新しい概念「テロメアノット」形成に基づいたテロメラーゼ阻害剤の開発

基于“端粒结”形成新概念开发端粒酶抑制剂

• 批准号: 15025234
• 负责人: 中谷 和彦
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025234/
• 关键词: テロメア; テロメラーゼ; テロメアノット; コールドスプレーイオン化

癌細胞で活性化されているテロメラーゼは、遺伝子の複製により短くなるテロメア領域を伸長する酵素であり、テロメア配列(ヒトではd(TTAGGG))に相補的なRNA配列r(CCCTAA)をもつリボヌコレオプロテインである。テロメアが短くなるとアポトーシスにより細胞か死滅するため、テロメラーゼ阻害による癌細胞選択的な治療効果が期待されている。従来のテロメラーゼ伸長阻害を目指して開発されてきた分子は、そのすべてがテロメアの一本鎖領域が形成すると考えられている「グアニン四重鎖」を安定化しようとする発想に基づいているが、ヒトテロメア一本鎖領域がグアニン四重鎖を核内で形成していることを示す確たる証拠はいまだ得られていない。G-Gミスマッチ認識分子「ナフチリジンダイマー」とヒトテロメア配列5'-TTAGG-3'との結合を、コールドスプレーイオン化質量分析法を用いて詳細に解析した。その結果、TTAGGG一単位にナフチリジンダイマー1分子が結合していることを明らかにし、TTAGGGの繰り返し配列がヘアピン構造を形成し、そこに生じたG-Gミスマッチにナフチリジンダイマーが結合した「テロメアノット」構造を形成することが支持された。この結果に基づいて、新たなテロメア結合物質「ナフチリジンテトラマー」を分子設計し、ナフチリジンダイマーをリンカーで結合することにより合成した。コールドスプレーイオン化質量分析法を用いたナフチリジンテトラマーとヒトテロメア配列の結合解析から、TTAGGG2単位につきナフチリジンテトラマー1分子が結合していることが示された。また、ヘアピン構造のナフチリジンテトラマーによる安定化をUV-融解曲線から求めたところ、連続するG-Gミスマッチにナフチリジンテトラマーが結合していることが確認された。ナフチリジンテトラマーを用いてヒトテロメア配列の伸長阻害をTRAPアッセイにより評価したところ、ナフチリジンダイマーに比べてより低濃度でテロメラーゼによるテロメア配列の伸長を阻害することが明らかとなった。

Cancer cells are activated by enzymes that complement RNA sequences (CCCTAA), such as DNA replication, DNA sequencing, and DNA sequencing. The results of cancer cell selection and treatment are expected to be in the future. In the future, the development of molecular resistance is indicated by the formation of a four-fold lock domain in the molecule, and the formation of a four-fold lock domain in the molecule is confirmed by the formation of a four-fold lock domain in the molecule. G-G recognition molecule " As a result, the TTAGGG single position molecule is combined with the TTAGGG single position molecule, and the TTAGGG single position molecule is combined with the TTAGGG single position molecule. The result is that the molecular design and synthesis of the new binding substance "" TTAGGG2 unit analysis method for molecular binding analysis The UV-melting curve of the structure of the crystal is determined by the temperature of the crystal. For example, if the concentration of a substance is lower than that of a substance, the concentration of a substance is lower than that of a substance.

项目成果

中谷和彦ほか: "Highly Sensitive Detection of GG Mismatched DNA by Surfaces Immobilized Naphthyridine Dimer through Poly(ethylene oxide) Linkers"Bioorg.Med.Chem.Lett.. 14. 1105-1108 (2004)

Kazuhiko Nakatani 等人：“通过聚（环氧乙烷）连接器通过表面固定的萘啶二聚体高度灵敏地检测 GG 错配 DNA”Bioorg.Med.Chem.Lett.. 14. 1105-1108 (2004)

中谷和彦ほか: "Affinity Labeling of a Single Guanine Bulge"J.Am.Chem.Soc.. 125. 8972-8973 (2003)

Kazuhiko Nakatani 等人：“单个鸟嘌呤凸起的亲和标记”J.Am.Chem.Soc.. 125. 8972-8973 (2003)

中谷和彦ほか: "Induction of a Remarkable Conformational Change in a Human Telomeric Sequence by the Binding of Naphthyridine Dimer : Inhibition of the Elongation of a Telomeric Repeat by Telomerase"J.Am.Chem.Soc.. 125. 662-666 (2003)

Kazuhiko Nakatani 等人：“通过萘啶二聚体的结合诱导人类端粒序列发生显着的构象变化：端粒酶抑制端粒重复的延长” J.Am.Chem.Soc.. 125. 662-666 (2003)

中谷和彦ほか: "Formation and Destruction of the Guanine Quartet in solution Observed by Cold-Spray Ionization Mass Spectrometry"Chem.Commun. None. 788-789 (2003)

Kazuhiko Nakatani 等人：“通过冷喷雾电离质谱法观察溶液中鸟嘌呤四联体的形成和破坏”Chem.Commun. 788-789 (2003)。

中谷和彦ほか: "The SPR Sensor Detecting The Cytosine-Cytosine Mismatches"J.Am.Chem.Soc.. 126. 557-562 (2004)

Kazuhiko Nakatani 等人：“SPR 传感器检测胞嘧啶-胞嘧啶不匹配” J.Am.Chem.Soc.. 126. 557-562 (2004)