p27^<Kip1>新規分子種の同定とがん抑制因子としての機能解明

p27^<Kip1>新分子种类的鉴定及其抑癌功能的阐明

• 批准号: 14026038
• 负责人: 平野 勝也
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026038/
• 关键词: サイクリン依存性キナーゼ阻害因子; 核移行シグナル; アイソフォーム; 細胞周期; 転写; 遺伝子; プロモーター; 接触抑制

細胞間接触により増殖を停止したブタ大動脈由来培養内皮細胞からサイクリン依存性キナーゼ阻害因子p27^<Kip1>の新たなアイソフォーム(p27^<Kip1R>)をクローニングした。p27^<Kip1R>のがん抑制因子としての機能を、細胞および個体レベルで明らかにすることを目的として、核移行、細胞周期制御及び分解抵抗性に関わる構造を明らかにした。また、自然高血圧発症ラット(SHR)と正常ラットの大動脈における2つのアイソフォームの発現解析から、組織増殖性とアイソフォーム発現の相関を、個体レベルで明らかにした。1.p27^<Kip1R>は、領域153-168が有意な核移行に必要な配列であることが明らかになった。この領域には塩基性アミノ酸は一残基(K168)しか含まれない。不足する塩基性アミノ酸に代わり疎水性アミノ酸が機能を果たすという点で非典型的な2分裂型核移行シグナルであることを明らかにした。2.GFP発現系を用いて細胞増殖に及ぼす影響を解析し、p27^<Kip1R>の増殖抑制作用を明らかにした。増殖抑制には、p27^<Kip1>と共通のN末端領域が必要である。3.6週齢SHRの大動脈にはp27^<Kip1>が、正常ラットではp27^<Kip1R>が、主なアイソフォームとして発現する。週齢を重ねると、SHRにおいてもp27^<Kip1R>発現が優位になる。正常ラット大動脈を培養するとp27^<Kip1R>が消失し、p27^<Kip1>が主に発現する。個体レベルで、組織増殖性とp27^<Kip1R>発現に逆相関が示唆された。4.Kip1遺伝子全長を決定した。p27^<Kip1R>特異的コード領域がエキソン3に含まれることを明らかにした。プロモーター活性が、細胞間接触により亢進することを明らかにした。この活性増加には、翻訳開始点より上流2000-2350bpの領域が必要であった。

Proliferation stops due to cell-cell contact, and a new gene solution (p27^ ) for the insulin-dependent inhibitory factor p27^is developed from the endothelial artery to culture endothelial <Kip1><Kip1R>cells. p27 <Kip1R>inhibitors function, cellular and individual function, purpose, nuclear migration, cell cycle control and breakdown resistance. 2. Analysis of the occurrence of spontaneous hypertension syndrome (SHR) and normal hypertension in the aorta, tissue proliferation, and the occurrence of spontaneous hypertension syndrome (SHR). 1.p27 <Kip1R>^ This domain contains the basic amino acid residue (K168). In addition, it is not typical for nuclear fission to occur. 2. The role of GFP expression in cell proliferation and its impact on cell proliferation have been analyzed, and the inhibitory effect of p27 β <Kip1R>on proliferation has been clarified. Growth inhibition, p27^<Kip1>and common N-terminal domain are essential. 3.6 The circulation of SHR is p27^<Kip1>g, normal, and the main circulation is p27^<Kip1R>g. <Kip1R>Zhou Normal arterial culture: p27^<Kip1R>disappears, p27^appears<Kip1>. The expression of p27 was negatively correlated with the growth of individual and tissue<Kip1R>. 4. Kip1: The total length of the child is determined. p27^<Kip1R>Special fields include: The activity and cell-to-cell contact of the cells were increased. This activity increases in the 2000-2350bp domain.

项目成果

Nakayama T., Hirano K., Shintani Y., Nishimura J., Nakatsuka A., Kuga H., Takahashi S., Kanaide H.: "Unproductive cleavage and inactivation of protease-activated receptor-1 by trypsin in vascular endotheial cells"Br. J. Pharmacol. 138. 121-130 (2003)

Nakayama T.、Hirano K.、Shintani Y.、Nishimura J.、Nakatsuka A.、Kuga H.、Takahashi S.、Kanaide H.：“血管内皮细胞中胰蛋白酶对蛋白酶激活受体 1 的非生产性裂解和失活

Ihara E, Hirano K, Hirano M, Nishimura J, Nawata H, Kanaide H:: "The mechanism of down-regulation of L-type Ca^<2+> channel in the proliferating smooth muscle cells of rat aorta"J Cell Biochem. 87. 242-251 (2002)

Ihara E，Hirano K，Hirano M，Nishimura J，Nawata H，Kanaide H：：“大鼠主动脉增殖平滑肌细胞中L型Ca ^ 2 通道的下调机制”J Cell Biochem。

Hirano K, Zeng Y, Hirano M, Nishismura J, Kanaide H: "Sequence requirement for nuclear localization and growth inhibition of p27^<Kip1R>, a degradation-resistant isoform of p27^<Kip1>"J Cell Biochem. (in press).

Hirano K、Zeng Y、Hirano M、Nishismura J、Kanaide H：“p27^<Kip1R> 的核定位和生长抑制的序列要求，p27^<Kip1R> 是 p27^<Kip1> 的一种抗降解亚型”J Cell Biochem。