酵母のカルネキシン及びPDIホモログノックアウトが蛋白質の品質管理に及ぼす影響

酵母钙联蛋白和 PDI 同源物敲除对蛋白质质量控​​制的影响

• 批准号: 14037244
• 负责人: 加藤 昭夫
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14037244/
• 关键词: カルネキシン; 分子シャペロン; タンパク質の品質管理; PDIホモログ; 酵母S. cerevisiae

酵母Saccharomyces cerevisiaeの糖タンパク質特異的な分子シャペロンカルネキシンをノックアウトすることによって、アミロイド型変異リゾチームや不安定変異リゾチームが多量分泌することを明らかにした。この観察はカルネキシンがタンパク質の品質管理に関与していることを示しており、分子病(アンフォールディング病)と分子シャペロンの機能との関連を明確に示すものである。今年度は酵母Saccharomyces cerevisiaeのカルネキシンのクローニングに成功し、その機能を詳細に調べた。その結果、カルネキシンはクエン酸シンターゼのリフォールドを促進するいわゆるシャペロン活性を示すが、モノグルコース型のハイマンノース糖鎖の存在下ではその機能は失われた。この観察は(1)カルネキシンのレクチンドメインが新生タンパク質との相互作用に必須であること。(2)新生タンパク質のフォールディングはレクチンドメインに近接した領域で行われる事を示す。今年度はさらに、カルネキシンと同様に膜接合型分子シャペロンであるPDIホモログ(Eps1)をノックアウトした酵母を作成することに成功したので、この酵母を用いて、Eps1がSS結合を多く含む蛋白質(リゾチーム、シスタチン)の品質管理にどのような影響を及ぼすか検討中である。

The molecular weight of yeast Saccharomyces cerevisiae, sugar, sugar, yeast, yeast. We need to check that the quality management equipment and the molecular disease can clearly show that the disease is not clear. This year, the yeast Saccharomyces cerevisiae was successful, and the machine was able to make a success of it. The results showed that there was no significant difference between the results and the results. The results showed that there was no significant difference between the results and the results. The results showed that the results showed that there was no significant difference between the results and the results, and the results showed that there was no significant difference in the results. It is necessary to observe that (1) the interaction between freshmen and freshmen must be affected. (2) the new students should be informed that they are close to each other in the field of business. This year, the membrane-conjugated molecules were used in the same way as the membrane-conjugated molecules (Eps1). The yeast was successfully made, the yeast was successfully used, and the Eps1 SS was combined with polysaccine-containing proteins. the results showed that the quality management of the membrane-bound molecules was successful, the yeast was used successfully, and the quality management of the multi-protein was used in this year.

项目成果

Y.Song, H.Azakami, S.Begum, J.He, A.Kato: "Different effect of calnexin deletion in Saccharomyces cerevisiae on the secretion of two glycosylated amyloidogenic lysozymes"FEBS Letters. 512. 213-217 (2002)

Y.Song、H.Azakami、S.Begum、J.He、A.Kato：“酿酒酵母中钙联蛋白缺失对两种糖基化淀粉样蛋白溶菌酶分泌的不同影响”FEBS Letters。

A.Saito, M.Usui, Y.Song, H.Azakami, A.Kato: "Secretion of glycosylated α-lacalbumin in yeast Pichia pastoris"J.Biochem.. 132. 77-82 (2002)

A.Saito、M.Usui、Y.Song、H.Azakami、A.Kato：“酵母毕赤酵母中糖基化 α-乳白蛋白的分泌”J.Biochem.. 132. 77-82 (2002)

Akio Kato: "Handbook of Food Enzymology"Marcel Dekker Inc.. 971-978 (2003)

加藤昭夫：“食品酶学手册”Marcel Dekker Inc.. 971-978 (2003)

S.T.Liu, A.Saito, H.Azakami, A.Kato: "Expression, purification and characterization of an unstable lysozyme mutant in Pichia pastpris"Protein Expression & Purification. 27. 304-312 (2003)

S.T.Liu、A.Saito、H.Azakami、A.Kato：“巴斯德毕赤酵母中不稳定溶菌酶突变体的表达、纯化和表征”蛋白质表达

Y.Song, A.Saito, M.Usui, H.Azakami: "Relation between the stability of lysozyme mutated at the inside hydrophobic core and secretion in Saccharomyces cerevisiae"Nahrung. 46, No3. 209-213 (2002)

Y.Song、A.Saito、M.Usui、H.Azakami：“内部疏水核心突变的溶菌酶的稳定性与酿酒酵母分泌之间的关系”Nahrung。