自己抗原のプロセッシング障害による自己寛容破綻病態の解明

阐明由于自身抗原加工障碍导致的自我耐受破坏的病理学

• 批准号: 17047028
• 负责人: 松本 満
• 金额: $ 5.95万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17047028/
• 关键词: 自己免疫疾患; AIRE; 胸腺上皮細胞; MHC; プロテオミクス; ノックアウトマウス

胸腺上皮細胞によって提示される自己抗原には、1)class Iに提示される細胞内の内在性自己抗原と、2)循環血流に乗って胸腺に入り、胸腺上皮細胞によって細胞内に取り込まれた後、ペプチドへのプロセッシングを経てclass IIと結合した形で細胞表面に提示される自己抗原の2種類が存在する。本研究では、AIRE欠損(あるいは変異)にともなう胸腺上皮細胞上に提示される自己抗原の質的な変化をclass I、class II経路の両者について検討する。すなわち、class II経路については、野生型および疾患変異体(E3 ligase欠損変異)のAIRE遺伝子を導入した胸腺上皮細胞株からclass II結合ペプチドを溶出し、プロテオミクスの手法を用いて、そのプロファイリングを作成・比較し、AIREによる自己抗原ペプチド創出機構の存在を明らかにすべく、細胞の大量培養と抗class II抗体を用いた免疫沈降実験を開始している。他方、class I経路を介した内在性自己抗原の表出に対するAIREの効果については、WT1(Wilms' tumor)を自己抗原として細胞表面に表出するヒト肺癌細胞株(LK79:HLA-A24陽性)を用いるべく、準備を進めている。すなわち、野生型および疾患変異体AIREを発現するLK79細胞株を樹立し、AIRE依存的な細胞表面でのWT1発現状態をHLA-A24拘束性WT1特異的CD8陽性T細胞株への反応性によって評価する。さらに、これらの細胞株について、AIREに依存した自己抗原表出変化のメカニズムを細胞膜分画の2次元電気泳動(differential analysis)によって明らかにすべく、泳動条件の検討を開始している。以上の研究の進展により、AIRE依存性に胸腺上皮細胞上で変動する蛋白が同定できれば、自己免疫疾患発症機構の解明に有力な手がかりとなるのみならず、自己寛容の成立機構の本態に迫ることができる。

Thymic epithelial cells に よ っ て prompt さ れ る their antigen に は, 1) class I に prompt さ れ の る cell antigen と internality myself, 2) circulation flow に 乗 っ て in thymus に り and thymic epithelial cell に よ っ て in cells take り に 込 ま れ た, ペ プ チ ド へ の プ ロ セ ッ シ ン グ を 経 て class IIと binding to the surface of で た shaped で cells に suggests the presence of される self-antigen patch 2 types が in する. This study で は, AIRE owe damage (あ る い は variations) に と も な う に tips on thymic epithelial cells さ れ る their antigen の qualitative な variations change を class I and class II 経 road の struck the に つ い て beg す 検 る. Youdaoplaceholder0, class II route に すなわち て て て た, wild-type および disease variant (E3 ligase underdamaged variant) <s:1> AIRE progeny 伝 を were introduced into the <s:1> た thymic epithelial cell line ら らclass II combined with ペ プ チ ド を stripping し, プ ロ テ オ ミ ク ス の gimmick を with い て, そ の プ ロ フ ァ イ リ ン グ を made comparative し, AIRE に よ る their antigen ペ プ チ ド makes body の exist を Ming ら か に す べ く, cell の mass culture と resistance class II antibodies を with い た immune sink be 験 を began し て い る. Fang, class I road 経 を interface し た internality antigen の tables themselves out に す seaborne る AIRE の unseen fruit に つ い て は, WT1 (Wilms' tumor) を their antigen と し て cell surface に table out す る ヒ ト lung cancer cell line (LK79: HLA - positive A24) を い る べ く, preparing を into め て い る. す な わ ち, wild type お よ び disorders - variant AIRE を 発 now す る LK79 cell lines を し, AIRE dependent な cell surface で の WT1 発 now state を HLA - A24 at WT1 positive specific CD8 T cell lines へ の anti 応 sex に よ っ て review 価 す る. さ ら に, こ れ ら の cell lines に つ い て, AIRE に dependent し た antigen tables themselves out - the の メ カ ニ ズ ム を membrane points draw の 2 yuan electric 気 swimming (differential analysis) に よ っ て Ming ら か に す べ く, swimming condition の を 検 please start し て い る. Above research progress の の に よ り, AIRE dependence on で に thymic epithelial cells - move す る protein が with fixed で き れ ば, their immune disorders 発 institutions の interpret に な strong hand が か り と な る の み な ら ず, oneself understanding の established institutions の forced the state に る こ と が で き る.

项目成果

Medullary thymic epithelial cells expressing Aire represent a unique lineage derived from claudin-expressing cells.

表达 Aire 的胸腺髓质上皮细胞代表了源自表达密蛋白的细胞的独特谱系。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nature Immunology (in press)
• 作者: Hamazaki;Y.;et al.
• 通讯作者: et al.

IκB kinase α is critical for Toll-like receptor-7- and 9-induced interferon-α production.

IκB 激酶 α 对于 Toll 样受体 7 和 9 诱导的干扰素 α 产生至关重要。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Nature (印刷中)
• 作者: Shimizu;K.;et al.;K.Hoshino
• 通讯作者: K.Hoshino

Alteration of intra-pancreatic target-organ specificity by abrogation of Aire in NOD mice

• DOI: 10.1172/jci26971
• 发表时间: 2006-05-01
• 期刊: JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION
• 影响因子: 15.9
• 作者: Niki, S;Oshikawa, K;Matsumoto, M
• 通讯作者: Matsumoto, M

Essential role of IκB kinase α in thymic organogenesis required for the establishment of self-tolerance

• DOI: 10.4049/jimmunol.176.7.3995
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Kinoshita, Dan;Hirota, Fumiko;Matsumoto, Mitsuru
• 通讯作者: Matsumoto, Mitsuru

Essential role of IκB kinase (IKK) α in thymic organogenesis required for the establishment of self-tolerance.

IκB 激酶 (IKK) α 在建立自我耐受所需的胸腺器官发生中的重要作用。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Immunology (in press)
• 作者: Kinoshita D;et al.
• 通讯作者: et al.