エピトープ組み込みウイルス様中空粒子をベクターとした経口DNAワクチンの開発

以表位整合的病毒样空心颗粒为载体开发口服DNA疫苗

• 批准号: 15019044
• 负责人: 保富 康宏
• 金额: $ 3.26万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019044/
• 关键词: VLP; 経口ワクチン; 粘膜免疫; CTL; HEV; HIV

我々は経口感染を示すE型肝炎ウイルス(HEV)のウイルス様中空粒子(VLP)表面に異種ウイルスエピトープを発現できることを報告し、更にそのエピトープに対し経口投与で粘膜および全身に特異的免疫反応が誘導されることを報告した。またVLPがCaイオン依存的に粒子を構成していることを利用してVLP溶液内のCaイオンをキレートしVLPの分子間を広げDNAワクチンを封入した。これを用いると細胞内にDNAを導入可能であることがin vivo、in vitroで確認され、経口投与でDNAワクチンによる特異的免疫反応も粘膜および全身に誘導されることを報告した。本研究ではこの2つの利点を生かし、エピトープ表出VLPにDNAワクチンを封入し、エピトープに対する免疫反応と封入されたDNAワクチンにより誘導された免疫反応を同時に誘導する多機能的経口ワクチンの開発の基礎的研究を行った。用いられた対象は粘膜免疫の誘導が重要であるヒトエイズウイルス(HIV)とし、表出するエピトープはHIVenv、封入するDNAワクチンはHIVgagとした。このHIVgag DNAワクチン封入HIVenv表出VLPをマウスに経口投与したところ、HIVenv,gag特異的IgGが血清中に、特異的IgAが糞便中に検出された。更にHIVenv,gag特異的細胞傷害性Tリンパ球(CTL)が脾臓、腸間膜リンパ節、パイエル板において誘導された。またこれら免疫反応がin vivoにおいてもHIV特異的にウイルスを抑制することが認められた。以上のように本研究で用いた手法により多種類の抗原に対する免疫反応が経口投与により粘膜および全身に液性、細胞性免疫が誘導されることが示された。

We report the development of hepatitis E virus (HEV) surface xenograft on the surface of hollow particles (VLP), especially on oral administration and induction of mucosal and systemic specific immune responses. The composition of Ca ~(2 +)-dependent particles in VLP solution was investigated. The introduction of DNA into the cells is reported in vivo and in vitro. This study is aimed at the development of a multifunctional immune system based on DNA encapsulation, induction and simultaneous induction of immune responses. It's important to use the virus to induce HIV infection. The HIV gag DNA is encapsulated in HIV env and VLP is detected in serum and IgA is detected in feces. In addition, HIV env,gag specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) is induced in spleen, intestinal membrane and intestinal membrane. The immune response is in vivo and HIV specific. In this study, we used a variety of methods to induce immune responses, such as oral administration, mucosal administration, and systemic, cellular immunity.

项目成果

Hayashi, T., Yasutomi, Y., et al.: "Interleukin-4-expressing plasmid inhibits reovirus type-2-triggered autoimmune insulitis in DBA/1J suckling mice"Int.J.Exp.Path.. 84. 101-106 (2003)

Hayashi, T.、Yasutomi, Y. 等人：“表达白细胞介素 4 的质粒抑制 DBA/1J 乳鼠中呼肠孤病毒 2 型引发的自身免疫性胰岛素炎”Int.J.Exp.Path.. 84. 101-

Uno-Furuta, S., Matsuo, K., et al.: "Immunization with recombinant bacillus Calmette-Guerin (BCG)-hepatitis C virus (HCV) elicits HCV-specific cytotoxic T lymphocytes in mice."Vaccine. 21. 3149-3156 (2003)

Uno-Furuta, S.、Matsuo, K. 等人：“用重组卡介苗 (BCG)-丙型肝炎病毒 (HCV) 进行免疫可在小鼠体内引发 HCV 特异性细胞毒性 T 淋巴细胞。”疫苗。

Nishikubo, K., Murata, Y., et al.: "A single administration of interleukin-4 antagonistic mutant DNA inhibits allergic airway inflammation in a model of asthma"Gene Ther.. 10. 2119-2125 (2003)

Nishikubo, K.、Murata, Y. 等人：“单次施用白细胞介素 4 拮抗突变体 DNA 可抑制哮喘模型中的过敏性气道炎症”Gene Ther.. 10. 2119-2125 (2003)

Takamura, S., Niikura, M., et al.: "DNA vaccine-encapsulated virus-like particles derived from an orally transmissible virus stimulates mucosal and systemic immune responses by oral administration"Gene Ther.. (印刷中). (2004)

Takamura，S.，Niikura，M.，等人：“源自口服传播病毒的 DNA 疫苗封装的病毒样颗粒通过口服刺激粘膜和全身免疫反应”Gene Ther（2004 年出版）。