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バクテリアのタンパク質合成系に関与する未知遺伝子群の探索

寻找参与细菌蛋白质合成系统的未知基因

基本信息

批准号：
16013215
负责人：
横川隆志
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

タンパク質合成系に関与するとされる教科書的なタンパク質性因子をすべて純化し系を再構築したタンパク質合成系(PUREシステム)の翻訳効率がさほど良くないことから、タンパク質合成にはまだ知られていない遺伝子が存在するのではないかと考えた。タンパク質合成は生物にとって非常に重要なイベントであることから、この遺伝子はすべてのバクテリアに共通すると考え、BuchneraとM.genitalium G37に共通する遺伝子のうち機能が確定しない遺伝子数を見積もったところ、たかだか30しか存在しないことが明らかとなった。このうちタンパク質合成に関与しそうなgidA, efpの他、高度に保存されていたGTP結合タンパク質、mnmE、era、lepA、yihA、ychF、yhbZ、engAをクローニングし、遺伝子産物をすべてヒスチジンタグを融合させて調製した。これらをPUREシステムに添加したが、どのタンパク質を加えた場合でもタンパク質合成の顕著な促進も阻害も認められなかった。このことは、これらのタンパク質は少なくとも1つではタンパク質合成系に関与していないと考えられる。しかしこれらの多くが文献上、リボソームと作用することが指摘されていることから、このうち複数が協調的に作用している可能性も考えられる。そこで発現させたタンパク質をNiカラムに固定化し、これをアフィニティークロマトグラフィーに見立てて、相互作用するタンパク質を分離し質量分析にかけて分離されたタンパク質を同定した。もしもバクテリアにとって必須な機能を有しているなら、相互作用する相手分子もやはり保存性の高いタンパク質だと考えられる。しかし現在のところ、EF-Tu以外に保存性の高いタンパク質は認められなかった。EF-Tuは細胞中にたくさん含まれるため、非特異的な相互作用の可能性もあり、慎重に解析を進めている。

The quality factor of the textbook is related to the quality synthesis system. The purification system is reconstructed. The quality synthesis system is transformed into a quality synthesis system. The number of genes is very important for the synthesis of DNA. The number of genes is very important for the synthesis of DNA. The number of genes is very important for the synthesis of DNA. GTP binding proteins, mnmE, era, lepA, yihA, ychF, yhbZ, engA, gene products, fusion proteins, modulation proteins, etc. For example, if you want to increase your quality, you can increase your quality. The relationship between quality and composition is discussed in detail. There are a lot of documents on this topic, and the role of coordination is very important. The results show that the quality of the product is stable, stable and stable. The function and interaction of the molecules are essential to the preservation of the environment. In addition to EF-Tu, there is a high degree of preservation. EF-Tu contains information about the possibility of non-specific interactions in cells, and analyzes them carefully.