpr蛋白との相互作用を介して制御されているVprの核移行機序の全容解明を目指す。HIV-1Vprの2つのα-helical domain (17-34位:αH1、46-74:αH2)の内、αH1が核膜から核内への移行に、αH2が核膜へのtargetingに寄与することを明らかにした。また、Vprは塩基性核局在化シグナル(NLS)のレセプターであるImportin(Imp)α及びそのアダプター分子であるImpβとαH2を介して直接結合すること、さらに、Imp αとαH1を介して間接的に結合することを立証した。Vprの核移行の最小機能ドメインであるN17C74は、単独で核膜結合しうるが核内へと効率よく移行するためにはImp α或はエネルギーが必要であった。次に、核膜孔複合体の構成分子であるPhe-Gly(FG)リピートを有するnucloporinであるp62、POM121およびNup153存在下でN17C74を用いてnuclear import assayを行った。その結果、Vprはnucleoporinを介して核膜に結合すること、この核膜結合にはImpαとの直接結合は必要ないことが示された。さらに、Vprは核膜結合後、αH1の働きにより核内へと移行すること、その際にαH1介したImpαとnucleoporinの間接結合と核膜結合が共に必須であることが明らかにした。このようにVprによる核移行は極めて特徴的である。これまでに知られている核移行能を有する蛋白は、Impαを介してImpβに結合するか、あるいはImpβとの直接結合を介して、nucleoporinと結合後に核移行する。VprのようにImpαによって核移行が制御される分子の報告は初めてである。このことは、HIV-1の核移行をVprを標的にして制御できることを示唆していると思われる。

The 伝 progeny of HIV-1 VPR, the nuclear migration of <s:1> macrophages and other <s:1> non-dividing cells へ, and the infection of HIV-1 に are important である. This study で で, HIV-1preintegration complex (PIC) の nuclear migration の resistance against technology の open 発 を ultimate goal に, と Vpr protein interaction す る nuclear pore protein を with し, そ れ ら と Vpr protein と の を interface interaction between し て suppression さ れ て い る Vpr の nuclear migration machine sequence の full capacity interpret を refers す. HIV - 1 VPR の 2 つ の alpha helical domain (17-34: alpha H1, 46-74: alpha H2) の, alpha H1 が nuclear membrane か ら intranuclear へ の transitional に, alpha H2 が nuclear membrane へ の targeting に send す る こ と を Ming ら か に し た. ま た, Vpr は salt basic nuclear agency in the シ グ ナ ル (NLS) の レ セ プ タ ー で あ る Importin alpha (Imp) and び そ の ア ダ プ タ ー molecular で あ る Imp と alpha beta H2 を interface し て directly combined す る こ と, さ ら に, Imp alpha と alpha H1 を interface し て indirect に combined す る こ と を testification し た. Function of Vpr の nuclear migration の minimum ド メ イ ン で あ る N17C74 は, 単 alone で nuclear membrane combined し う る が intranuclear へ と sharper rate よ く transitional す る た め に は Imp alpha or は エ ネ ル ギ ー が necessary で あ っ た. に, nuclear pore complex の constitute molecules で あ る Phe - Gly (FG) リ ピ ー ト を have す る nucloporin で あ る p62, POM121 お よ び Nup153 presence で N17C74 を with い て nuclear import assay を line っ た. そ の results, Vpr は nucleoporin を interface し て nuclear membrane に combining す る こ と, こ の nuclear membrane combining に は Imp alpha と の directly combined は necessary な い こ と が shown さ れ た. さ ら に, Vpr は nuclear membrane combination, alpha H1 の 働 き に よ り intranuclear へ と transitional す る こ と, そ の interstate に alpha H1 medium し た Imp alpha と nucleoporin の combining と nuclear membrane and indirect が に must total で あ る こ と が Ming ら か に し た. <s:1> ようにVprによる nuclear transition である extremely めて characteristic である. こ れ ま で に know ら れ て い る nuclear migration can have す を る protein は, Imp alpha を interface し て Imp beta に combining す る か, あ る い は Imp beta と の directly combined を interface し て, nucleoporin と combination に nuclear migration す る. Vpr ようにImpαによって nuclear transition が control される molecule <e:1> report ように initial めてである. こ の こ と は の nuclear migration, HIV - 1 を Vpr を mark に し て suppression で き る こ と を in stopping し て い る と think わ れ る.

项目成果

Takeshima S., Ikegami M., Morita M., Nakai Y., Aida Y: "Identification of new bovine BoLA-DRB3 alleles by sequence-based typing"Immunogenetics. 53. 74-81 (2001)

Takeshima S.、Ikegami M.、Morita M.、Nakai Y.、Aida Y：“通过基于序列的分型鉴定新的牛 BoLA-DRB3 等位基因”免疫遗传学。

Yasuda, J., Miyao, T., Kamata, M., Aida, Y., Iwakura, Y: "T cell apoptosis causes peripheral T cell depletion in mice transgenic for the HIV-1 vpr gene"Virology. 285. 181-192 (2001)

Yasuda, J.、Miyao, T.、Kamata, M.、Aida, Y.、Iwakura, Y：“T 细胞凋亡导致 HIV-1 vpr 基因转基因小鼠的外周 T 细胞耗竭”病毒学。

Takeshima S., Nakai Y., Morita M., Aida Y: "Characterization of DRB3 alleles in the MHC of Japanese Shorthorn cattle by polymerase chain reaction-sequence-based typing"J. Dairy Science. (in press).

Takeshima S.，Nakai Y.，Morita M.，Aida Y：“通过聚合酶链反应序列分型表征日本短角牛 MHC 中的 DRB3 等位基因”J。

Tana, Watarai S., Aida Y., Tajima S., Kaikidani H., Onuma M., Kodama M: "Growth inhibition of cancer cells by co-transfection of diphtheria toxin A-chain gene plasmid with bovine leukemia virus-Tax expression vector"Microbiol Immunol.. 45. 447-455 (2001)

Tana、Watarai S.、Aida Y.、Tajima S.、Kaikidani H.、Onuma M.、Kodama M：“白喉毒素 A 链基因质粒与牛白血病病毒-Tax 表达共转染对癌细胞的生长抑制

Tajima S., Aida Y: "Mutant Tax proteins from bovine leukemia virus with ability to activate the expression of c-fos"J. Virology. 76. 2557-2562 (2002)

Tajima S.、Aida Y：“来自牛白血病病毒的突变 Tax 蛋白能够激活 c-fos 的表达”J.