スフィレゴリピド-シスにおける骨髄移植療法の有効性に関する研究

骨髓移植治疗血管脂质沉积症的有效性研究

• 批准号: 03670491
• 负责人: 乾 幸治
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670491/
• 关键词: クラツベ病; 骨髄移植; 遺伝子導入

人クラツベ病のモデルマウスであるtwitcher mouseを用いその病態を生化学的に、形態学的に解明するとともに、骨髄移植、遺伝子治療を行い、人スフィンゴリピド-シスの治療の可能性の研究を行なった。1)病態の解析のために、Twitcher mouseの座骨神経の培養を行い、 ^3Hベルガラクト-スを添加し、ガラクトシルセラミド(Galcer)、ガラクトシルサイコシン(Galpsy)の合成能を検討し、また各々の合成酵素を測定した。その結果、罹患マウスでは生後1週目マウスですでにGalcerの合成能が低下し、4週目では正常の15%に低下していた。罹患マウスで蓄積の認められるGalpsyの合成能は正常と差がなく、1週間のガラクト-ス添加にて始めてGalpsyの蓄積が認められた。スフィンゴシンラベルのGalcer,Galpsy添加実験から、Galcerは直接Galpsyに代謝されることはなく、またGalpsyはスフィンゴシンに代謝されたのち、Galcerに合成されることが判明した。Galcer,Galpsyの合成酵素は2週目で、罹患マウスで正常の50%以下に低下していた。2)治療の試みとして成熟マウス大腿骨より得られた骨髄細胞(6×10^7cell)及び、4週齢4ウス大腿皿頭筋より得られた筋芽細胞(4×10^6cell)を用い、大腸菌のIac8遺伝子にchicken beta actinプロモ-タ-をつないだ遺伝子,Luciferase遺伝子に同様のプロモ-タ-をつないだもので導入遺伝子として、HV3リポゾ-ム法を用い、細胞融合法にて行なった。各々培養細胞でのマ-カ-遺伝子の一過性の発現は認められたが、それをマウスに移植し、各臓器への分布、上記記載した代謝異常の改善を認めるまでには致っていない。今後、遺伝子導入の効率の上昇、発現期間の延長のための導入方法について検討する。

People ク ラ ツ ベ disease の モ デ ル マ ウ ス で あ る twitcher mouse を with い そ の pathological を に of biochemistry, morphological に interpret す る と と も に, bone marrow transplantation, heritage 伝 treatment line を い, people ス フ ィ ン ゴ リ ピ ド - シ ス の treatment line の の possibility research を な っ た. 1) pathological の parsing の た め に, Twitcher mouse の statue bone 経 の を line い, ^ 3 h ベ ル ガ ラ ク ト - ス を add し, ガ ラ ク ト シ ル セ ラ ミ ド (Galcer), ガ ラ ク ト シ ル サ イ コ シ ン (Galpsy) の synthesis can を beg し 検, ま た each 々 の を synthetic enzyme determination し た. そ の results, suffering from マ ウ ス で は postnatal 1 week マ ウ ス で す で に Galcer の synthesis can lower が し, 4 weeks mesh で は normal の 15% low に し て い た. Suffering from マ ウ ス で accumulation の recognize め ら れ る Galpsy の synthesis can は normal と poor が な く, 1 week between の ガ ラ ク ト - ス added に て beginning め て Galpsy の accumulation が recognize め ら れ た. ス フ ィ ン ゴ シ ン ラ ベ ル の Galcer, Galpsy add be 験 か ら, Galcer は directly Galpsy に metabolic さ れ る こ と は な く, ま た Galpsy は ス フ ィ ン ゴ シ ン に metabolic さ れ た の ち, Galcer に synthetic さ れ る こ と が.at し た. Galcer,Galpsy <s:1> synthetic enzyme ウスで 2 weeks で, suffering from ウスで normal <s:1> less than 50% に low <s:1> て た た た. 2) treatment の try み と し て mature マ ウ ス thighbone よ り have ら れ た bone marrow cells (6 x 10 ^ 7 cell) and び, 4 weeks 齢 4 ウ dish head ス thigh muscle よ り have ら れ た reinforcement bud cells (4 x 10 ^ 6 cells) を い, coliform の Iac8 伝 に chicken son beta Actin プ ロ モ タ - を つ な い だ heritage 伝, Luciferase posthumous son 伝 に with others の プ ロ モ タ - を つ な い だ も の で import legacy 伝 son と し て, HV3 リ ポ ゾ - ム を い, cell fusion method に て line な っ た. Each 々 culture cell で の マ カ - heritage 伝 son の transient の 発 は now recognize め ら れ た が, そ れ を マ ウ ス し に transplantation and the viscera へ の distribution, written records し た metabolic abnormalities の improve を recognize め る ま で に は to っ て い な い. In the future, the efficiency of 伝 seed import will increase, the occurrence period will be extended, and the ため import methods will be に, <s:1>, て検 and する.

项目成果

Midorikawa M,et al.: "Uptake and metabolism of radiolabelled GMlーganglioside in skin fibroblasts from controls and patients with GMlーgangliosidosis." J Inher Metab Dis. 14. 721-729 (1991)

Midorikawa M等人：“来自患有GM1神经节苷脂沉积症的对照和患者的皮肤成纤维细胞中放射性标记的GM1神经节苷脂的摄取和代谢。”J Inher Metab Dis。

Taniike M,et al.: "Localization of sphingolipid activator proteinー1(SAPー1) in the brain of a normal human and a patient with metachromatic leukodystrophy." Acta Histochem Cytochem. 24(2). 215-222 (1991)

Taniike M 等人：“正常人和异染性脑白质营养不良患者大脑中鞘脂激活蛋白 1 (SAP-1) 的定位”，Acta Histochem Cytochem 24(2)。

Nishimoto J,et al.: "GMlーgangliosidosis(genetic βーgalactosidase deficiency):identification of four metations in different clinical phenotypes among japanese patients." Am J Hum Genet. 49. 566-574 (1991)

Nishimoto J 等人：“GM-神经节苷脂沉积症（遗传性 β-半乳糖苷酶缺乏症）：日本患者不同临床表型的四种代谢的鉴定。Am J Hum Genet。”