p27^<Kip1>新規分子種の同定とがん抑制因子としての機能解明

p27^<Kip1>新分子种类的鉴定及其抑癌功能的阐明

• 批准号: 14026038
• 负责人: 平野 勝也
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026038/
• 关键词: サイクリン依存性キナーゼ阻害因子; 核移行シグナル; アイソフォーム; 細胞周期; 転写; 遺伝子; プロモーター; 接触抑制

細胞間接触により増殖を停止したブタ大動脈由来培養内皮細胞からサイクリン依存性キナーゼ阻害因子p27^<Kip1>の新たなアイソフォーム(p27^<Kip1R>)をクローニングした。p27^<Kip1R>のがん抑制因子としての機能を、細胞および個体レベルで明らかにすることを目的として、核移行、細胞周期制御及び分解抵抗性に関わる構造を明らかにした。また、自然高血圧発症ラット(SHR)と正常ラットの大動脈における2つのアイソフォームの発現解析から、組織増殖性とアイソフォーム発現の相関を、個体レベルで明らかにした。1.p27^<Kip1R>は、領域153-168が有意な核移行に必要な配列であることが明らかになった。この領域には塩基性アミノ酸は一残基(K168)しか含まれない。不足する塩基性アミノ酸に代わり疎水性アミノ酸が機能を果たすという点で非典型的な2分裂型核移行シグナルであることを明らかにした。2.GFP発現系を用いて細胞増殖に及ぼす影響を解析し、p27^<Kip1R>の増殖抑制作用を明らかにした。増殖抑制には、p27^<Kip1>と共通のN末端領域が必要である。3.6週齢SHRの大動脈にはp27^<Kip1>が、正常ラットではp27^<Kip1R>が、主なアイソフォームとして発現する。週齢を重ねると、SHRにおいてもp27^<Kip1R>発現が優位になる。正常ラット大動脈を培養するとp27^<Kip1R>が消失し、p27^<Kip1>が主に発現する。個体レベルで、組織増殖性とp27^<Kip1R>発現に逆相関が示唆された。4.Kip1遺伝子全長を決定した。p27^<Kip1R>特異的コード領域がエキソン3に含まれることを明らかにした。プロモーター活性が、細胞間接触により亢進することを明らかにした。この活性増加には、翻訳開始点より上流2000-2350bpの領域が必要であった。

The reason for the intercellular contact with human colonies to stop the large-scale action is to culture the endothelial cells, the endothelial cells, the dependent cells, the inhibition factor p27 ^ & the new lt;Kip1> gene p27 ^ & lt;Kip1R>). P27 ^ & lt;Kip1R> antiviral inhibitors, cell cycle inhibitors, cell cycle regulators, cell cycle regulators, cell cycle The disease of natural high blood pressure (SHR) is normal. It is not only possible to analyze the disease, but also to analyze the disease in the tissue, and to detect the disease in the tissue and body. 1. P27 ^ & lt;Kip1R>, field 153-168 "necessary" for nuclear transfer. The field is sensitive to acid, acid and a residue (K168). In the absence of basic acid, the water-based acid mechanism is effective in the detection of atypical 2-mitotic nuclear migration. The colonization inhibition of 2.GFP virus was studied by cell colonization analysis, p27 ^ & lt;Kip1R> colony inhibition. Colonization inhibition genes, p27 ^ & lt;Kip1> genes share the same N-terminal domain. 3.6 "SHR" big action "p27 ^ & lt;Kip1>", "normal"p27 ^ & lt;Kip1R>", "master"please"please"see". Please repeat the data, SHR the data, and the p27 ^ & lt;Kip1R> will show the bad bits. P27 ^ & lt;Kip1R> disappear, p27 ^ & lt;Kip1> main event is visible. Individual and tissue gonadal diseases p27 ^ & lt;Kip1R> show that there is a negative correlation. The total length of the 4.Kip1 child determines the size of the child. P27 ^ & lt;Kip1R> special information is available in the field of communication 3, which contains information and information. The level of activity and intercellular contact activity increased the level of sensitivity and sensitivity. It is necessary to increase the level of activity, start point, upstream 2000-2350bp field.

项目成果

Nakayama T., Hirano K., Shintani Y., Nishimura J., Nakatsuka A., Kuga H., Takahashi S., Kanaide H.: "Unproductive cleavage and inactivation of protease-activated receptor-1 by trypsin in vascular endotheial cells"Br. J. Pharmacol. 138. 121-130 (2003)

Nakayama T.、Hirano K.、Shintani Y.、Nishimura J.、Nakatsuka A.、Kuga H.、Takahashi S.、Kanaide H.：“血管内皮细胞中胰蛋白酶对蛋白酶激活受体 1 的非生产性裂解和失活

Ihara E, Hirano K, Hirano M, Nishimura J, Nawata H, Kanaide H:: "The mechanism of down-regulation of L-type Ca^<2+> channel in the proliferating smooth muscle cells of rat aorta"J Cell Biochem. 87. 242-251 (2002)

Ihara E，Hirano K，Hirano M，Nishimura J，Nawata H，Kanaide H：：“大鼠主动脉增殖平滑肌细胞中L型Ca ^ 2 通道的下调机制”J Cell Biochem。

Hirano K, Zeng Y, Hirano M, Nishismura J, Kanaide H: "Sequence requirement for nuclear localization and growth inhibition of p27^<Kip1R>, a degradation-resistant isoform of p27^<Kip1>"J Cell Biochem. (in press).

Hirano K、Zeng Y、Hirano M、Nishismura J、Kanaide H：“p27^<Kip1R> 的核定位和生长抑制的序列要求，p27^<Kip1R> 是 p27^<Kip1> 的一种抗降解亚型”J Cell Biochem。