通过RNA聚合酶的功能转换验证转录调控模型-猫眼课题宝

通过RNA聚合酶的功能转换验证转录调控模型

批准号：

60440108

负责人：

石浜明

金额：

$18.37万

依托单位：

National Institute of Genetics

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for General Scientific Research (A)

财政年份：

1985

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1985 至 1987

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60440108/

关键词：

転写調節 RNAポリメラーゼ転写因子プロモーター蛋白機能分子集合大腸菌遺伝子クローニング DNAシークエンス熱ショック緊縮制御酵素機能制御

项目摘要

项目成果

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遺伝子の転写が,転写酵素RNAポリメラーゼの機能変換による転写対象遺伝子選択の変化に基因して調節されると考えた仮説を実証する目的の研究を展開し,以下の成果を得た.1) 大腸菌遺伝子のプロモーター約100種のコレクションを作製し,正常に増殖した大腸菌より純化したRNAポリメラーゼホロ酵素(Eσ^<70>)によって,「試験管内混合転写」実験を行った. 転写水準の比較から,これらプロモーターの強度を決定し,順列を明らかにした.2) プロモーター・コレクションを用いて,熱ショック時に誘導合成されるRNAポリメラーゼ(Eσ^<32>)のプロモーター選択能を解析し,プロモーターは,両酵素形態のいづれかでだけ認識され, 完全分化が成立していることを証明した.3) RNAポリメラーゼ蛋白上で,プロモーター認識に関与する部位を同定する目的で,アミノ酸置換変異RNAポリメラーゼのコレクションを作製した. 変異RNAポリメラーゼの機能異常の分析から,βサブユニット上の機能地図を作成した.4) 大腸菌の2種のシグマサブユニット(σ^<70>,σ^<32>)に共通して存在する14アミノ酸残基の合成ペプチドに対する抗体を作製した. この抗体に反応する大腸菌蛋白数種類を同定した. これらを単離し,その構造とRNAポリメラーゼ結合活性を調べた.5) RNAポリメラーゼに特異的に相互作用を示す転写因子を多数同定した. そのひとつ,SSP(〓縮抑制蛋白)については,遺伝子を単離し,その構造と発現特性を明らかにした.

期刊论文(20)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

J.Biol Chem.260-11. (1985)

J.Biol Chem.260-11。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Fujita, N.: Molecular & General Genetics. 210. 1-4 (1987)

藤田，N.：分子

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Ishihama, A.: Proteins: Structure, Function and Genetics. 2. 42-53 (1987)

Ishihama, A.：蛋白质：结构、功能和遗传学。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Nucleic.Acids Res.13-21. (1985)

核酸研究 13-21。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Ishihama, A.: Molecular & General Genetics. 206. 185-191 (1987)

石滨，A.：分子

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

共 12 条

金属応答の遺伝子制御機構の解明

批准号：

12147209
项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
资助金额：

$28.35万
财政年份：

2003
负责人：

石浜明
依托单位：

Nippon Institute for Biological Science (2002-2004)National Institute of Genetics (2000-2001)