Molekulare Charakterisierung von plastidären Phosphoenolpyruvat Translokatoren und Phosphattranslokator-Homologen in Arabidopsis

拟南芥质体磷酸烯醇丙酮酸转位子和磷酸转位子同源物的分子表征

基本信息

项目摘要

Plastiden verfügen über mehrere Phosphattranslokatoren (PT), die unterschiedlichen physiologischen Aufgaben dienen: Translokatoren für Triosephosphate (TPT), Phosphoenolpyruvat (PPT), Glukose 6-phosphat (GPT) und Pentosephosphate (RPT). Entsprechende cDNAs konnten aus verschiedenen Pflanzen isoliert werden. Das Projekt umfaßt zum einen Arbeiten zu den Phosphattranslokatoren aus Arabidopsis thaliana: Erfassung der jeweiligen gewebe- und zellspezifischen Expressionsprofile über Promotor-Reportergenfusionen und immunhistochemische Detektion der Proteine; die Suche nach und die Charakterisierung von knockout-Mutanten bzw. antisense Transformanden auch über eine DNA-Filteranalyse; Untersuchungen zum PPT als potentieller Sulfat-Transporter und zur PPT-knockout Mutante cue1 im Zusammenhang mit der Stellung von Phosphoenolpyruvat als zentraler Stoffwechselmetabolit in den Plastiden. Zum anderen sollen die Phosphattranslokatoren aus anderen ausgewählten Systemen untersucht werden: PTs aus C4- und CAM-Pflanzen (Funktion, molekulare Charakterisierung besonders von unterschiedlichen PPTs) und der Phosphattranslokator aus der thermo- und acidophilen Rotalge Galdieria sulphuraria, der eine mögliche PT-Urform darstellt und über dessen Produktion in heterologen Systemen die Möglichkeit eröffnet wird, einen thermostabilen Transporter für Strukturuntersuchungen bereitzustellen.
Plastiden verfügen über mehrere Phosphattranslokatoren(PT),die unteriedlichen physiologischen Aufgaben dienen:Translokatoren für Triosephosphate(TPT),Phosphoenolvat(PPT),Glukose 6-phosphat(GPT)und Pentosephosphate(RPT). cDNA的扩增来自于染色体分离韦尔登。拟南芥磷酸转座酶的研究:启动子-报告基因融合蛋白质的表达谱和蛋白质的免疫组化检测;敲除突变体后的结果和特征。反义转化也可进行DNA筛选分析;通过对磷酸烯醇化酶的激活,研究PPT对硫酸盐转运蛋白的作用,并通过PPT敲除突变体,在质体中进行中间代谢。Zum anderen sollen die Phosphattranslokatoren aus anderen ausgewählten Systemen untersucht韦尔登:C4-和CAM-Pflanzen所致PT(功能,分子特性取决于非变性PPT)和嗜热嗜酸的硫基旋转Galdieria的磷酸转移酶,在异质系统中形成一种Möglichkeit eröffnet wird,einen thermostabilen Transporter für Strukturuntersuchungen bereitzustellen.

项目成果

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