新規Gene-Trap法による多段階の白血病発症に関わる遺伝子単離の試み

尝试使用新型基因陷阱方法分离参与多阶段白血病发展的基因

• 批准号: 18012032
• 负责人: 松村 到
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18012032/
• 关键词: チロシンキナーゼ; 白血病; Gene-Trap法

多段階の白血病発症機構を明らかにするために、特発性好酸球増加症/好酸球性白血病の原因遺伝子FIPIL1/PDGFRα及びその変異体を造血幹細胞、骨髄系共通前駆細胞、リンパ系共通前駆細胞、骨髄単球系前駆細胞、赤巨核球系前駆細胞などに導入し、これらの細胞の系統決定、増殖、生存、腫瘍化に及ぼす影響を検討した。その結果、FIPIL1/PDGFRαは、いずれの細胞に導入された場合もサイトカイン非依存性の増殖を可能にするが、造血幹細胞に導入された場合のみ永続的な細胞増殖を伴う腫瘍化をもたらし、前駆細胞レベルに導入した場合には腫瘍化をもたらさないことが明らかとなった。また、リンパ系共通前駆細胞、赤巨核球系前駆細胞などに導入した場合、好酸球系への系統転換が誘導された。FIPIL1/PDGFRaと協調して前駆細胞を不死化する遺伝子を単離するために、テトラサイクリン除去(Tet-off)により遺伝子発現を誘導するプロモーターとERM Tagのついたキメラ蛋白として遺伝子発現を起こさせるためのスプライスドナー(SD)の発現カセットが組み込まれたERMレトロベクターを用いて内因性の遺伝子の発現をランダムに誘導することのできる新規Gene-Trap法を用いた。ERMレトロベクターをFIPIL1/PDGFRα、変異型FLTなどの活性化チロシンキナーゼと同時に骨髄系共通前駆細胞に感染させ、サイトカイン非存在下で増殖する不死化した白血病クローンの樹立に成功した。また、同様の手法でAML1/MTG8とERMレトロベクターを感染させた骨髄系共通前駆細胞から白血病クローンの単離にも成功した。更に、これらの白血病クローンからGene-Trapベクターによって発現が誘導された遺伝子の単離を完了した。

To investigate the role of FIPIL1/PDGFR α, the causative gene of multi-stage leukemia, in hematopoietic stem cells, osteoblastic common progenitor cells, hematopoietic common progenitor cells, osteoblastic progenitor cells, erythroid megakaryocytic progenitor cells, and in the systemic determination, proliferation, survival, tumorigenesis, and development of these cells. The results showed that FIPIL1/PDGFR α could not be introduced into hematopoietic stem cells without independent proliferation, but could be introduced into hematopoietic stem cells without proliferation. In the case of introduction of common precursor cells, red megakaryocyte precursor cells, and system replacement of cytokinin FIPIL1/PDGFRa is a gene that can be used in cell culture. The new Gene-Trap method is used to detect the presence of ERM tag, ERM tag and ERM tag. ERM, FIPIL1/PDGFR α, FLT, and leukemia cells were successfully established in the presence of infection and infection in common progenitor cells. The same method was used to isolate AML 1/MTG 8 cells from leukemia cells. In addition, the gene-trap gene was detected in the leukemia patients.

项目成果

STAP-2 regulates c-Fms/M-CSF receptor signaling in murine macrophage Raw 264.7 cells

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.05.030
• 发表时间: 2007-07-06
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Ikeda, Osamu;Sekine, Yuichi;Matsuda, Tadashi
• 通讯作者: Matsuda, Tadashi

The scaffolding adapter Gab2, via Shp-2, regulates kit-evoked mast cell proliferation by activating the Rac/JNK pathway

• DOI: 10.1074/jbc.m603742200
• 发表时间: 2006-09-29
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Yu, Min;Luo, Jincai;Gu, Haihua
• 通讯作者: Gu, Haihua

Correlation between promoter hypermethylation of GSTP1 and response to chemotherapy in diffuse large B cell lymphoma

• DOI: 10.1007/s00277-007-0299-1
• 发表时间: 2007-08-01
• 期刊: ANNALS OF HEMATOLOGY
• 影响因子: 3.5
• 作者: Nakamichi, Itsuko;Tomita, Yasuhiko;Aozasa, Katsuyuki
• 通讯作者: Aozasa, Katsuyuki

The tetraspanin CD9 modulates epidermal growth factor receptor signaling in cancer cells

• DOI: 10.1002/jcp.21384
• 发表时间: 2008-07-01
• 期刊: JOURNAL OF CELLULAR PHYSIOLOGY
• 影响因子: 5.6
• 作者: Murayama, Yoko;Shinomura, Yasuhisa;Hayashi, Norio
• 通讯作者: Hayashi, Norio

Checkpoint-apoptosis uncoupling in human and mouse embryonic stem cells: a source of karyotypic instability

人和小鼠胚胎干细胞中的检查点凋亡解偶联：核型不稳定的根源

• 发表时间: 2007
• 期刊: Blood 109
• 作者: Mantel C;et. al.
• 通讯作者: et. al.