活性型Wnt/Wg蛋白質とその受容体Frizzledの相互作用の生化学的解析

活化Wnt/Wg蛋白与其受体Frizzled相互作用的生化分析

• 批准号: 14034225
• 负责人: 柳川 伸一
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14034225/
• 关键词: Wnt; Wingless; Casein Kinase I; GSK-3β; Armadillo; RNAi; Signal transduction; Signal Transduction; Drosophila

ユビキチン依存性の蛋白分解系によるArmadillo(Arm)蛋白量の制御はWingless(Wg)シグナル伝達において中心的な役割を演じている。最近この過程には、プロテインキーゼZeste white 3(Zw3)並びにCasein kinase I(CKIα)によるArmのリン酸化が重要である事が報告されている。Zw3とCKIαさらには他のArm蛋白分解制御複合体の構成員は、Wgシグナル依存的にArmのリン酸化を制御しているが、その詳細な機構は明らかでない。特にZw3とCKIαによるArmのリン酸化のうちWgシグナルが細胞内でどちらのリン酸化を抑制しているのかは不明である。これらの疑問に答えるため、本研究では、Drosophila S2R+細胞において種々のRNAi実験を行い、それをArm蛋白の中の異なる位置のSer残基のに生じたリン酸化を特異的に認識する抗体とを用いて解析した.その結果は以下の様である.1)CKIαは及びZw3はArmのそれぞれSer56及びThr52,Ser48,Ser44を特異的にリン酸化しており、またZw3によるArmリン酸化にはCKIαによるPrimingリン酸化が必須であった。2)DaxinはZw3によるArmのリン酸化を促進するが、CKIαによるArmリン酸化には影響を与えない。3)WgシグナルはZw3よるArmのリン酸化を速やかに抑制するが、CKIαによるArmのリン酸化には影響を与えない。従ってこの過程がWgシグナル伝達の主要な抑制段階となっている事が判明した。さらに4)Wg刺激によって誘導されるDishevelledのリン酸化はCKIαによる事も明らかとなった。

ユ ビ キ チ ン dependency is の protein decomposition に よ る Armadillo (Arm) protein quantity の suppression は Wingless (Wg) シ グ ナ ル 伝 da に お い て な battle in the center of the cut を play じ て い る. Recent こ の process に は, プ ロ テ イ ン キ ー ゼ Zeste white 3 (Zw3) and び に Casein kinase (CKI alpha relationship) I に よ る Arm の リ ン acidification が important で あ る matter が report さ れ て い る. Zw3 と CKI alpha さ relationship ら に は の his Arm protein decomposition imperial complex は の constitute member, Wg シ グ ナ ル dependent に Arm の リ ン acidification を suppression し て い る が, そ の detailed な institutions は Ming ら か で な い. Special に Zw3 と CKI alpha に relationship よ る Arm の リ ン acidification の う ち Wg シ グ ナ ル が intracellular で ど ち ら の リ ン acidification を inhibit し て い る の か は unknown で あ る. Youdaoplaceholder2 れら <s:1> questions に answer えるため, this study で で, Drosophila S2R + cells に お い て kind 々 の RNAi be 験 を い, そ れ を の of Arm protein の な る position の Ser residues の に raw じ た リ ン acidification を specific に know す る antibody と を with い て parsing し た. そ の results under は の others で あ る. 1) CKI alpha は relationship and び Zw3 は Arm の そ れ ぞ れ Ser56 and び Thr5 2, Ser48, Ser44 を specific に リ ン acidification し て お り, ま た Zw3 に よ る Arm リ ン acidification に は CKI alpha に relationship よ る Priming リ ン acidification が must で あ っ た. 2) Daxin は Zw3 に よ る Arm の リ ン acidification を promote す る が, CKI alpha に relationship よ る Arm リ ン acidification に は influence を and え な い. 3) the Wg シ グ ナ ル は Zw3 よ る Arm の リ ン acidification を speed や か に inhibit す る が, CKI alpha に relationship よ る Arm の リ ン acidification に は influence を and え な い. 従 っ て こ の process が Wg シ グ ナ ル 伝 da の main な inhibit Duan Jie と な っ て い る matter が.at し た. さ ら に 4) Wg stimulus に よ っ て induced さ れ る Dishevelled の リ ン acidification は CKI alpha に relationship よ る matter も Ming ら か と な っ た.

项目成果

Hiroko Yamazaki: "Axin and the Axin/Arrow-binding protein DCAP mediate glucose-glycogen metabolism."Biochemical and Biophysical Research Communications. 304巻. 229-235 (2003)

Hiroko Yamazaki：“Axin 和 Axin/Arrow 结合蛋白 DCAP 介导葡萄糖-糖原代谢。”《生物化学和生物物理研究通讯》，第 304 卷，229-235（2003 年）。

Hiroko Matsubayashi: "Biochemical characterization of the Drosophila Wingless Signaling pathway Based on RNA Interference"Molecular and Cellular Biology. 24巻・5号. 2012-2024 (2004)

Hiroko Matsubayashi：“基于 RNA 干扰的果蝇 Wingless 信号通路的生化表征”《分子与细胞生物学》第 24 卷，第 5 期。2012-2024 年（2004 年）

Shin-ichi Yanagawa: "Casein Kinase I phosphorytates the Armadillo protein and induces its degradation in Drosophila"The EMBO Journal. 21巻・7号. 1733-1742 (2002)

Shin-ichi Yanakawa：“酪蛋白激酶 I 磷酸化犰狳蛋白并诱导其在果蝇中的降解”《EMBO 杂志》第 21 卷，第 7 期。1733-1742 (2002)