外来薬物による遺伝子発現誘導における転写因子複合体の機能解析
转录因子复合物在外源药物诱导基因表达中的功能分析
基本信息
- 批准号:18055001
- 负责人:
- 金额:$ 4.42万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
蛍光の寿命の変化を測定するシステムとして、ピコ秒パルスレーザー・蛍光顕微鏡・時間空間相関単一光子計数検出器・時間電圧変換器を組み合わせたFLIM-FRET測定システムの開発を進めた。従来の蛍光強度の変化を測定する方法と比較すると、蛍光寿命の変化を測定することにより他の分子からの蛍光による影響を排除することができ、さらにFRETによる蛍光寿命の変化が蛍光分子間の距離に依存することから、生体分子の構造変化や相互作用の変化を測定できる利点がある。このFHM-FRET測定システムを用いた解析対象として、外来薬物3-Methylcholanthrene(3-MC)をリガンドとする薬物受容体AhRとそのパートナー因子Arntによる標的遺伝子の活性化機構の解析を行った。特にArntの核内における局在と二量体形成との関連についてこのシステムによる解析を行い、核内スペックルにおいてホモ二量体を形成しているがその他の核内領域ではホモ二量体は形成されていないことを見いだした。さらにレポーターとしてmRFPを用いることにより単一生細胞におけるレポーターの活性を測定する系を構築した。Arntの核内局在は核一様に存在している場合とスペックルを形成している場合がある。そこでArntの核内局在とレポーターの活性との相関関係を測定したところ、スペックル形成と共に転写活性を有する細胞の分布が増加していることが示された。したがってArntの核内スペックルにおけるホモ二量体形成がレポーターの転写活性化に重要であることが示された。このシステムでは細胞の「集団」を用いた実験では明らかになりにくい転写因子の機能を単一生細胞で観察することにより明らかにすることができた。
The measurement of the lifetime of the laser beam is carried out in a combination of a photon counting detector and a time voltage converter. The method of measuring the fluorescence intensity in the future is compared with that of measuring the fluorescence lifetime. The influence of other molecules on the fluorescence lifetime is excluded. The variation of fluorescence lifetime depends on the distance between fluorescence molecules. The variation of structure and interaction of biological molecules is also determined. The FHM-FRET assay was used to analyze the activation mechanism of the target molecule in the presence of the foreign compound 3-Methylcholanthrene(3-MC). In particular, in the nuclear domain of Arnt, the formation of two quantities and the correlation between them are analyzed. In the nuclear domain, the formation of two quantities and the correlation between them are analyzed. The first step is to establish a system for measuring the activity of the cells. Arnt's nuclear internal affairs exist in the case of nuclear The correlation between the activity of Arnt and the formation of Arnt increased. It is important for the formation and activation of two molecules in the nucleus of Arnt. The cell's "cluster" is used to detect the cell's function.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Intracellular composition of fatty acid affects the processing and function of tyrosinase through the ubiquitin-proteasome pathway
- DOI:10.1042/bj20051419
- 发表时间:2006-02-15
- 期刊:
- 影响因子:4.1
- 作者:Ando, H;Wen, ZM;Hearing, VJ
- 通讯作者:Hearing, VJ
The effects of dickkopf1 (DKK1) on gene expression and Wnt signaling by melanocytes: mechanisms underlying its suppression of melanocyte function and proliferation.
dickkopf1 (DKK1) 对黑素细胞基因表达和 Wnt 信号传导的影响:其抑制黑素细胞功能和增殖的机制。
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Yamaguchi;Y.
- 通讯作者:Y.
The effects of dickkopf 1 on gene expression and Wnt signaling by melanocytes: Mechanisms underlying its suppression of melanocyte function and proliferation
- DOI:10.1038/sj.jid.5700629
- 发表时间:2007-05-01
- 期刊:
- 影响因子:6.5
- 作者:Yamaguchi, Yuji;Passeron, Thierry;Hearing, Vincent J.
- 通讯作者:Hearing, Vincent J.
Identification of amino acid residues in the Ah receptor involved in ligand binding
- DOI:10.1016/j.bbrc.2006.12.227
- 发表时间:2007-03-09
- 期刊:
- 影响因子:3.1
- 作者:Goryo, Kenji;Suzuki, Ai;Sogawa, Kazuhiro
- 通讯作者:Sogawa, Kazuhiro
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安元 研一其他文献
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07770076 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 4.42万 - 项目类别:
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06770077 - 财政年份:1994
- 资助金额:
$ 4.42万 - 项目类别:
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肝癌患者中白蛋白减少与游离形式治疗药物乐伐替尼的药代动力学和药物反应的关系
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22K06732 - 财政年份:2022
- 资助金额:
$ 4.42万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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13204052 - 财政年份:2001
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$ 4.42万 - 项目类别:
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- 资助金额:
$ 4.42万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Co-operative Research (B)