E2F1による細胞内ROSの蓄積及び癌抑制機構の解析

E2F1分析细胞内ROS积累及抑癌机制

• 批准号: 15023231
• 负责人: 松村 到
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15023231/
• 关键词: E2F1; ROS; NF-κB; アポトーシス; 細胞周期

細胞周期推進分子であるc-MycやE2F1を過剰発現させた線維芽細胞が、血清除去によるアポトーシスに高い感受性を示すように、一般に、細胞周期の進行はアポトーシス感受性を亢進させる。また、E2F1ノックアウト(E2F1^<-/->)マウスでは、生後早期に各種の悪性腫癌が発生した。これらの結果から、E2F1は細胞周期推進分子としてのみでなく、アポトーシス誘導分子、癌抑制遺伝子としても機能すると推測された。我々はE2F1が抗アポトーシス分子NF-κBの機能を阻害することを見出しているが、本研究では、E2F1によるアポトーシス制御の分子機構について更に検討し、以下の知見を得た。E2F1を過剰発現させた細胞では、1.細胞内にROSが蓄積し、血清除去、抗がん剤処理、放射線照射に対するアポトーシス感受性の亢進が認められた。このアポトーシス感受性の亢進はROSを消去すると回避された。2.恒常的なDNAダメージが検出された。3.JNK、p38MAPKなどが恒常的に活性化され、放射線照射によってこの活性化は増強され、コントロールの細胞より遷延化した。4.E2F1^<-/->の胎児線維芽細胞をv-Srcやv-Ablなどの癌遺伝子でtransformすると、野生型のMEFより各種のアポトーシス刺激に抵抗性を示した。5.NF-κBに対するSiRNAを導入しNF-κBを消去した細胞では、E2F1を導入してもアポトーシス感受性の亢進が認めちれなかった。この結果から、E2F1によるアポトーシス感受性の亢進にはNF-κBが関わると考えられた。これらの結果から、E2F1は細胞内にROSを蓄積させ、DNAダメージやJNK、p38MAPKの活性化を介して、細胞のアポトーシス感受性を亢進させると考えられた(論文投稿中)。

Cell cycle progression molecules c-Myc and E2F1 are present in cells, serum removal molecules, high sensitivity molecules, and general cell cycle progression molecules. E2F1 (E2F1^<-/->) is the most common form of cancer. These results suggest that E2F1 may function as a cell cycle promoter, a tumor inducer, and a cancer suppressor. In this study, we investigated the molecular mechanism of E2F1 to inhibit the function of NF-κB. E2F1 is detected in cells. 1. ROS accumulation in cells, serum removal, anti-drug treatment, radiation exposure, and sensitivity enhancement are recognized. The sensitivity of ROS is eliminated. 2. The usual DNA damage was detected. 3. JNK and p38MAPK are constantly activated, enhanced by radiation, and delayed in cell cycle. 4. E2F1 ^<-/-> fetal line cells v-Src, v-Abl, and cancer gene transformation, wild-type MEF, and resistance to various stimuli 5. NF-κB is introduced into the cells, NF-κB is eliminated, and E2F1 is introduced into the cells. E2F1 is sensitive to NF-κB. These results include: E2F1 cell ROS accumulation, DNA protein JNK, p38MAPK activation, and cellular protein sensitivity enhancement (in submission).

项目成果

Kataoka, Y. et al.: "Reciprocal Inhibition between MyoD and STAT3 in the Regulation of Growth and Differentiation of Myoblasts."J.Biol.Chem.. 278. 44178-44187 (2003)

Kataoka, Y. 等人：“MyoD 和 STAT3 在成肌细胞生长和分化调节中的相互抑制。”J.Biol.Chem.. 278. 44178-44187 (2003)

Shibayama, H. et al.: "Identification of a cytokine-induced antiapoptotic molecule Anamorsin essential for definitive hematopoiesis."J.Exp.Med.. 199. 581-592 (2004)

Shibayama, H. 等人：“确定细胞因子诱导的抗凋亡分子对最终造血至关重要的阿那莫辛。”J.Exp.Med.. 199. 581-592 (2004)

Okawa Y, et al.: "Purification of N-terminaJly truncated histone H2A-monoubiquitin conjugates from leukemic cell nuclei : probable proteolytic products of ubiquitinated H2A"Int.J.Biochem.Cell Biol.. 35. 1588-1600 (2003)

Okawa Y 等人：“从白血病细胞核中纯化 N 末端截短的组蛋白 H2A-单泛素缀合物：泛素化 H2A 的可能蛋白水解产物”Int.J.Biochem.Cell Biol.. 35. 1588-1600 (2003)

Takakuwa, T. et al.: "Establishment and characterization of unique cell lines derived from pyothorax-associated lymphoma which develops in long-standing pyothorax and is strongly associated with Epstein-Barr virus infection."Cancer Sci.. 94. 858-863 (2003

Takakuwa, T. 等人：“源自脓胸相关淋巴瘤的独特细胞系的建立和表征，该淋巴瘤在长期脓胸中发展，与 Epstein-Barr 病毒感染密切相关。”Cancer Sci.. 94. 858-863

Kimura S, et al.: "Enzymatic assay for determination of bicarbonate ion in plasma using urea amidolyase"Clin.Chim.Acta.. 328. 179-184 (2003)

Kimura S等人：“使用尿素酰胺裂解酶测定血浆中碳酸氢根离子的酶法测定”Clin.Chim.Acta.. 328. 179-184 (2003)