クロマチンリモデリングと細胞の癌化・老化の制御機構の解析

染色质重塑与细胞癌变和衰老的控制机制分析

• 批准号: 14026004
• 负责人: 田中 伸哉
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026004/
• 关键词: クロマチンリモデリング; 滑膜肉腫; シグナル伝達; SYT-SSX; hBRM; 癌化

本研究は滑膜肉腫関連癌遺伝子SYT-SSXがクロマチンリモデリング因子hBRMと結合することから、SYT-SSX遺伝子を用いて細胞の癌化・老化能の解析を行うものであり、今年度は以下の成果を得た。(1)特許出願。これまでの研究成果に基づき、SYT-SSXとhBRMの結合を阻害する50アミノ酸領域の同定が、滑膜肉腫の遺伝子治療の基盤技術となることを示し、国内特許を出願した(発明者:田中伸哉、長嶋和郎 名称:ヒト滑膜肉腫に対する遺伝子治療法、特願2002-050894)。(2)SYT-SSX1によるp21発現誘導。細胞老化と関連してSYT-SSX1及び各種変異体をラット線維芽細胞及びhBRM欠損SW13細胞株に導入すると、p21の発現量が増加することを見出した。SYT-SSX1とhBRMの共発現によりp21の発現量は更に亢進した。変異体解析によりこのp21の誘導には、SYT-SSX1のQPGY domain及びC末側が必要であることが明らかとなった。(3)SYT-SSX1によるp53非依存性p21プロモーターの活性化。293T細胞においてSYT-SSX1の過剰発現によりp21プロモーターを活性化することをルシフェラーゼアッセイにより確認した。(p21プロモータープラスミドは国立長寿研磯部先生より分与)。さらにp53欠損HCT116細胞株(Bert Vogelstein教授より分与)を用いてp21の誘導におけるp53依存性を確認したところ、SYT-SSX1によるp21誘導はp53非依存性であることが判明した。SYT-SSXは単に増殖を亢進されるのみではなく、増殖に負の信号も伝達する分子であり、細胞により老化と癌化のバランスのメカニズムの検討を行っている。(4)SYT-SSX1トランスジェニックマウスの作成。LTR由来のプロモーターで発現が制御されるベクターを導入したマウスは出産数が低いものの作成された。現在ヘテロの状態で6ケ月観察しているが明らかな異常所見は得られていない。また、テトラサイクリンにてSYT-SSXが発現誘導可能なマウスの作成のためTRE-SYT-SSX1マウスを作成したところ出産数もコントロールと同等のマウスを得られた、現在rtTA発現マウスとの交配を行っている。

In this study, SYT-SSX, a synovial tumor-related gene, was used to analyze the carcinogenesis and aging of cells. The following results were obtained this year. (1)Permission granted. The results of this research include: basic research, identification of SYT-SSX and hBRM in the field of acid, demonstration of basic technology for the treatment of synovial sarcoma, and domestic patent application (inventor: Nobuya Tanaka, Kazuo Nagajima, name: synovial sarcoma treatment, Japanese Patent Application No. 2002-050894). (2) SYT-SSX1 induced p21 expression. The relationship between cell aging and SYT-SSX1 and various mutants was also observed. The expression of p21 increased when introduced into cell lines and HBRM deficient SW13 cells. SYT-SSX1 and hBRM co-occurrence, p21 co-occurrence, and p21 co-occurrence. The QPGY domain of SYT-SSX1 and the terminal side of C are necessary. (3) Activation of SYT-SSX1 in p53 independent p21. 293T cells were identified by SYT-SSX1 activation. (p21 The National Longevity Research Institute, Mr. Li and Mr. Li The p53-dependent induction of p21 in HCT116 cell line (Professor Bert Vogelstein) was confirmed and p53-independent induction of p21 in SYT-SSX1 was identified. SYT-SSX is responsible for the investigation of cell proliferation, cell aging and cancer. (4)SYT-SSX1 is a new type of software. The LTR is produced from a variety of materials. Now, the state of the game is 6 months old. SYT-SSX can be used to produce a variety of products.

项目成果

Okamoto, T., et al.: "Advanced glycation end products induce angiogenesis in vivo"Microvascular Res.. 63. 186-195 (2002)

Okamoto, T., et al.：“高级糖基化终末产物诱导体内血管生成”微血管研究 63. 186-195 (2002)

Nishihara, H., et al.: "DOCK2 mediates T cell receptor-induced activation of Rac2 and IL-2 transcription"Biochem Biophys Res Comm. 296. 716-720 (2002)

Nishihara, H. 等人：“DOCK2 介导 T 细胞受体诱导的 Rac2 和 IL-2 转录激活”Biochem Biophys Res Comm.。

Tsuda, M., et al.: "Signalling adaptor protein v-Crk activates Rho and regulates cell motility in 3Y1 rat fibroblast cell line"Cell Growth Differ. 13. 131-139 (2002)

Tsuda, M. 等人：“信号接头蛋白 v-Crk 激活 Rho 并调节 3Y1 大鼠成纤维细胞系中的细胞运动”细胞生长不同。

Nishihara, H., et al.: "DOCK2 associates with CrkL and regulates Rac1 in hematopoietic cells"Blood. 100. 3968-3974 (2002)

Nishihara, H. 等人：“DOCK2 与 CrkL 结合并调节造血细胞中的 Rac1”血液。

Nishihara, H., et al.: "Molecular and immunohistochemical analysis of adaptor protein Crk in human cancers"Cancer Letter. 180. 55-61 (2002)

Nishihara, H. 等人：“人类癌症中接头蛋白 Crk 的分子和免疫组织化学分析”《癌症通讯》。