色素性乾皮症原因遺伝子産物によるゲノム損傷認識とその制御機構

着色性干皮病致病基因产物对基因组损伤的识别及其控制机制

• 批准号: 18012050
• 负责人: 菅澤 薫
• 金额: $ 7.04万
• 依托单位: Kobe University (2007)The Institute of Physical and Chemical Research (2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18012050/
• 关键词: ヌクレオチド除く去修復; 色素性乾皮症; DNA損傷認識; 突然変異; XPC; XPE; 皮膚癌; ヌクレオチド除去修復; DDB2

ヌクレオチド除去修復(NER)のDNA損傷認識に必須であるXPCタンパク質にGFPを融合したものを安定に発現するヒト細胞株を作成し、FRAP(fluorescence recovery after photobleaching)法によりXPCの細胞内動態の制御を詳細に解析した。その結果、細胞の紫外線照射に伴ってXPCのDNA損傷への結合を反映してmobilityが低下すること、またこのmobilityの低下が紫外線量の変化に対して二相性を示すことがわかった。DDB2の過剰発現、およびsiRNAを用いた発現抑制の結果から、比較的低線量で見られるXPCのmobility低下がUV-DDBに依存することが示された。これは、DNA結合活性を喪失したXP-C群患者由来の変異XPC(W690S)がUV-DDB依存的に紫外線損傷部位にリクルートされうることを示した昨年度の結果とあわせ、UV-DDB(XPE)とXPCが協調して紫外線損傷の効率的な認識・修復、さらには皮膚がんの抑制にあたっていることをin vivoで証明するものである。さらにNERの過程でXPCよりも後の段階で働く因子について同様にFRAPによる解析を行ったところ、XPAが修復複合体に取り込まれる以前の段階で従来知られていなかったNERの制御機構が存在することが強く示唆された。この他、いくつかのXP-C群細胞株についてXPC遺伝子の変異をゲノムレベルで同定した。特に日本国内の患者について、欧米では報告されていない新たなタイプの変異が見出された。一方、DDB2については従来知られていたユビキチン化に加えて新たな翻訳後修飾の存在を示す結果が得られた。現在、この修飾部位の同定、および変異体の作成を進めている。

To understand DNA damage, XPC must be purified, GFP fused, and stable. The FRAP(fluorescence recovery after photolaching) method is used to analyze the intracellular dynamics of XPC. As a result, UV irradiation of cells is associated with DNA damage and binding, resulting in decreased mobility, decreased UV radiation and biphasic behavior. DDB2 over-expression, inhibition of expression by siRNA, and lower levels of XPC mobility are shown to be UV-DDB dependent. The results of last year'S study show that UV-DDB(XPE) and XPC have coordinated the recognition, repair and inhibition of UV damage in patients with XP-C group. XPC and XPA repair complexes are located in the next stage of the repair process, and the control mechanism exists in the next stage of the repair process. XP-C cell lines are different from each other. In particular, patients in Japan have been reported to be new and different. A party, DDB2, is not aware of the existence of the new modification. Now, the modification parts of the same,

项目成果

Sensing of DNA damage by XPC/Rad4: one protein for many lesions.

XPC/Rad4 检测 DNA 损伤：一种蛋白质可检测多种病变。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nat. Struct. Mol. Biol. 14
• 作者: Sugasawa;K;and Hanaoka;F.
• 通讯作者: F.

Molecular mechanism of nucleotide excision repair as a defense against cancer.

核苷酸切除修复防御癌症的分子机制。

• 发表时间: 2007
• 作者: Sugasawa;K.
• 通讯作者: K.

紫外線による遺伝子損傷の修復メカニズム

紫外线引起的基因损伤的修复机制

• 发表时间: 2006
• 期刊: 生化学 78
• 作者: 菅澤 薫;花岡文雄
• 通讯作者: 花岡文雄

In Vivo Destabilization and Functional Defects of the Xeroderma Pigmentosum C Protein Caused by a Pathogenic Missense Mutation

• DOI: 10.1128/mcb.02166-06
• 发表时间: 2007-08
• 期刊: Molecular and Cellular Biology
• 影响因子: 5.3
• 作者: Gentaro Yasuda;Ryotaro Nishi;Eriko Watanabe;Toshio Mori;S. Iwai;D. Orioli;M. Stefanini;F. Hanaoka;K. Sugasawa

The DNA repair-ubiquitin-associated HR23 proteins are constituents of neuronal inclusions in specific neurodegenerative disorders without hampering DNA repair

• DOI: 10.1016/j.nbd.2006.06.005
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: NEUROBIOLOGY OF DISEASE
• 影响因子: 6.1
• 作者: Bergink, Steven;Severijnen, Lies-Anne;Willemsen, Rob
• 通讯作者: Willemsen, Rob