Wnt依存性のカドヘリン転写を誘導するアルマジロ蛋白結合性転写制御因子の同定

诱导 Wnt 依赖性钙粘蛋白转录的犰狳蛋白结合转录调节因子的鉴定

基本信息

  • 批准号:
    09275216
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

形態形成にかかわるシグナル分子Wnt/Wingless(Wg)の細胞内情報伝達には、Dfz2,Dsh,ZW-3,Arm,Dtcfなどの遺伝子が関与している事が遺伝学的解析により明らかにされている。我々はこのWnt/Wg経路の生化学的実体を解明するため、Wgに感受性を持つDrosophila翅原基由来培養細胞clonc-8を用いたWgアッセイ系を確立した。本研究においてはこの系を用いて、WgによるDrosoplila-E-Cadherin誘導機構の解析を行った。βカテニン/Armはカドヘリン接着因子としての機能と転写因子TCF結合して核内へと移行し、そこでWnt/Wgの標的遺伝子の転写を制御する転写制御因子としての機能を持つ。Wnt/Wgシグナル伝達とカドヘリンによる細胞の接着とは拮抗的に働く。それは、βカテニン/ArmがWnt/Wgシグナル伝達を行う為には、βカテニン/Arm蛋白の細胞質内での蓄積が必須であるのに対し、カドヘリンはβカテニン/Armを細胞膜へとリクルートするからである。今回DE-CadherinがWgの標的遺伝子である事を発見した。Wg経路の活性化の方法としては、Wg処理の他、Clonc-8細胞内でのDshの強制発現などを用いたが、いずれの場合でもDE-CadherinのmRNA著しい上昇とそれに続くDE-Cadherin蛋白の蓄積が観察された。この事実はWgがその標的遺伝子であるDE-Cadherinの発現を上昇させることを通じてArmを細胞膜へとリクルートし、細胞質内のArm蛋白濃度を低下させ、その結果逆にWgシグナル伝達の阻止をもたらすという、Wgシグナル伝達の負のフィードバック制御機構の存在を示唆している。プロモーター/エンハンサー領域と考えられたDE-Cadherin蛋白コード領域の上流4.2Kbを用いたCATアッセイによってこの部分にWg感受性エレメントの存在が確認された。
Morphogenetic に か か わ る シ グ ナ Wnt/Wingless ル molecules (Wg) intelligence 伝 の cell of に は, Dfz2, Dsh, ZW - 3, Arm, Dtcf な ど の posthumous son 伝 が masato and し て い が る things but 伝 learn analytical に よ り Ming ら か に さ れ て い る. I 々 は こ の Wnt/Wg の 経 road be body of biochemistry を interpret す る た め, Wg に susceptibility を hold つ Drosophila wing primordium origin culture cell clonc - 8 を with い た Wg ア ッ セ を イ department establish し た. This study に お い て は こ の is を with い て, Wg に よ る Drosoplila - E - Cadherin induced institutional analytical line を っ の た. Beta カ テ ニ ン / Arm は カ ド ヘ リ ン then factor と し て の function と planning write factor TCF combining し て in nuclei へ と transitional し, そ こ で Wnt/Wg の mark heritage 伝 son の planning write を suppression す る planning write suppression factor と し て の function を つ. The Wnt/Wgシグナ 伝 伝 reaches the とカドヘリ による による cell nucleus and then と による antagonizes the に く. そ れ は, beta カ テ ニ ン / Arm が Wnt/Wg シ グ ナ ル 伝 line of を う for に は, beta カ テ ニ ン / Arm the cytoplasm で protein の の accumulation が must で あ る の に し, seaborne カ ド ヘ リ ン は beta カ テ ニ ン / Arm を membrane へ と リ ク ル ー ト す る か ら で あ る. This time, the details of DE-CadherinがWg た 伝, である を, will be seen in た. Wg 経 road の activeness の way と し て は, Wg 処 の, his Clonc - 8 cells で の Dsh の forced 発 now な ど を with い た が, い ず れ の occasions で も DE - Cadherin の mRNA in し い rise と そ れ に 続 く の DE - Cadherin protein accumulation が 観 examine さ れ た. こ の things be は Wg が そ の mark heritage 伝 son で あ る DE - Cadherin の 発 now rising を さ せ る こ と を tong じ て Arm を membrane へ と リ ク ル ー ト し cytoplasm の Arm, low protein concentration を さ せ, そ の results inverse に Wg シ グ ナ ル 伝 da の stop を も た ら す と い う, Wg シ グ ナ ル 伝 da の negative の フ ィ ー ド バ The ッ control body <e:1> has を incitement to て る る. プ ロ モ ー タ ー / エ ン ハ ン サ と ー field test え ら れ た DE - Cadherin protein コ ー の ド field high 4.2 Kb を with い た CAT ア ッ セ イ に よ っ て こ の part に Wg susceptibility エ レ メ ン ト の exist が confirm さ れ た.

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
柳川伸一: "Wingless/Wnt蛋白質のシグナル伝達機構" 共立出版・蛋白質,核酸,酵素. 42・1. 22-30 (1997)
柳川真一:“Wingless/Wnt蛋白的信号转导机制”共立Shuppan/蛋白质,核酸,酶42・1(1997)。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Shin-ichi Yanagawa: "Accumulation of Armadillo Induced by Wingless,Dishevelled,and Dominant-negative Zeste-White3 Leads to Elevated DE-Cadherin in Drosophila Clone 8 Wing Disc Cells." The Journal of Biological Chemistry. 272・40. 25243-25251 (1997)
Shin-ichi Yanakawa:“无翅、杂乱和显性阴性 Zeste-White3 诱导的犰狳积累导致果蝇克隆 8 翼盘细胞中 DE-钙粘蛋白升高。”《生物化学杂志》272・40。 (1997)
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
柳川伸一: "Wnt/Winglessタンパク質のシグナル伝達経路" 羊土社・実験医学. 15・16. 2006-2012 (1997)
柳川真一:“Wnt/Wingless 蛋白信号转导途径”Yodosha Experimental Medicine 15/16 2006-2012(1997)。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
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    1996
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    $ 1.28万
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