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脂肪細胞により分泌される機能性膜小胞の解析

脂肪细胞分泌的功能性膜囊泡分析

基本信息

批准号：
16046210
负责人：
青木直人
金额：
$ 4.99万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16046210/
关键词：
膜小胞 MFG-E8 adipocyte

项目摘要

3T3-L1細胞を定法により分化誘導し、細胞内の脂肪蓄積が十分になるまで培養を続けた。2日間の培養(コンディション)培地を回収し,遠心分離を組み合わせて膜小胞画分を得た。マーカータンパク質MFG-E8の局在を免疫電子顕微鏡により詳細に観察したところ,直径100nmのいわゆるexosomeだけでなく,直径が1μmにもおよびmicrovesicleにも存在することが明らかとなった。つまり脂肪細胞から分泌される膜小胞は,一部のガン細胞で報告されているように由来の異なる混合体として存在することが明らかとなった。脂肪が過度に蓄積した脂肪組織への浸潤が報告されているマクロファージに対する脂肪細胞由来の膜小胞の機能を考えて,脂肪細胞より集めた培養上清をそのまま,あるいは超遠心分離により膜小胞画分を除いた状態でマクロファージ(J774細胞)に与えて培養した。そのまま与えた場合,マクロファージの活性化(F4/80の発現),炎症性サイトカイン(IL-6)の発現・分泌は観察されなかったが,膜小胞を除いた培養上清で培養した場合,これらの顕著な発現誘導が見られた。つまり膜小胞にはマクロファージの活性化に対する負の制御因子が含まれることが予想される。現在脂肪細胞の培養上清に含まマクロファージの活性化を引き起こす正および負の制御因子の同定を進めている。また膜小胞にはマトリクスプロテアーゼが少なからず含まれることも併せて見出し,従来の小胞体・ゴルジ経由とは別に膜小胞経由での分泌メカニズムが存在することを証明した。以上の結果は論文にまとめ,現在投稿中である。

3T3-L1 cells were cultured using a certain method, including induction of differentiation and fat accumulation in the cells. After 2 days of cultivation, the cultured cells were collected and separated, and the membrane cells were divided into groups by centrifugal separation. The details of the microscopic immunoelectron micromirror of MFG-E8, the diameter of which is 100nm, is 100nm. Exosome is a microvesicle with a diameter of 1μm.つまりAdipocyte からSecret されるmembranous cells は, 1 part of のガンcell でReport されているように origin のdifferent なる hybrid として exists することが明らかとなった. Excessive accumulation of fat and infiltration of fat tissue Collect the culture supernatant and use super-telecentric separation to separate membrane cells. It is necessary to remove the いた status of でマクロファージ (J774 cells) and えて culture. In the case of そのまま and えた, マクロファジのactivation (F4/80の発 appear), inflammatory サイトカイン (IL-6) appears・The secretion is detected, the membrane cells are removed, the culture supernatant is removed, and the culture supernatant is cultured, and the cells are induced.つまり membrane cells にはマクロファージのactivation に対するnegative のcontrolling factor がまれることが yu want される. Now, the culture supernatant of the adipocytes contains the positive and negative control factors of the activation and activation of the adipocytes.また membrane small cell にはマトリクスプロテアーゼが小なからず有まれることも与せて见出し,従来The existence of the small cell body・ゴルジ経 is proved by the とはdifferent membrane small cell 経 is secreted by the でのすることを. The above result is a paper, and it is currently being submitted.