X連鎖劣性遺伝病DNA診断への遺伝子工学と発生工学の応用

基因工程和发育工程在X连锁隐性遗传病DNA诊断中的应用

• 批准号: 08877310
• 负责人: 野中 和明
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877310/
• 关键词: X連鎖劣性遺伝病; DNA診断; マウス受精卵; PCR法; 性別判定

【平成8年度】(1)2分割受精卵の人工培養法の検定・実験動物として近交系マウス(C57BL)を用い、2細胞期受精卵をマイクロ・マニピュレーターにより均等に2分割し、人工培養下でさらに初期胚盤胞期までの正常な発育を促した。(2)着床前マウス受精卵の性決定におけるPCR法の精度検定・2分割受精卵の片方を2細胞期で他方を初期胚盤胞期の二段階で、2種類の雄マウスに特異的プライマー(ZfyとDXNds3)を用いたPCR反応を行い、PCR産物のエチヂィン・ブロマイド染色後のゲル電気泳動による当該バンドの検出により、雌雄性決定の一致率を検定しPCR法の精度を確認することができるようになった。(3)性決定された受精卵の仮腹雌マウス子宮への移植と選択的雌雄マウスの産み分け検定・性決定された受精卵を、同系統の疑妊娠誘発雌マウスの子宮内へ移植し、出生直後に新生マウスの外性器の形態や乳腺の存在により、雌雄の判定を行う動物実験を行っている最中である。(4)同上実験を繰り返し行い、さらに上記のプロセスを経て産生された雌雄マウスのそれぞれの出生後成長能力や繁殖能力を交配実験によりデーターの蓄積と分析を行う。(5)得られた研究成果について、学会発表および論文発表を行なう。

[Heisei-8](1) Verification of the artificial culture method of 2-division fertilized eggs·Experimental animals and the inbred line Mars (C57BL) were used, and 2-cell stage fertilized eggs were equally divided into 2 parts. Under artificial culture, normal development of the initial blastoderm stage was promoted. (2)Pre-implantation determination of the sex determination of fertilized eggs by PCR: 2. division of fertilized eggs into two cell stages; 2. division of fertilized eggs into two stages of early blastoderm; 2. division of male eggs into two specific stages (Zfy and DXNds3) PCR reaction was performed in the middle of the PCR method, PCR products were detected after staining, and the agreement rate of female and male determination was determined. The accuracy of PCR method was confirmed. (3)Sex determination of fertilized eggs, pregnancy induction of female embryos, intrauterine transplantation, postnatal morphology of female genitals, presence of mammary glands, determination of sex, animal behavior, etc. (4)As above, we will analyze the accumulation of female and male reproductive ability after birth. (5)Get the results of your research and learn how to develop and publish your paper.

项目成果

NONAKA K,et al: "The effects of fetus weight,dew strain,dam weight and Litter Size on the craniofactal morphogenesis of CHFv mouse fefuses effected with cleft lip palale." The Cleft Palate-Craniofacial.Journal. July (in press). (1997)

NONAKA K 等人：“胎儿重量、露水应变、母体重量和窝产仔数对唇腭裂小鼠胎儿颅骨形态发生的影响。”