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Pirh2ユビキチンリガーゼによる膜輸送制御

Pirh2 泛素连接酶控制膜运输

基本信息

批准号：
18050002
负责人：
畠山鎮次
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18050002/
关键词：
ユビキチンプロテアソーム膜輸送 Pirh2 ユビキチンリガーゼ

项目摘要

研究成果報告書多くの細胞質・核質に存在するタンパク質の分解にユビキチン・プロテアソーム系が関与している。そして、標的タンパク質のユビキチン化に必要な酵素群の中で、特にユビキチンリガーゼE3は標的タンパク質を認識し、最終的にユビキチンを付加する重要な酵素サブユニットである。最近になり、ユビキチン化タンパク質修飾が分解のためのシグナルだけではなく膜輸送(メンブラントラフィック)に重要な機能を有することが報告されている。申請者はPirh2(p53をユビキチン化するE3)が、細胞内膜輸送に関与するε-COPと相互作用することを見出しており、本申請課題においては、Pirh2による細胞内膜輸送関連タンパク質のユビキチン化の機能を解明することを目的とする。in vivo結合実験を行なったところ、PIRH2とε-COPの共沈が認められた。さらにPIRH2がε-COPをユビキチン化するかを確認するためにin vitroユビキチン化アッセイを行なったところ、PIRH2を添加時にのみ、ε-COPのポリユビキチン化が認められた。さらに細胞内でε-COPのユビキチン化が起こっているかを確認するためにin vivoユビキチン化アッセイを行なったところ、PIRH2の共発現によりε-COPのユビキチン化の増強が認められた。これらの結果により、PIRH2の過剰発現がε-COPのユビキチン化を引き起こすことが判明した。さらに、in vivoでのε-COPの分解においてPIRH2がいかに作用するかを調べるためパルスチェイス法を行ったところ、野生型のPIRH2はε-COPの分解を亢進し、逆に変異型のPIRH2はε-COPの分解を遅延させることが明らかとなった。これらの結果は、PIRH2が細胞内のε-COPの安定性に関与していることを示している。

The report of the research results shows that there are some problems in the analysis of the results of the research, that is, the analysis of the results of the research. In order to change the necessary enzymes in the group of enzymes, the most important enzymes in the group of enzymes, E3, E3 and E3. Recently, you have been able to improve the performance of the information system. You have been able to improve the performance of the equipment. The applicant, Pirh2 (p53), the interaction between intracellular membrane transport and ε-COP, this application, the intracellular membrane transport, the intracellular membrane, the In vivo and Pirh _ 2 ε-COP were co-precipitated and confirmed by co-precipitation. Please confirm that the PIRH2