遺伝子操作により抗腫瘍活性を増強したエフェクタ-細胞の樹立と新しい免疫療法の開発

通过基因操作建立具有增强抗肿瘤活性的效应细胞并开发新的免疫疗法

• 批准号: 02670627
• 负责人: 宮武 伸一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670627/
• 关键词: LAK; ILー2; ILー5; ILー7; cDNA

先ず、組替え遺伝子導入を図るため、マウスILー2,ILー5,ILー7の各リンホカイン遺伝子(cDNA)を組み込んだレトロウイルスベクタ-を作成した。これらベクタ-が実際に感染し、各遺伝子産物を発現することをマウス繊維芽細胞を用いて確認した。次に抗腫瘍エフェクタ-細胞としてマウス脾細胞よりILー2存在下にNKーlikeな活性を有するlymphokineーactivated killer(LAK)クロ-ンの樹立を図った。このクロ-ンの樹立が極めて困難であったため半年余りを費やしてしまった。結局長期維持培養可能なクロ-ンの樹立が出来なかった為、京都大学医学部免疫研究施設の栗林景容博士よりLAKクロ-ンの供与を頂き実験を行っている最中である。ただILー2依存性のリンパ球の長期安定培養が技術的に困難であるため、現在のところ遺伝子導入を確認したリンパ球株の樹立は出来ていない。そこでこれら実験と並行して、マウス神経系腫瘍にこれらリンホカイン遺伝子を導入し、in vivoにおいてこれら遺伝子導入腫瘍細胞の発育成長もしくは生体よりの拒絶機構がどの様に変化するのか解析を行おうとしている。マウスグリオ-マ株203ーgliomaに現時点では、ILー7の遺伝子導入に成功しており、この遺伝子導入腫瘍株のin vitroにおける形質の変化を調べているところであるが、近日中にマウスを用いて、in vivoに実験にかかる予定である。

ず, group for え first posthumous son 伝 import を 図 る た め, マ ウ ス IL ー 2, IL ー 5, IL ー 7 の each リ ン ホ カ イ ン heritage 伝 child (cDNA) を group み 込 ん だ レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ - を made し た. こ れ ら ベ ク タ - が be interstate し に infection, the heritage of the latter's 伝 content を 発 now す る こ と を マ ウ ス 繊 を d bud cells with い て confirm し た. Times に swollen sores エ フ ェ ク タ - cell と し て マ ウ ス spleen cells よ り IL ー に NK in the presence of 2 ー like な activity を す る lymphokine ー activated killer (LAK) ク ロ - ン の set を 図 っ た. <s:1> ロ ロ- <e:1> it is extremely めて difficult to establish が であったため more than half a year <s:1> を cost や て まった まった まった まった まった Ending its long-term training may な ク ロ - ン の set out が な か っ た for immune, Kyoto university health science research facilities の LiLinJing let Dr. よ り LAK ク ロ - ン の を and supply top き be 験 を line っ て い る in most で あ る. た だ IL 2 dependency ー の リ ン パ ball の long-term stability and cultivate が technology difficulty に で あ る た め, now の と こ ろ posthumous son 伝 import を confirm し た リ ン パ ball strains の set out は て い な い. そ こ で こ れ ら be 験 と parallel し て, マ ウ ス 経 god is swollen sores に こ れ ら リ ン ホ カ イ ン heritage 伝 を import し, the in vivo に お い て こ れ ら heritage 伝 import swollen sores cells の 発 nurtures the growth も し く は raw body よ り の refused to institutions が ど の others に variations change す る の か parsing line を お う と し て い る. マ ウ ス グ リ オ - マ strains 203 ー glioma に now point で は, IL ー 7 の posthumous son 伝 import に successful し て お り, こ の posthumous son 伝 import swollen sores の strains in vitro に お け る character の variations change を adjustable べ て い る と こ ろ で あ る が, recently に マ ウ ス を with い て, the in vivo に be 験 に か か る designated で あ る.

项目成果

S.Miyatake: "Efficient tumor suppression by interferonーγ geneーtrensferred gliomaーspecific murine cytotoxic Tーlymphocytes." J.Natl.Cancer Inst.82. 217-220 (1990)

S.Miyatake：“通过干扰素-γ 基因转移的神经胶质瘤特异性小鼠细胞毒性 T 淋巴细胞有效抑制肿瘤。”J.Natl.Cancer Inst.82 (1990)。

S.Kondoh: "Mechanism of IFNーγーinduced protection of human phiasarunk cells from lynphokineーactivated killer(LAK)lysis:Dirision of LAK cells into NKー and Tーlike cells." Cancer Res.

S. Kondoh：“IFN-γ 诱导保护人类 phiasarunk 细胞免受淋巴因子激活的杀伤细胞 (LAK) 裂解的机制：LAK 细胞分化为 NK 细胞和 T 样细胞。”

T.Aoki: "Synergy of mouse recomtinant interleukin 5 with interleukin 2 in the generation of lymphokineーactivated killer cells in vitro" Cancer Res.

T.Aoki：“小鼠重组白细胞介素 5 与白细胞介素 2 在体外生成淋巴因子激活的杀伤细胞中的协同作用”Cancer Res。

S.Miyatake: "Decreased susuptibility of lined human gliosarcoma cells to lymphokine activated killer cell cytolysis by γーinterferon treatment" Cancer Res.50. 596-600 (1990)

S.Miyatake：“γ-干扰素治疗降低了排列的人神经胶质肉瘤细胞对淋巴因子激活的杀伤细胞溶解的敏感性”Cancer Res.596-600 (1990)。

渡部 好彦: "遺伝子工学的手法による癌治療の展望ーインタ-フェロンーγ遺伝子導入細胞を用いた一つの展開" 実験医学. 8. 904-909 (1990)

Yoshihiko Watanabe：“使用基因工程技术治疗癌症的前景 - 使用干扰素-γ 基因转染细胞的一项进展”《实验医学》，8. 904-909 (1990)。