血液幹細胞のクロ-ンソ-ティングによるBリンパ球初期分化の研究

造血干细胞克隆分选对B淋巴细胞早期分化的研究

• 批准号: 01570693
• 负责人: 須田 年生
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570693/
• 关键词: 血液幹細胞; B細胞; ストロマ細胞; IL-7; 胎児肝細胞

我々は今までにB220抗原陰性(B220^-)の血液幹細胞がストロマ細胞との共培養により、B220^+,IgM^+細胞に分化することをクロ-ンレベルで明らかにした。最近、このストロマ細胞から、細胞接着などの刺激により、IL-7が産生されていることがわかった。そこで、我々は、IL-7かB細胞の初期分化にどのように関わっているかを検討した。IL-7は、COS-1細胞にIL-7遺伝子を導入し、その培養上清を部分精製して用いた。B細胞及び骨髄系前駆細胞の培養はメチルセルロ-ス法によって行った。マウス骨髄細胞及びコロニ-厚生細胞は、各種抗体で染色したあと、FACStarを用いて解析した。マウス骨髄細胞では、IL-7の存在下において、約1/10^3の頻度で、小型細胞からなるコロニ-が形成された。これらのコロニ-構成細胞の約100%がB220^+で、約20-40%がIgM^+であった。FACSにより骨髄細胞を各分画に分離して検討したところ、IL-7の標的細胞はB220^+,IgM^-に存在することが分かった。以上のことより、IL-7はB220^+のpreB細胞に作用し、一部IgM^+細胞への分化を指示する。B220^-細胞からB220^+細胞への分化にはストロマ細胞あるいはストロマ細胞由来の因子が関与すると考えられた。また、in vitroで推測された上記のモデルが、生体内におけるB細胞分化にもあてはまることが分かりつつある。すなわち在胎12〜14日目のマウス胎児肝にはB220^+細胞がなく、IL-7に対する反応性はみられなかった。在胎日数が進むにつれて、IL-7反応細胞の頻度が増加した。また在胎12-14日目には、間質細胞に反応して、B細胞に分化しうるProB細胞が存在することが明らかとなった。今後、間質細胞は細胞接着に必要であるのか、あるいは新たな増殖因子を産生しているのか、コラ-ゲンゲルなどを用いて検討を進めていく予定である。

Today I 々 は ま で に B220 antigen negative (B220 ^ -) の blood stem cells が ス ト ロ マ cells と の trained に よ り, B220 ^ +, IgM ^ + cells に す る こ と を ク ロ - ン レ ベ ル で Ming ら か に し た. Recently, こ の ス ト ロ マ cells か ら, cells then な ど の stimulus に よ り, IL - 7 が さ れ て い る こ と が わ か っ た. そ こ で, I 々 は, IL - 7 か B cells early の に ど の よ う に masato わ っ て い る か を beg し 検 た. IL-7, COS-1 cells にIL-7 progeny 伝 を introduction to <s:1>, そ <s:1> culture supernatant を partial refinement of て て use た た. B cells and pre-駆 cells of the び bone marrow line were <s:1> cultured using the <s:1> メチ セ セ ロ ロ-ス method によって for った. Youdaoplaceholder0 ウス bone marrow cells and びコロニ- thickening cells, various antibodies で staining <s:1> たあと, FACStarを using て て to resolve た た. マ ウ ス bone marrow cells で は, the presence of IL - 7 の に お い て, about 1/10 ^ 3 の frequency で, small cell か ら な る コ ロ ニ が formed さ れ た. <s:1> れら コロニ コロニ- constitutes cells <s:1> approximately 100%がB220^+で, approximately 20-40%がIgM^+であった. Both FACS に よ り を bone marrow cells each painting に separation し て beg し 検 た と こ ろ, IL - 7 の target cells は B220 ^ +, IgM ^ - に exist す る こ と が points か っ た. Above の こ と よ り, IL - 7 は B220 ^ + の preB cells に し, an IgM ^ + cells へ の differentiation を instructions す る. B220 ^ - cell か ら B220 ^ + cells へ の differentiation に は ス ト ロ マ cells あ る い は ス ト ロ マ cell origin の factor が masato and す る と exam え ら れ た. ま た, the in vitro で speculation さ れ た written の モ デ ル が, born in vivo に お け る B cell differentiation に も あ て は ま る こ と が points か り つ つ あ る. す な わ ち in fetal 12 ~ 14 mu の マ ウ ス tire where liver に は B220 ^ + cells が な く, IL - 7 に す seaborne る anti 応 sex は み ら れ な か っ た. The number of gestational days が enters むに むに れて れて, and the <s:1> frequency が of IL-7 anti-応 cells が increases た た. ま た に fetal 12-14 items は, mesenchymal cells に anti 応 し て, B cells に し う る が ProB cells exist す る こ と が Ming ら か と な っ た. In the future, interstitial cells は then に necessary で あ る の か, あ る い は new た な raised を colonization factors produce し て い る の か, コ ラ - ゲ ン ゲ ル な ど を with い て beg を 検 into め て い く designated で あ る.

项目成果

Suda T.et al: "Early B cell differentiation from hematopoietic stem cells in the presence of stromal cells and interleukin-7(IL-7)" Experimental Hematology Today. (1990)

Suda T. 等人：“在基质细胞和白细胞介素 7 (IL-7) 存在的情况下从造血干细胞分化出早期 B 细胞”《今日实验血液学》。

Suda T.et al: "Effect of recombinant murine interleukin-7(IL-7)on B-cell colony formation and an inhibitory effect of IL-1" Blood. 74. 1936-1941 (1989)

Suda T.et al：“重组鼠白细胞介素 7 (IL-7) 对 B 细胞集落形成的影响和 IL-1 的抑制作用”血液。

Kurihara N.et al: "Generation of osteoclasts from isolated hemopoietic progenitor cells" Blood. 74. 1295-1302 (1989)

Kurihara N.等人：“从分离的造血祖细胞中生成破骨细胞”血液。

Komatsu N.et al: "Growth and differentiation of a human megakaryoblastic cell line;CMK" Blood. 74. 42-48 (1989)

Komatsu N.et al：“人类巨核细胞系的生长和分化；CMK”血液。

Wada H.et al: "Expression of ABH and MN group antigens on human erythroid progenitors in liquid culture system" Blood. 75. (1990)

Wada H.等人：“液体培养系统中人红系祖细胞上 ABH 和 MN 组抗原的表达”血液。