HIV-1Vpr蛋白と相互作用する細胞内因子の同定
与 HIV-1Vpr 蛋白相互作用的细胞内因子的鉴定
基本信息
- 批准号:13015226
- 负责人:
- 金额:$ 1.47万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:2001
- 资助国家:日本
- 起止时间:2001 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
HIV-1vpr遺伝子産物の核移行能はmacrophage等の非分裂細胞へのHIV-1の感染に重要である。本研究では、HIV-1preintegration complex (PIC)の核移行の阻害技術の開発を最終目標に、Vpr蛋白と相互作用する核膜孔蛋白を同定し、それらとVpr蛋白との相互作用を介して制御されているVprの核移行機序の全容解明を目指す。HIV-1Vprの2つのα-helical domain (17-34位:αH1、46-74:αH2)の内、αH1が核膜から核内への移行に、αH2が核膜へのtargetingに寄与することを明らかにした。また、Vprは塩基性核局在化シグナル(NLS)のレセプターであるImportin(Imp)α及びそのアダプター分子であるImpβとαH2を介して直接結合すること、さらに、Imp αとαH1を介して間接的に結合することを立証した。Vprの核移行の最小機能ドメインであるN17C74は、単独で核膜結合しうるが核内へと効率よく移行するためにはImp α或はエネルギーが必要であった。次に、核膜孔複合体の構成分子であるPhe-Gly(FG)リピートを有するnucloporinであるp62、POM121およびNup153存在下でN17C74を用いてnuclear import assayを行った。その結果、Vprはnucleoporinを介して核膜に結合すること、この核膜結合にはImpαとの直接結合は必要ないことが示された。さらに、Vprは核膜結合後、αH1の働きにより核内へと移行すること、その際にαH1介したImpαとnucleoporinの間接結合と核膜結合が共に必須であることが明らかにした。このようにVprによる核移行は極めて特徴的である。これまでに知られている核移行能を有する蛋白は、Impαを介してImpβに結合するか、あるいはImpβとの直接結合を介して、nucleoporinと結合後に核移行する。VprのようにImpαによって核移行が制御される分子の報告は初めてである。このことは、HIV-1の核移行をVprを標的にして制御できることを示唆していると思われる。
Nuclear migration of HIV-1 vpr gene products is important for HIV-1 infection in non-dividing cells such as macrophage. The purpose of this study is to develop a new technology for inhibiting nuclear migration in HIV-1preintegration complex (PIC), and to clarify the interaction between Vpr protein and nuclear pore protein, as well as the interaction between Vpr protein and nuclear pore protein. HIV-1 Vpr and α-helical domain 2 (positions 17-34:αH1, 46-74:αH2), αH1, α H2, α H3, αH2, α H3, α H4, α H4, α H5, α H6, α H7, α H7, α H8, α H8, α H9, α H9, In addition, Vpr is a basic nuclear agent that binds directly to Importin(Imp)α and Imp β αH2 via NLS. N17C74 is the most powerful nuclear migration agent in the world. N17C74 is used in the nuclear import assay in the presence of Phe-Gly(FG), a constituent molecule of the nuclear pore complex, p62, POM121 and Nup153. The result is that the nucleoporin binds directly to the nucleus. After binding to the nuclear membrane, αH1 and αH1 are bound to each other. Vpr, nuclear migration, polar characteristics. The nuclear migration is mediated by Impα, Imp β and Impβ. Vpr HIV-1 nuclear migration targets are controlled by HIV-2 and HIV-3.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- 发表时间:
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- 作者:
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- 作者:
- 通讯作者:
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