白血病細胞のdormancy誘導におけるFKHRL1転写因子の役割

FKHRL1转录因子在白血病细胞休眠诱导中的作用

• 批准号: 15024257
• 负责人: 小松 則夫
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15024257/
• 关键词: FKHRL1; dormancy; 薬剤耐性; siRNA; STI571

我々はこれまでにFKHRL1がエリスロポエチンやトロンボポエチンなどのサイトカイン刺激によってリン酸化され、核から細胞質へ移行し、転写活性化能を失うこと(Blood 96:941,2000;JBC 276:15082,2001)、核内移行型(活性型) FKHRL1cDNA導入によって細胞回転がG0/G1期で停止し、in vitroの系において正常血液幹細胞の増殖・分化を著しく阻害することを明らかにした。さらに慢性骨髄性白血病(CML)由来の細胞株ではFKHRL1が恒常的にリン酸化されており、BCR-ABLチロシンキナーゼ特異的インヒビターであるSTI571処理によってリン酸化が減弱することから、CML細胞ではFKHRL1は不活性型として細胞質内に存在し、STI571によるBCR-ABLチロシンキナーゼ抑制によって核内に移行し、転写因子としての機能を発揮することが推測された。内因性にbcr-ablを発現しているCML由来の白血病細胞株KCL22に活性型FKHRL1-エストロゲン受容体融合遺伝子(FKHRL1-ER)を遺伝子導入し、TAM誘導システムを樹立した(JBC 278:6411,2003)。TAM添加によって核内にFKHRL1を強制発現させたところ、3日目には細胞のほとんどがアポトーシスによって死滅した。このことはFKHRL1を分子標的にした新たな治療法へと発展できる可能性を示唆している。そこで、FKHRL1-ERトランスフェクタントおよびベクターのみを導入されたコントロール細胞株をヌードマウスの皮下に接種し、腫瘍形成後にTAMを投与した。トランスフェクタントではTAM投与群でday2〜day7の腫瘍体積に有意な差(p<0.05)があることがわかった。一方、親株ではタモキシフェン投与による腫瘍の縮小効果は認めなかった。さらに優位抑制型FKHRL1遺伝子導入細胞株およびベクターのみを導入されたコントロール細胞株をヌードマウスの皮下に接種し、腫瘍形成能を検討した。優位抑制型FKHRL1遺伝子導入細胞株では親株に比して、腫瘍形成能の著しい低下を認めた。これらの実験結果はFKHRL1を分子標的とした白血病の新たな治療法開発へと展開できることを示唆している。

In response, FKHRL1 cDNA was introduced into cells at G0/G1 phase, and growth and differentiation of normal blood stem cells in vitro were inhibited. Cell lines derived from Chronic Osteopathic Leukemia (CML) are characterized by FKHRL1 constant acidification, BCR-ABL cytokinesis and BCR-ABL cytokinesis. CML cells are characterized by FKHRL1 inactive cytokinesis, BCR-ABL cytokinesis and BCR-ABL cytokinesis. The function of the writing factor is to predict whether or not The expression of endogenous bcr-abl in leukemia cell line KCL22 derived from CML was investigated by introducing an active-type FKHRL1-receptor fusion gene (FKHRL1-ER) and establishing a TAM induction gene (JBC 278:6411, 2003). TAM added FKHRL1 to the nucleus to induce apoptosis. The possibility of developing new therapeutic methods for FKHRL1 molecular targets is demonstrated. FKHRL1-ER is introduced into the cells and inoculated subcutaneously. TAM is administered after tumor formation. There was a significant difference in tumor volume between TAM and group (p<0.05). A party, a parent, a child, a In addition, the expression of FKHRL1 gene was investigated by subcutaneous inoculation of FKHRL1 gene into FKHRL1 cells. The expression of FKHRL1 gene was significantly lower than that of its parent strain. FKHRL1 is a molecular marker for leukemia and a new therapeutic method for leukemia.

项目成果

Itoh, A: "Thrombopoietin upregulates nucleolin mRNA and protein in thrombopoietin-dependent megakaryocytic cell line, UT-7/TPO."Mol Cell Biochem. 247(1-2). 75-82 (2003)

Itoh, A：“血小板生成素上调血小板生成素依赖性巨核细胞系 UT-7/TPO 中的核仁素 mRNA 和蛋白质。”Mol Cell Biochem。

Ito, T: "A soluble CAR-SCF fusion protein improves adenoviral vector mediated gene transfer to c-Kit-positive hematopoietic cells."J Gene Medicine. 5. 929-940 (2003)

Ito, T：“可溶性 CAR-SCF 融合蛋白改善了腺病毒载体介导的基因向 c-Kit 阳性造血细胞的转移。”J Gene Medicine。

Uchida, M: "EPO overcomes STI571-induced apoptosis and induces erythroid differentiation in TF-1/bcr-abl cells."Stem Cells. (in press).

Uchida, M：“EPO 克服了 STI571 诱导的细胞凋亡并诱导 TF-1/bcr-abl 细胞中的红系分化。”干细胞。

Nagai, T: "Oxidative stress is involved in hydroxyurea-induced erythroid differentiation."Br J Haematol. 121(4). 657-661 (2003)

Nagai, T：“氧化应激参与羟基脲诱导的红细胞分化。”Br J Haematol。

Tarumoto, T: "Ascorbic acid restores sensitivitiy to imatinib via suppression of Nrf2- dependent gene expression in the imatinib-resistant cell line."Exp.Hematol. (in press).

Tarumoto, T：“抗坏血酸通过抑制伊马替尼耐药细胞系中的 Nrf2 依赖性基因表达来恢复对伊马替尼的敏感性。”Exp.Hematol。