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モノクローン抗体によるアルツハイマー神経原線維(PHF)の構成成分の分析

モノクローン抗体によるアルツハイマー神経原線維(PHF)の構成成分の分析
使用单克隆抗体分析阿尔茨海默病神经原纤维 (PHF) 成分
批准号：
60117009
负责人：
森 啓
金额：
$0.96万
依托单位：
Fukui Prefectural College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1985 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60117009/
关键词：
アルツハイマー病モノクローン抗体免疫電顕

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
1.抗PHFモノクローン抗体の性質ハイブリドーマDF-1は安定に高力価のモノクローン抗体を分泌する。 オクタロニー法により本モノクローン抗体がIgM型のラット抗体であることを決定した。 ホルマリン固定したアルツハイマー脳切片(海馬)において神経原線維がとくに強く反応しているのがわかる。 また細胞質全体にわたって一様に抗原物質が存在していることが示された。 部分精製した神経原線維変化を試料とした場合、アルツハイマー神経原線維が強く反応する一方、細胞質性の抗体陽性反応がほとんど消失した。 このことはもともと脳組織に含まれていた細胞質性の抗原物質が遠心操作によってアルツハイマー神経原線維画分の中には回収されないことを意味しており、遠心上清画分に除去されたことを示唆する。 金コロイド修飾二次抗体を用いた実験では、金コロイド粒子がPHF分子上に分布することが確認された。2.抗原分子の同定アルツハイマー病および正常脳のホモジェネートを超遠心の後、その上清画分と沈渣画分を別々に取り、SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動をおこなった。 ニトロセルロースへ転写後、ABC法によって抗体結合分子つまりPHF構成成分を同定した。 PHF本体に相当する分離ゲル上端部分がアルツハイマー脳沈渣画分にのみ特異的に反応した。 上清画分では、両脳組織に共通して分子量約5,000のタンパクが反応した(以下このタンパクを5Kタンパクと称する)。3.5Kタンパクの精製抗PHFモノクローン抗体と反応する5Kタンパクを脳ホモジェネートから超遠心上清画分として得る。 精製は硫安分画とHPLCによりおこない、95%以上の純標品を得た。 さらに5Kタンパクのアミノ酸配列のうち、N末(メチオニン)から34残基が決定された。
英文摘要
1.抗PHFモノクローン抗体の性質ハイブリドーマDF-1は安定に高力価のモノクローン抗体を分泌する。 オクタロニー法により本モノクローン抗体がIgM型のラット抗体であることを決定した。 ホルマリン固定したアルツハイマー脳切片(海馬)において神経原線維がとくに強く反応しているのがわかる。 また細胞質全体にわたって一様に抗原物質が存在していることが示された。 部分精製した神経原線維変化を試料とした場合、アルツハイマー神経原線維が強く反応する一方、細胞質性の抗体陽性反応がほとんど消失した。 このことはもともと脳組織に含まれていた細胞質性の抗原物質が遠心操作によってアルツハイマー神経原線維画分の中には回収されないことを意味しており、遠心上清画分に除去されたことを示唆する。 金コロイド修飾二次抗体を用いた実験では、金コロイド粒子がPHF分子上に分布することが確認された。2.抗原分子の同定アルツハイマー病および正常脳のホモジェネートを超遠心の後、その上清画分と沈渣画分を別々に取り、SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動をおこなった。 ニトロセルロースへ転写後、ABC法によって抗体結合分子つまりPHF構成成分を同定した。 PHF本体に相当する分離ゲル上端部分がアルツハイマー脳沈渣画分にのみ特異的に反応した。 上清画分では、両脳組織に共通して分子量約5,000のタンパクが反応した(以下このタンパクを5Kタンパクと称する)。3.5Kタンパクの精製抗PHFモノクローン抗体と反応する5Kタンパクを脳ホモジェネートから超遠心上清画分として得る。 精製は硫安分画とHPLCによりおこない、95%以上の純標品を得た。 さらに5Kタンパクのアミノ酸配列のうち、N末(メチオニン)から34残基が決定された。
期刊论文(0)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
アルツハイマー病脳アミロイドイメージングの分子論的解明
  • 批准号：
    20023027
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $4.61万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    森 啓
  • 依托单位：
    Osaka City University
パラメトリックX線によるXAFSを用いた化学反応の時間変化の測定法の検討
  • 批准号：
    20740144
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 资助金额：
    $0.92万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    森 啓
  • 依托单位：
    Nihon University
アミロイド分子のPETリガンドに関する基礎医学的研究
  • 批准号：
    18023033
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.25万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    森 啓
  • 依托单位：
    Osaka City University
パラメトリックX線を用いた波長スキャンを行わないXAFS解析法の検討
  • 批准号：
    17760059
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 资助金额：
    $2.18万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    森 啓
  • 依托单位：
    Nihon University
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