脂肪細胞分化におけるclonal expansionと分化シグナルの切り換え機構

脂肪细胞分化中的克隆扩增和分化信号转换机制

• 批准号: 14033242
• 负责人: 今川 正良
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14033242/
• 关键词: 脂肪細胞; 肥満; 細胞分化; Rho; 転写因子; clonal expansion; 糖尿病; 生活習慣病

肥満に直結する脂肪細胞分化の重要な制御因子として、PPARγ(Peroxisome Proliferator-Activates Receptorγ)やC/EBP(CCAAT/Enhancer-Binding Protein)ファミリーが同定された。しかし、これらが発現するのは、脂肪細胞分化の中期であり、脂肪細胞分化の最も初期における変化は未だ不明な点が多い。脂肪細胞の分化には、細胞がconfluentに達した後、clonal expansionというステップを経る必要が有り、その後分化の過程に進むことが知られている。しかし、この切り換えスイッチの機構については全くわかっていない。最近我々は、脂肪細胞分化初期すなわちclonal expansionの時期に発現が増加する因子として、Rhoファミリーの一つであるTCLを同定した。そこで脂肪細胞分化初期におけるTCLの機能解明を目的とし以下のことを明らかとした。1)TCLの発現により発現量が増加する因子をPCRサブトラクション法を用いて単離した。それらの脂肪細胞分化過程初期における発現量変化について検討したところ、TCLと同様に分化初期に発現量が一過性に増加するものや、経時的に発現が増加していくもの、減少していくものなど様々な発現パターンが得られた。2)活性型、不活性型および野生型TCLを発現する3T3-L1細胞のstable transformantsを樹立した。樹立した細胞を用いてCRIB assay(Cdc42/Rac interacting binding assay)を行なった結果、活性型および野生型TCLがCdc42やRac1と同様にPAK1由来のCRIB domainに結合することを明らかとした。3)上記のstable transformantsについて誘導誘導実験を行ったところ、不活性型TCL発現細胞の分化能が抑制されることが明らかとなった。4)Pull Down Assayおよび免疫沈降法によりTCLと相互作用する因子の存在を明らかにした。

Rich in <s:1> important な control factors for the differentiation of に straight connective する adipocytes と Activates て, PPARγ(Peroxisome Proliferator-Activates Receptorγ)やC/EBP(CCAAT/Enhancer-Binding Protein)ファ リ リ が が the same as された. し か し, こ れ ら が 発 now す る の は, adipocyte differentiation middle の で あ り, adipocyte differentiation の most early も に お け る - は だ not unknown な points が い more. Fat cells の に は, cell が confluent に da し た, clonal expansion と い う ス テ ッ プ を 経 る が り, necessary そ の に の process after differentiation into む こ と が know ら れ て い る. The <s:1>, <s:1>, <s:1> and <s:1> are exchanged for えス, ッチ and ッチ institutions, に, <s:1>, て, て, and all くわ, って, な, な, and な. I recently 々 は, adipocyte differentiation initial す な わ ち clonal expansion period の に 発 now が raised す る factor と し て, Rho フ ァ ミ リ ー の a つ で あ る TCL を be し た. Early そ こ で adipocyte differentiation に お け る TCL の function interpret を purpose と し following の こ と を Ming ら か と し た. 1) TCL の 発 now に よ り 発 now quantity が raised す る factor を PCR サ ブ ト ラ ク シ ョ を ン method with い て 単 from し た. そ れ ら の adipocyte differentiation process early に お け る 発 now amount - the に つ い て beg し 検 た と こ ろ, TCL と with others early に differentiation に 発 now quantity が transient に raised す る も の や, when 経 に 発 now が raised し て い く も の, reduce し て い く も の な ど others 々 な 発 now パ タ ー ン が must ら れ た. 2) Active type, inactive type および wild-type TCLを occurrence する3T3-L1 cells <s:1> stable transformantsを establishment <s:1> た. Establish し た cells を using い て CRIB assay (Cdc42 / Rac interacting binding assay) line を な っ た results, active type お よ び wild-type TCL が Cdc42 や Rac1 と with others に PAK1 origin の CRIB The domainに combined with する する とを とを indicates ら と と た た. 3) written の stable transformants に つ い て induced induction be 験 を line っ た と こ ろ type, not active TCL 発 の is cell differentiation can suppress さ が れ る こ と が Ming ら か と な っ た. 4) Pull Down Assay お よ び immune sink method に よ り TCL と interaction す る factors の を Ming ら か に し た.

项目成果

今川 正良: "核内受容体PPARγを介した脂肪細胞分化の分子機構"脂質栄養学. 12. 54-64 (2003)

今川正义：“核受体 PPARγ 介导的脂肪细胞分化的分子机制”脂质营养。 12. 54-64 (2003)

今川 正良: "小児の生活習慣病と体脂肪の分子生物学"愛知県小児科医会会報. 77. 29-34 (2003)

今川正义：“与生活方式相关的疾病和儿童体内脂肪的分子生物学”爱知儿科协会通报77. 29-34（2003）。

Makoto Nishizuka: "Crucial role of TCL/TC10βL, a subfamily of Rho GTPase, in adipocyte differentiation."Journal of Biological Chemistry. 278. 15279-15284 (2003)

Makoto Nishizuka：“Rho GTP 酶亚家族 TCL/TC10βL 在脂肪细胞分化中的关键作用。”生物化学杂志 278。15279-15284 (2003)

Naoto Arimura: "The peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR)γ regulates expression of the perilipin gene in adipocytes"Journal of Biological Chemistry. 279. 10070-10076 (2004)

Naoto Arimura：“过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPAR)γ 调节脂肪细胞中周脂质基因的表达”生物化学杂志 279. 10070-10076 (2004)

Makoto Nishizuka: "Crucial role of TCL/TC10βL, a subfamily of Rho GTPase, in adipocyte differentiation"Journal of Biological Chemistry. 278(印刷中). (2003)

Makoto Nishizuka：“TCL/TC10βL（Rho GTP 酶亚家族）在脂肪细胞分化中的重要作用”《生物化学杂志》278（出版中）。