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シトクロム酸化酵素によるH⌒チャンネル開閉と酸素還元反応とのカップリング機構

细胞色素氧化酶H⌒通道打开/关闭与氧还原反应的耦合机制

基本信息

批准号：
60215017
负责人：
北川禎三
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60215017/
关键词：
シトクロム酸化酵素共鳴ラマンプロトンポンプ電子伝達

项目摘要

チトクロム酸化酵素(CcO)は好気的生物の呼吸鎖末端酸化酵素であり【O_2】を【H_2】Oに還元すると同時に【H^+】をポンプする役を担う。本酵素は2個のヘムを含む。1つは【O_2】還元反応を触媒するヘムで、これを含む部分をCyt【a_3】と略記する。もう1つのヘムはチトクロムCより電子を受けとりCyt【a_3】にわたす電子伝達の役を担う。これを含む部分をCytaと略記する。【O_2】を1分子還元するのに4個の電子が必要である。そして電子1個につき1個の【H^+】がポンプされることがわかっている。本酵素の酵素サイクルのどの段階で【H^+】が汲み出されるかを明らかにするという目標の第1段階として、本年度はCcOの反応中間体を取扱った。CcOの反応中間体には、Cyta→Cyt【a_3】の電子伝達反応中間体と【O_2】→【H_2】Oの酵素反応中間体とがある。学会誌発表欄の第1番は前者、第2番は後者に関するもので第3番が両者のカップリング機構を調べるための研究である。第1の主題に関しては、まずCcOがレーザー光で光還元を受けることを可視吸収スペクトルで証明し、それが【O_2】還元活性をもつことを【O_2】電極で証明した。【O_2】存在下で光還元と【O_2】還元反応との定常状態にあるCcOの共鳴ラマンを441.6nmのレーザー光で観測するとCytaが、406.7nmのレーザー光で観測するとCyt【a_3】が見えることをまず示し、Cytaが【Fe^(2+)】,Cyt【a_3】が【Fe^(3+)】状態のラマンスペクトルを確立すると共に、Cyta→Cyt【a_3】の電子伝達の反応速度定数が0.5【s^(-1)】であることを明らかにした。第2の主題に関しては、ミクストフロー過度ラマン測定装置を製作し、一酸化炭素結合型Ccoと【O_2】飽和溶液とのミクストフローにレーザー光をあてて一酸化炭素を光解離して反応を開始させ、10〜100μsの時間帯にある中間体の共鳴ラマンを初めて報告した。第3の主題に関しては、電子伝達機能はもつが【H^+】ポンプ機能をもたないCcOをつくり出し、その共鳴ラマンを正常のものと比較したところ、Cyt【a_3】の鉄-ヒスチヂン伸縮振動のラマン線強度が酵素活性に敏感であることがわかった。

The enzyme CcO is responsible for the enzyme activity of respiratory lock terminal acidification of living organisms. This enzyme contains two main enzymes. 1. A brief description of [O_2] and [a_3] is given. The first is to send a message to the host. A brief account of the contents of the article. [O_2] 4 electrons are necessary for the reduction of 1 molecule. 1 electron, 1 electron 1 electron, 1 electron 1 electron This enzyme is the first stage of the enzyme chain. This year, CcO is the first stage of the enzyme chain. Cyta→Cyt [a_3] → Cyt [O_2] → Cyt [H_2] →Cyt [a_3] → Cyt [a_3 → Cyt [a_3] → Cyt The first part of the journal is related to the former, the second part is related to the latter, and the third part is related to the research of the organization. The first theme is related to the detection of CcO and the detection of photo-active elements. The detection of photo-active elements is related to the detection of optical absorption. The detection of photo-active elements is related to the detection of O_2 electrodes. In the presence of [O_2], the resonance of CcO at 441.6nm and the detection of CcO at 406.7nm are observed. Cyt [a_3] is observed in the presence of [Fe^(2+)],Cyt [a_3] is observed in the presence of [Fe^(3+)]. Cyta→Cyt [a_3] electron transfer and reverse velocity fixed number is 0.5 [s^(-1)] The second topic is about the manufacture of an apparatus for measuring the photodissociation of an acidified carbon-bound Cco saturated solution and the initiation of photodissociation of an acidified carbon in a time range of 10 to 100μs. The third theme is related to the function of electronic transmission. The function of electronic transmission is related to the function of [H^+]. The function of electronic transmission is related to the function of [H^+]. The resonance is related to the normal function. The comparison is related to the strength of the line of vibration of Cyt [a_3].