酵母における小胞体カルネキシンノックアウトが新生糖蛋白の品質管理機構に及ぼす影響

酵母内质网钙连接蛋白敲除对新生糖蛋白质量控制机制的影响

• 批准号: 09276219
• 负责人: 加藤 昭夫
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09276219/
• 关键词: 多糖修飾; リゾチーム; シャペロン; カルネキシン

酵母S.cerevisiaeの小胞体膜に糖蛋白質に特異的なシャペロンカルネキシンをノックアウトしても酵母S.cerevisiaeは正常な細胞活動を行うことが明らかにされた。したがって、カルネキシンノックアウト酵母で、異種糖蛋白質のモデルとして安定性の異なるグリコシル化リゾチームを用いて分泌にどのような影響を与えるかを検討した。その結果、安定な変異体(wild-type,S91T)をグリコシル化したものはカルネキシン欠損株でも野生株でも差異なく多量に分泌した。一方、不安定変異体(SS結合破壊型C76A,ヘリックス不安定型K13D)をグリコシル化したものは野生型酵母では分泌が著しく抑制されたが、カルネキシン欠損酵母では多量に分泌した。この結果はカルネキシンの品質管理機構を証明しており、フォールディングしにくい不安定変異体をカルネキシンが捕捉し、分解する経路の存在を示すものである。興味深い点はカルネキシン存在株と欠損株での分泌量に一定の比率で相違が見られ、分泌と分解との間に平衡関係が存在していることが示された。現在、この点をさらに解明するために、さらに変異体の種類を増やし、この点を解明するための研究を進めている。

S. cerevisia has a small cell membrane glycoprotein-specific protein. To investigate the effects of different stability factors on the secretion of heterologous glycoproteins and yeast. As a result, stable wild-type (S91T) plants are secreted in different amounts. A single, unstable variant (SS binding C76A, SS unstable K13D) is secreted by wild-type yeasts. The results demonstrate the existence of a quality management system that captures and decomposes unstable components. There is a certain ratio between the secretion and decomposition of the plant. Now, this point is clear, this point is clear.

项目成果

加藤昭夫: "多糖修飾によるタンパク質の機能改変" 日本農芸化学会誌. 71. 608-611 (1997)

加藤昭夫：“通过多糖修饰对蛋白质进行功能修饰”，日本农业化学学会杂志 71. 608-611 (1997)。

Y.Shu, S.Nakamura,and A.Kato: "The role of polysaccharide-chain attachment to lysozyme in the excellent emulsifying properties of polymannosyl lysozyme." Nahrung. 42. 67-69 (1998)

Y.Shu、S.Nakamura 和 A.Kato：“多糖链附着在溶菌酶上对聚甘露糖基溶菌酶优异乳化特性的作用。”

H.Tanizaki, H.Tanaka, H.Iwata and A.Kato: "Activation of macrophages by sulfated glycopeptides in ovomucin,yolk membrane,and chalazae in chicken eggs." Biosci.Biotech.Biochem.61. 1883-1889 (1997)

H.Tanizaki、H.Tanaka、H.Iwata 和 A.Kato：“鸡蛋中卵粘蛋白、卵黄膜和合点中的硫酸化糖肽激活巨噬细胞。”

H.Arima, H.R.Ibrahim, T.Kinoshita and A.Kato: "Bactericidal action of lysozyme attached with various sizes of hydrophobic peptides to the C-terminal using genetic modification." FEBS Letters. 415. 114-118 (1977)

H.Arima、H.R.Ibrahim、T.Kinoshita 和 A.Kato：“利用基因修饰将不同大小的疏水性肽附着在 C 末端的溶菌酶的杀菌作用。”