WntシグナルによるArmadillo/βカテニン蛋白の分解制御機構の解析

Wnt信号控制犰狳/β-catenin蛋白降解的机制分析

• 批准号: 11144219
• 负责人: 柳川 伸一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11144219/
• 关键词: Wnt; シグナル伝達; Armadillo; β-カテニン; プロテアソーム

Wnt/Wingless(Wg)シグナル伝達経路の主要な構成員は、Scaffold蛋白であるAxinに結合して大きな複合体を形成し、β-カテニン/Am(Arm)蛋白質の分解制御装置として機能している。マウスとDrosophilaのAxinのアミノ酸配列を比較すると、癌抑制遺伝子産物APCを結合するRGSドメインとC-末端のDIXドメイン以外には、非常に高い相同性は認められない。そこで様々のDaxinの欠損変異体を、Wgに感受性を持つDrosophila培養細胞S2R+に導入し、そのWgシグナル伝達に対する効果を検討した。細胞内Armレベルへの影響、シグナル伝達経路の主要な構成員との結合性、並びにTcf依存性転写活性化を指標として各変異体の機能を解析した結果、1)Arm及びZw3と分子中央部で、またC-末端部でDishevclled(Dsh)及びProtein phosphatase 2Aと結合する事、2)Wgシグナル伝達の阻害には、N-末端からArm結合部位で十分であり、またC-末端部だけからなる変異体はDominant-negativeとなりArm蓄積を誘導する事、3)細胞内でのDshとDaxinのco-localizationが認められる事、4)Wg刺激によりDaxinは低リン酸化型となる事、5)DaxinはWg,Dsh,全長ArmによるTcf依存性転写活性化を阻害出来るが、N-末端にあるリン酸化標的配列を欠いたArmによる転写活性化は阻害出来ない事が明らかとなった。6)またキナーゼ活性を欠くZw3もDaxinと結合する事から、このZw3変異体が持つ強いArm誘導活性の分子機構が明らかとなった。

Wnt/Wingless (Wg) シ グ ナ ル 伝 の な main constitute part of 経 road は, Scaffold protein で あ る Axin に combining し て big き な complex を し, beta カ テ ニ ン / Am (Arm) protein decomposition suppression device と の し て function し て い る. マ ウ ス と Drosophila の Axin の ア ミ ノ acid with column を compare す る と, cancer inhibition but the latter's 伝 APC を combining す る RGS ド メ イ ン と C - end の DIX ド メ イ ン outside に は, very high に い phase gay は め ら れ な い. そ こ で others 々 の Daxin の owe loss - variant を, Wg に susceptibility を hold つ Drosophila culture cell S2R + に import し, そ の Wg シ グ ナ ル 伝 da に す seaborne る unseen fruit を beg し 検 た. Cellular Arm レ ベ ル へ の influence, シ グ ナ ル 伝 の な main constitute part of 経 road と の associativity, and び に Tcf dependency planning write activeness を index と し て - each function of allograft の を parsing し た results, 1) Arm and び Zw3 と molecular central department で, ま た C - terminal part で Dishevclled (Dsh) and び Protei n phosphatase 2 a と combining す る things, 2) the Wg シ グ ナ ル 伝 da の resistance against に は, N - terminal か ら Arm combining site で very で あ り, ま た だ C - end department け か ら な る - variant は Dominant - negative と な り Arm accumulation induced す を る, 3) cells で の Dsh と Daxin の co - locali Zation が recognize め ら れ る, 4) Wg stimulate に よ り Daxin は low リ ン acidification model と な る, 5) Daxin は Wg, Dsh, total length of the Arm に よ る Tcf dependency planning activeness を resistance against written る が, N - terminal に あ る リ ン acidification mark with column を owe い た Arm に よ る planning activeness は resistance against written な い Youdaoplaceholder0 Ming ら となった. 6) ま た キ ナ ー ゼ active を owe く Zw3 も Daxin と combining す る matter か ら, こ の Zw3 - variant が hold strong つ い Arm induction activity の molecular institutions が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Jong-Seo Lee: "Intracisternal Type A particle-Mediated Activation of the Notch4/int3 Gene in a Mouse mammary Tumor : Generation of Truncated Notch4/int3 mRNAs by Retroviral Splicing Events"Journal of Virology. 73・6. 5166-5171 (1999)

Jong-Seo Lee：“小鼠乳腺肿瘤中 A 型颗粒介导的 Notch4/int3 基因的激活：通过逆转录病毒剪接事件生成截短的 Notch4/int3 mRNA”《病毒学杂志》73・6。 ）

Jong-Seo Lee: "Characterization of Mouse Dishevelled (DV1) Proteins in Wnt/Wingless Signaling Pathway"The Journal of Biological Chemistry. 274・30. 21464-21470 (1999)

Jong-Seo Lee：“Wnt/Wingless 信号通路中小鼠蓬乱 (DV1) 蛋白质的表征”《生物化学杂志》274・30 (1999)。

柳川伸一: "Wnt・ Fri33led"Bio Science用語ライブラリー「細胞内シグナル伝達」改訂2版羊土社. 32-33 (1999)

柳川真一：“Wnt·Fri33led”生物科学术语库“细胞内信号转导”修订第2版Yodosha。

Jong-Seo Lee: "Murine leukemia provirus-mediated activation of the Notch1 gene leads to induction of HES-1 in a mouse T lymphoma cell line, DL-3"FEBS Letters. 455. 276-280 (1999)

Jong-Seo Lee：“小鼠白血病原病毒介导的 Notch1 基因激活导致小鼠 T 淋巴瘤细胞系 DL-3 中 HES-1 的诱导”FEBS Letters。