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酵母のカルネキシン及びPDIホモログノックアウトが蛋白質の品質管理に及ぼす影響

酵母のカルネキシン及びPDIホモログノックアウトが蛋白質の品質管理に及ぼす影響
酵母钙联蛋白和 PDI 同源物敲除对蛋白质质量控​​制的影响
批准号：
15032236
负责人：
加藤 昭夫
金额：
$1.34万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2003 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15032236/
关键词：
カルネキシンPDIシャペロンタンパク質品質管理酵母S. cerevisiae

项目摘要

项目成果

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酵母Saccharomyces cerevisiaeの膜結合型分子シャペロンであるカルネキシン、PDIホモログ(Eps1)が新生蛋白質の品質管理に関与することを証明するために、これらの分子シャペロンをノックアウトした酵母を作成し、リゾチームやシスタチンなどの不安定変異体をモデル蛋白質として、発現分泌させた。酵母のカルネキシンをノックアウトすることによって、アミロイド型変異リゾチームや不安定変異リゾチームが多量分泌することを明らかにし、この観察により、カルネキシンがタンパク質の品質管理に関与していることを明確に示した。また、酵母のカルネキシンのクローニングに成功し、その機能を詳細に調べた。その結果、カルネキシンはモデル蛋白質のリフォールドを促進するいわゆるシャペロン活性を示すが、モノグルコース型のハイマンノース糖鎖の存在下ではその機能は失われた。この観察は(1)カルネキシンのレクチンドメインが新生タンパク質との相互作用に必須であること。(2)新生タンパク質のフォールディングはレクチンドメインに近接した領域で行われることを示すものである。さらに、カルネキシンと同様に膜接合型分子シャペロンであるPDIホモログ(Eps1)をノックアウトした酵母を作成することに成功したので、この酵母を用いて、Eps1がSS結合を多く含む蛋白質(リゾチーム、シスタチン)の品質管理にどのような影響を及ぼすか検討したところ、Eps1ノックアウト酵母ではこれらのタンパク質が野生型酵母に比べ著しく分泌すること、また活性の低下したものが分泌していることが明らかになり、Eps1がSS結合を含むタンパク質の品質管理に関与していることが示された。
期刊论文(7)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
A.Saito, Y.Sako, M.Usui, H.Azakami, A.Kato: "Functional properties of glycosylated lysozyme secreted in Pichia Pastoris."Biosci.Biotech.Biochem.. 67. 2334-2343 (2003)
A.Saito、Y.Sako、M.Usui、H.Azakami、A.Kato：“毕赤酵母中分泌的糖基化溶菌酶的功能特性。”Biosci.Biotech.Biochem.. 67. 2334-2343 (2003)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.T.Liu, A.Saito, H.Azakami, A.Kato: "Expression purification, and characterization of an unstable lysozyme mutant in Pichia pastoris."Protein Expression and Purification. 27. 304-312 (2003)
S.T.Liu、A.Saito、H.Azakami、A.Kato：“毕赤酵母中不稳定溶菌酶突变体的表达纯化和表征。”蛋白质表达和纯化。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
加藤昭夫, 川岸明彦, 河田康志, 内海 成, 吉川正明, 山縣ゆり子: "タンパク質工学-生命科学系分野のための-"医学出版. 305 (2004)
Akio Kato、Akihiko Kawagishi、Yasushi Kawata、Sei Utsumi、Masaaki Yoshikawa、Yuriko Yamagata：“蛋白质工程 - 用于生命科学领域 -”医学出版 305（2004）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Begum, A.Saito, A.Kato, J.He, H.Azakami: "Expression and characterization of chicken ovoinhibitor in Pichia pastoris"Nahrung. 47. 359-363 (2003)
S.Begum、A.Saito、A.Kato、J.He、H.Azakami：“毕赤酵母中鸡卵抑制剂的表达和表征”Nahung。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
酵母のカルネキシン及びPDIホモログノックアウトが蛋白質の品質管理に及ぼす影響
  • 批准号：
    14037244
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    2002
  • 负责人：
    加藤 昭夫
  • 依托单位：
    Yamaguchi University
大豆アレルゲン(P34)の遺伝子工学的手法による抗原構造の解析とその低減化
  • 批准号：
    99F00118
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $0.83万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    加藤 昭夫
  • 依托单位：
    Yamaguchi University
酵母における小胞体カルネキシンノックアウトが新生糖蛋白の品質管理機能に及ぼす影響
  • 批准号：
    11153218
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 资助金额：
    $1.34万
  • 财政年份：
    1999
  • 负责人：
    加藤 昭夫
  • 依托单位：
    Yamaguchi University
酵母における小胞体カルネキシンノックアウトが新生糖蛋白の品質管理機構に及ぼす影響
  • 批准号：
    09276219
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.41万
  • 财政年份：
    1997
  • 负责人：
    加藤 昭夫
  • 依托单位：
    Yamaguchi University
国内基金
海外基金
酚脂/蓝光介导的 PDI 体系构建及对食源性致 病菌的作用机制与应用研究
  • 批准号：
    TGN24C200015
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2024
  • 负责人：
    石玉刚
  • 依托单位：
    浙江工商大学
靶向PDI新型抑制剂研发及其抗胶质母细胞瘤作用机制研究
硫脲基PDI聚合物内建电场调控及其近红外耦合过硫酸盐降解ICM的增效机制
  • 批准号：
    22306099
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    30万元
  • 批准年份：
    2023
  • 负责人：
    季秋忆
  • 依托单位：
    南京师范大学
构筑强内建电场PDI聚合物增强光催化—臭氧去除硝基苯的机理研究