Reversible O-Phosphorylierung von Hydroxyprolin und Hydroxylysin in Proteinen

蛋白质中羟脯氨酸和羟赖氨酸的可逆 O-磷酸化

• 批准号: 5203434
• 负责人: Professor Dr. Ralf Hoffmann
• 金额: --
• 依托单位: Biotechnologisch-Biomedizinisches Zentrum (BBZ)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5203434?language=en
• 关键词: Reversible; Phosphorylierung; von; Hydroxyprolin; und

Der vorliegende Antrag hat das Ziel, bisher wenig untersuchte O-Phosphorylierungen an Hydroxy-L-prolin- und Hydroxy-L-lysinResten in Proteinen zu identifizieren sowie deren biochemische Bedeutung zu entschlüsseln. Dazu müssen zunächst grundlegende Methoden, insbesondere eine sensitive Analytik, entwickelt werden. Aufbauend auf unseren Vorarbeiten sollen die nötigen Aminosäurederivate synthetisiert und die Synthese der Phosphopeptide etabliert werden. Diese Phosphopeptide stellen dann die Grundlage für die Entwicklung einer umfassenden Proteinanalytik mittels Chromatographie, Gelelektrophorese, Aminosäureanalytik, Edman-Abbau, Massenspektrometrie und spezifischer Antikörper dar. Die sehr sensitive Massenspektrometrie verspricht die zentrale Methode zur Identifizierung phosphorylierter Hyp- und Hyl-Rese in Proteinen zu werden. Sobald in einem Protein ein Phospho-Hyp oder eine Phospho-Hyl identifiziert wird, kann mittels Sequenzanalyse die genaue Position bestimmt werden. An diesem Protein wird dann der Einfluß der Phosphorylierung auf die Struktur und die Funktion des Proteins untersucht. Ferner soll die beteiligte Kinase identifiziert werden. Besitzen die produzierten Antikörper eine ausreichend hohe Spezifität und Sensitivität, soll das Phosphorylierungsmuster des ausgewählten Proteins in verschiedenen Geweben und Organen untersucht werden.

Der vorliegende Antrag, das Ziel，等。研究了蛋白质中o - phospyliergen、羟基-l -prolin和羟基-l - lysinresten的鉴定方法。Dazu m<s:1> ssen zunächst grundlegende Methoden, insbesondere eine sensitive Analytik, entwickelt werden。合成与合成：合成与合成磷酸肽。Diese phosphop肽stellandanddie Grundlage f<e:1> r die Entwicklung einer umfassenden protein analytitik mitteles chromatography, gelelektrophose, Aminosäureanalytik, Edman-Abbau, massenspectrometer and spezfischer Antikörper dar。用高灵敏度质谱法鉴定蛋白质中磷酸基和磷酸基。Sobald in einem Protein in Phospho-Hyp der eine Phospho-Hyl的鉴定方法，kann mittels序列分析及基因位置估计。蛋白质的结构和功能与蛋白质的结构和功能有关。荧光激酶鉴定结果表明，荧光激酶鉴定结果为阴性。Besitzen die produczierten Antikörper eine ausreichend hohe Spezifität and Sensitivität， soll as phospylierungsmuster des ausgewählten蛋白质在verschiedenen Geweben和Organen untersucht werden。