Mikrotubuli-vermittelter Transport von Herpes Simplex Virus Kapsiden

微管介导的单纯疱疹病毒衣壳运输

基本信息

  • 批准号:
    5118754
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    德国
  • 项目类别:
    Research Grants
  • 财政年份:
    1998
  • 资助国家:
    德国
  • 起止时间:
    1997-12-31 至 2006-12-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Herpes Simplex Virus Typ 1 (HSV 1) ist ein behülltes Virus, das für den Eintritt in die Zelle mit deren Plasmamebran fusioniert. Dynein und Dynactin vermitteln den Transport der viralen Kapside entlang von Mikrotubuli (MT) zum Zellkern. die Kapside binden an die Kernporen, um das virale Genom für die Transkription und Replikation in den Zellkern zu injizieren. Zytosolische Kapside werden vermutlich auch während der Virusausschleusung entlang von MT zum Ort der Membranumhüllung transportiert. Dabei scheint der Zelltyp zu bestimmen, ob Dynein für den Transport zum Trans-golgi-Netzwerk und frühen Endosomen oder Kinesin für den axonalen Transport in Neuronen zur präsynaptischen Plasmamembran verwendet wird. Mit Hilfe einer fluoreszenzmarkierten Virusmutante, die ein Fusiosprotein aus dem green-Fluorescent-Protein und dem Kasidprotein VP26 enthält, untersuchen wir den MT-Transport videomikroskopisch in lebenden Epithelzellen und Neuronen, die auch im menschlichen Wirt infiziert werden. Um die viralen und zellulären molekularen Determinanten dieses Transportes zu analysieren, haben wir einen biochemischen Versuchsansatz entwickelt in dem zum ersten Mal ein viraler zytoplasmatischer Transport in vitro rekonstruiert wurde. Mit diesen beiden Systemen können wir nun die molekularen Interaktionen zwischen den viralen und zellulären Strukturen während des MT-Transportes von HSV1 Kapsiden bestimmen. Die Proteinzusammensetzung diser Kapside ist vergleichsweise einfach und genetisch, biochemisch und strukturell charakterisiert. Aus diesem Grund ist die Analyse des viralen Kapsidtransportes sehr gut geeignet, die strukturellen Determinanten sowie die Regulierung dieses MT-vermittelten Transportes zu untersuchen.
单纯疱疹病毒1型(HSV 1)是一种真正的病毒,它可以通过与其他疟原虫融合的方式进入宿主体内。动力蛋白和动力肌动蛋白研究了病毒在微管(MT)中的转运。Kapside与Kernporen结合,这是Zellkern中的病毒基因的转录和翻译。Zytosolische Kapside韦尔登vermutlich auch während der Virus ausschleusung entlang von MT zum Ort der Membranumhüllung transportiert. Dabei scheint der Zelltyp zu bestimmen,ob Dynein für den Transport zum Trans-golgi-Netzwerk und frühen Endosomen or der Kinesin für den axonalen Transport in Neuronen zur präsynaptischen Plasmamembran verwendet wird.通过一种荧光标记突变病毒,一种由绿色荧光蛋白和Kappa蛋白VP 26组成的融合蛋白,我们可以在上皮细胞和神经细胞中观察到MT转运蛋白,也可以观察到维尔特感染韦尔登的情况。在病毒和细胞分子确定性疾病转运的分析中,我们对第一次体外病毒酶质转运进行了生物化学验证。这是一个很好的系统,我们可以将分子间相互作用的病毒和结构转化为HSV 1 Kapsiden的MT转运蛋白。Kapside的蛋白质组具有遗传学、生物化学和结构特征。本文通过对病毒性Kaplan-Meier转运体的分析,发现其结构决定因素可以对MT-病毒性Kaplan-Meier转运体进行调控。

项目成果

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