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血小板活性化におけるCキナーゼ系とカルシウム動員系の相乗作用

C-激酶系统与钙动员系统在血小板活化中的协同作用

基本信息

批准号：
60123004
负责人：
久米章司
金额：
$ 0.96万
依托单位：
山梨医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.抗ヒト血小板モノクロナル抗体(TP80,TP82)の作成。モノクロナル抗体は腹水系で得て、カラム(ゲル濾過)にて精製したが、クロマトチヤンバー中で、本研究費により購入したフラクション・コレクターおよびミニパルス・ポンプを用いて行い、十分なTP80およびTP82を得た。TP80は血小板膜蛋白(分子量約23000)を認識し、血小板活性化(凝集・放出反応)を惹起させる。TP82は血小板膜糖蛋白GP【II】b-【III】aを認識し、各種血小板凝集惹起物質による血小板凝集反応の抑制作用を示した。2.血小板蛋白のリン酸化反応。発癌プロモーター・テレオシジンにより40K蛋白のリン酸化がすみやかに認められ、その後20K蛋白のりン酸化も認められた。テレオシジン凝集はTP82により阻害されたが、リン酸化反応には阻害作用は認められなかった。TP80により20Kおよび40K蛋白のリン酸化がすみやかに認められた。3.Quin2法による【Ca^(2+)】動態の検討。テレオシジンによってはQuin2法によって検出される細胞内【Ca^(2+)】濃度の上昇は認められなかった。これはトロンビン等の刺激物質と異なる点である。4.アスピリン処理血小板を用いた検討。アスピリン処理することによってテレオシジンの作用をおもにCキナーゼ活性化に限定し、一方ADPの作用をカルシウム動員系(20K蛋白リン酸化)に限定することが出来る。このアスピリン処理血小板を用いた場合、テレオシジンあるいはADP單独ではATPやセロトニンの放出反応(すなわちdense bodyの放出反応)は認められないが、両者存在下この放出反応が認められた。おそらくdense bodyよりの放出反応惹起のためには、Cキナーゼ系とカルシウム動員系の相乗作用が必要と考えられる。現在この相乗作用の詳細について検討中である。

1. Preparation of anti-Hydrocyte Platelet Antibodies (TP80, TP82). Ascites-based antibodies to モノクロナル are obtained, カラム(ゲルfilter) is refined, クロマトチヤンバー中で, and the research fee is によりBuy したフラクション・コレクターおよびミニパルス・ポンプを Use いて行い, 10なTP80およびTP82をgetた. TP80 is a platelet membrane protein (molecular weight about 23,000) that recognizes and causes platelet activation (aggregation and release of reactions). TP82 recognizes the platelet membrane glycoprotein GP【II】b-【III】a and shows various platelet aggregation-causing substances and inhibitory effects on platelet aggregation reaction. 2. Platelet protein acidification reaction.発 Cancer プロモーター・テレオシジンにより40K protein のリン acidification がすみやかに admitted められ, その后20K protein のりン acidified も recognized められた. The agglomeration of TP82 is a blocker of TP82, and the acidification reaction of ruton is a blocker of TP82. TP80により20Kおよび40K protein acidified acidified acidified acid. 3.Quin2 methodによる【Ca^(2+)】dynamic discussion.テレオシジンによってはQuin2 method によって検出されるThe intracellular [Ca^(2+)] concentration rises and the められなかった is recognized. Stimulating substances such as これはトロンビン and other irritating substances are also used. 4. Use アスピリン to process platelets using いた検.アスピリンtreatmentすることによってテレオシジンのeffectをおもにCキナーゼactivationにlimitedし, the function of ADP is the mobilization system (20K protein ligation), which is limited to 20K protein. When using このアスピリン to treat platelets, テレオシジンあるいはA DP alone, ATP, release reaction (すなわちdense) Bodyのreleases the reaction (reaction)はcognizeめられないが, and in the presence of the bodyこのreleases the reaction and recognizes the reaction.おそらくdense body よりの releases the reaction to cause のためには, Cキナーゼsystem とカルシウムmobilization system の multiplying effect is necessary and とtest えられる. Now the details of the multiplication effect are discussed in detail.