权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

自己免疫疾患の病態に関わる胸腺ニッチ構築シグナルの解明

阐明与自身免疫性疾病病理相关的胸腺生态位构建信号

基本信息

批准号：
18060030
负责人：
松本満
金额：
$ 3.07万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

AIRE遺伝子の発現制御下に蛍光分子マーカーGFPを発現するAIRE/GFPノツクインマウス(AIRE/GFP-KI)を作製した。その結果予測通り、AIRE/GFP-KI胸腺の組織切片を抗GFP抗体と抗AIRE抗体によって二重染色したところ、ほとんど全てのGFP陽性細胞はAIRE陽性であった。興味深いことに、AIRE遺伝子をホモで欠損する個体(gfp/gfp)の胸腺でもGFP陽性細胞が同程度に認められ、このことからAIRE自体はAIREを発現する胸腺髄質上皮細胞(mTEC)の系列決定に関与しないことが明らかになった。次いで、AIRE/GFP-KI (+/gfp)およびAIRE/GFP-KI (gfp/gfp)のAIRE発現細胞およびAIRE非発現細胞の各分画をソーティングし、insulin 2およびCRP即の発現をreal-time PCRを用いて解析した。その結果、AIRE-dependent TSA geneであるinsulin2の発現はもっぱらAIRE発現細胞から正常AIRE蛋白質の存在に依存して認められるのに対し、AIRE-independent TSA geneであるCRPの発現はAIRE発現細胞とAIRE非発現細胞の両方から、正常AIRE蛋白質の有無に関わらず検出された。AIREは終末分化段階にあるmTECで発現しているという最近の報告とも併せ、mTECにおけるTSA発現機構として、terminal differentiation model を支持する結果であった。他方、免疫祖織染色からはAIRE/GFP-KI (gfp/gfp)のAIRE発現細胞は形態変化と分布異常を認めたことから、AIREがmTECの細胞構築化に対しても重要なはたらきを持つことが明らかになった。

AIRE/GFP (AIRE/GFP-KI) is a new type of fluorescent molecule. The results of this study were as follows: 1. Anti-GFP antibody and anti-AIRE antibody were detected in tissue sections of thymus, and 2. All GFP-positive cells were detected in tissue sections of thymus. GFP-positive cells in thymus of individuals (gfp/gfp) who are deficient in AIRE gene expression are identified to the same extent as thymic stromal epithelial cells (mTEC) in which AIRE gene expression occurs. The analysis of AIRE/GFP-KI (+/gfp), AIRE/GFP-KI (gfp/gfp) and AIRE/GFP-KI (gfp/gfp) was performed by real-time PCR. As a result, the discovery of the AIRE-dependent TSA gene insulin2 is related to the dependence of AIRE discovery cells on the existence of normal AIRE protein, and the discovery of the AIRE-independent TSA gene CRP is related to the existence of normal AIRE protein in AIRE discovery cells and AIRE non-discovery cells. AIRE is a terminal differentiation model supported by mTEC's most recent report, TSA's development agency, and terminal differentiation model. Other, immune tissue staining of AIRE/GFP-KI (gfp/gfp) and AIRE found abnormal cell morphology and distribution, AIRE and mTEC cell architecture are important.