Identification of Molecular Mechanisms of Estrogen-Regulated Brain Sex Differentiation

雌激素调节大脑性别分化的分子机制的鉴定

基本信息

批准号：
16086210
负责人：
SAKUMA Yasuo
金额：
$ 76.8万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究計画は、生殖内分泌調節や行動パターンに見られる性差の神経学的基盤となっている脳の性分化に関わる分子メカニズムの解明を目的として実施した。ラットの脳は周産期におけるエストロゲンの作用で雄型化するので、この時期にエストロゲンにより制御される遺伝子の同定、転写・翻訳ならびにその結果生じる脳機能の表現型である伝達物質、受容体、トランスポータ分子、チャネルを、分子生物学・電気生理学・行動学的手法を用いて研究を進めた。MCF-7細胞におけるエストロゲン反応性を指標に作成したfocused cDNA microarrayを使用して、雌が多数の細胞を擁する前腹側室周核と雄が多数の細胞を擁する内側視索前夜の性的二型核のそれぞれで、出生直後からの脳の性分化の起こる時期に賦活・抑制される遺伝子をスクリーニングし、選択的細胞死と細胞移動に関わる遺伝子群がエストロゲンに反応すること、さらにreal time PCR、ウエスタンブロットによるタンパク同定により、実際にこれらの機構により二つの部位の性差が成立することを解明した。ニューロンへのBrdU取り込みはエストロゲン感受性期には起こらないことから、エストロゲン依存性性分化に細胞新生が関与する可能性は考えにくいと結論した。

该研究项目的目的是阐明与大脑性别分化有关的分子机制，这是在生殖内分泌调节和行为模式中看到的性别差异的神经系统基础。由于大鼠大脑由于围产期期间雌激素的作用而成为雄性，因此使用分子生物学，电生理学和行为方法进行了研究，以鉴定雌激素调节的基因，转录和翻译，以及由此产生的脑功能，发射器，受体，转运器分子和通道的表型。 Using focused cDNA microarrays created using estrogen reactivity in MCF-7 cells as an index, we screened genes that are activated and suppressed in the period when sexual differentiation of the brain occurs immediately after birth in the anterior perventral nucleus with females having many cells and sexual dimorphisms on the medial preoptic eve of the eastern optic nucleus with females having many cells, and we elucidated that genes involved in选择性细胞死亡和细胞迁移对雌激素的反应，并使用实时PCR和Western印迹鉴定蛋白质鉴定，以揭示两个部位之间通过这些机制实际存在的两个位点之间的性别差异。由于在雌激素敏感阶段不会发生BRDU对神经元的摄取，因此得出的结论是，细胞新生成不太可能与雌激素依赖性分化有关。